Liste des posters et posters commentés 2021
Cliquez sur l’icône pour visualiser le résumé du poster.
►Les pdf des posters ainsi que les présentations avec commentaires audio des posters commentés seront disponibles au téléchargement sur cette plateforme à partir du lundi 8 novembre. Le dépôt de ces fichiers autorise par défaut leur mise en ligne.
► Les posters seront exposés pendant toute la durée du congrès du mercredi 24 novembre 8h30 au vendredi 26 novembre 12h45. 
Les posters non récupérés seront détruits et, par conséquent, aucun poster ne sera renvoyé.

► L'auteur présentant le poster est invité à se tenir devant son poster pendant les pauses afin de répondre aux éventuelles questions des participants.
 Une visite officielle des posters est organisée le jeudi 25 novembre de 14h00 à 14h30.

► Pour les posters commentés, la présence du présentateur devant son poster est obligatoire pendant la session de posters commentés : le jeudi 25 novembre de 14h00 à 14h30.
► Afin de faciliter la lecture des posters, les dimensions suivantes sont conseillées : 80 cm de large sur 100 à 115 cm de haut (format portrait).

► Le matériel de fixation sera fourni sur place.

Contexte A l’occasion de la rédaction d’un livret d’information sur la transfusion à destination des patients, l’idée de l’illustrer par des témoignages d’acteurs de la transfusion s’est imposée.

Hypothèse Créer une dynamique de communication autour de la transfusion par ses acteurs (donneurs, receveurs, professionnels de santé, bénévoles...) pourrait permettre de 1) coté donneurs: favoriser l’adhésion et l’engagement au don de sang; 2) coté receveurs: humaniser l’acte transfusionnel; 3) créer un lien social, virtuel et anonyme, entre ces acteurs.

Méthode Un groupe de travail constitué de quatre infirmiers dont deux cadres et trois médecins en hématologie; un médecin responsable de hémovigilance; un pharmacien responsable de la distribution/délivrance et deux chargés de communication au sein de l’Etablissement Français du Sang (EFS) ont rédigé le livret du 25/10/2019 au 17/10/2020. En parallèle, à compter du 21/09/2020, des entretiens semi-directifs ont été réalisés chez des receveurs en oncologie et en hématologie.

Résultats et perspectives Le livret et les neufs premiers témoignages de receveurs sont disponibles en format écrit et audio. A l’avenir, les acteurs de la transfusion pourront les consulter lors de collectes de sang, de transfusion à l’hôpital ou sur le site de l’EFS. Ils seront invités à témoigner à leur tour via une plateforme téléphonique ou un formulaire en ligne afin d’entretenir un “réseau social” dynamique. L’impact sur le don sera évalué par des indicateurs de performance et la satisfaction des patients par un questionnaire. L’analyse thématique des entretiens pourra dégager des pistes réflexives visant l’amélioration de la chaine transfusionnelle.

La fidélisation des donneurs et le retour au don des donneurs ajournés est un défi permanent pour l’EFS.
Une enquête réalisée de 8 août au 24 août 2020 (20 779 questionnaires envoyés par mail), montre que certaines typologies de donneurs (primo-présentés refusés, primo-donneurs) sont plus fragiles et doivent être particulièrement entourées.
 L’un des écueils pour le retour au don est la méconnaissance de la durée de la contre-indication, d’autant plus pour un primo-donneur homme.
Même si les explications sont perçues comme claires, un renforcement des explications et en particulier les informations sur la durée des contre-indications, est nécessaire.
Des outils tels que le mémo de post contre-indication avec la date de retour possible au don peut être une solution.
On peut aussi utiliser des moyens plus "modernes" pour rappeler au donneur ajourné la date de fin de sa contre-indication : SMS personnalisés, mails …
 Cette enquête permet donc de proposer plusieurs voies d’amélioration :
Informer de la durée de la contre-indication et de la date possible du retour au don, et tracer cette information sur un document remis au donneur, en particulier aux  primo-donneurs refusés.
Personnaliser les SMS d’invitation à une collecte en y incluant la date de fin de contre-indication.
Inviter plus activement le donneur ajourné à l’étape de collation et profiter de cette pause pour recueillir un nouvel engagement au don.
Rappeler les primo-présentés refusés pour répondre à leurs questions d’ordre médical, cela pourrait être une tâche dévolue aux médecins dans le cadre du déploiement de la TMC.

Comment disposer des produits sanguins indispensables à la prise en charge de populations d'ascendance africaine subsaharienne (AASS) ?
Cette question sanitaire que les équipes transfusionnelles doivent affronter résulte d’une tension entre rareté et besoin, entre un accroissement démographique des populations AASS présentant une forte prévalence de phénotypes sanguins rares et d’intérêt et une réserve en produits sanguins limitée. 
Derrière cette problématique de santé strictement biologique, d’autres domaines d'expertise sont impliqués comme l’éthique et le droit. Afin d'anticiper les besoins futurs et d'établir des niveaux d'alerte, les équipes transfusionnelles doivent évaluer avec précision les besoins actuels. Si la définition biologique des cibles est aisée, leur dénombrement précis est plus difficile car il dépend des règles juridiques et éthiques de chaque pays. 
Nous avons cherché à comprendre comment des choix juridiques et un ensemble de représentations de l'altérité peuvent influencer l'approvisionnement en sang rare pour ces populations. 
Après avoir examiné ces questions à la lumière des différentes normes et limites qui régissent la France, nous comparerons avec quatre pays occidentaux soumis aux mêmes difficultés. Nous constatons qu’il n'existe pas de solution unique mais des réponses multiples variant d’une société à une autre en fonction des modalités juridiques et historiques qui les régissent. 
Enfin, dans l’optique de résoudre cette problématique d’approvisionnement, nous présenterons les résultats du projet, que nous avons mené à Marseille, visant à promouvoir le don de sang dans ces populations au travers d’une approche géographique de la santé. 

Dans notre centre à majorité de don de compensation, nous nous sommes préoccupés des départs avant don. Dans ce cadre, nous rapportons l’évolution du taux des DDS partis avant don.
Il s’agit d’une étude exhaustive des DDS volontaires et de compensation inscrits aux sites fixe et mobile sur 3 ans (2018-2020) à partir du système d’information Hématos II G3.8 de MedInfo. Nous avons classé les DDS partis avant don en deux catégories: partis avant examen médical et partis avant prélèvement.
Un total de 11,3% des DDS inscrits (12 594 /111 050) étaient partis avant don dont 99,9% avant examen médical. Le taux de DDS partis avant don a significativement baissé de 11,4% en 2018 (4 808/42 050) à 10,1% en 2020 (2 951/29 106) (p <0,001). Cette diminution a concerné les partis avant examen médical [11,3% (4 782/42 050) en 2018 et 10,1% (2 948/29 106) en 2020, p<0,001] et les partis avant prélèvement [0,06% (26/42 050) en 2018 et 0,01% (03/29 106) en 2020, p<0,01].
Le taux élevé des DDS partis avant don s’explique par la difficulté de gestion des files de DDS de compensation qui se condensent sans rendez-vous en milieu de journée. Toutefois, ce taux a diminué parallèlement à la baisse du nombre de DDS examinés concomitante à la pandémie COVID-19. L’augmentation de la capacité d’accueil de l’unité de prélèvement serait nécessaire pour une meilleure rétention des DDS. En l’absence de bonnes conditions d’accueil, la fidélisation des donneurs de compensation en donneurs volontaires serait hasardeuse.
 

Le but de cette étude était d’estimer et analyser les contre-indications (CI) au don de sang tracées dans le logiciel médico-technique Hématos II G3.8 de MedInfo.
Les CI au don tracées chez les DDS sur sites fixe et mobile entre 2017 et 2020 ont été éditées et analysées. Elles ont été classées en médicales et biologiques, permanentes et temporaires.
Au total, 23 882 CI ont été relevées chez 152 411 DDS examinés, soit 15,7%. Les CI médicales ont constitué 98% des CI (moyenne: 5 834/année) dont 94% étaient temporaires: hypoTA (17%), changement de partenaire sexuels <4 mois (14%), HTA à l'examen pré-don (11%), antibiotique/antifongique en cours (10,8%), prise d'alcool (6%), infection bénigne en cours (5,6%), poids <50 kg (4%) et autres (31,6%). Les CI biologiques (2% des CI) étaient temporaires dans 71% dont 68 % étaient les anémies. Les CI définitives (29%) étaient liées à une sérologie virale positive [Ag HBs positif (25,4%), VHC positif (1,5%), VIH positif (0,2%)].
Le taux des CI a significativement baissé de 2017 à 2020 de 20,22 à 11% (p<0,001). La diminution a concerné toutes les CI sauf l’infection bénigne en cours et l’anémie.
Les CI au don étaient essentiellement médicales et temporaires. Leur baisse au fil du temps s’explique par l’expérience des médecins des donneurs, recrutés depuis 2017.

Introduction: 

La politique de don de sang se base en Tunisie sur les donneurs volontaires. Cependant l’objectif 100% de donneurs volontaires préconisé par l’OMS n’a pas encore été atteint. Nous avons réalisé cette étude visant à analyser les intentions de don de sang chez les étudiants en médecine en Tunisie.
Méthodologie 

Nous avons développé un questionnaire via Google Forms. Il a été partagé sur les réseaux sociaux dans les groupes des étudiants en médecine et rempli d’une façon anonyme. Nous avons inclus les étudiants des quatre facultés de médecine tunisiennes, qu’ils soient externes, internes résidents ou en transition.
Résultats: 

Parmi les 107 participants, 62,6% avaient déjà donné du sang et 62 avaient donné du sang volontairement. Plus de la moitié, 60,7%  avaient donné plus d’une fois. Les facteurs empêchant les participants de redonner étaient principalement une contrainte de temps (48,6%) et une cause médicale contre indiquant le don (35,1%).  Ceux qui n’ont jamais donné de sang, avancent comme causes  principales l’inaccessibilité logistique aux points de collecte  (22,7%) et la contrainte de temps (31,8%). Quant aux facteurs motivant à donner davantage, 53,3% des participants proposaient des campagnes de sensibilisation et 38,3 % une meilleure connaissance du don de sang.

Conclusion :

Plusieurs actions pourraient être proposées afin d’augmenter le nombre de donneurs chez les étudiants en médecine et de les fidéliser. On pourrait notamment améliorer l’accessibilité logistique aux points de collecte en multipliant les caravanes mobiles et prolonger leurs horaires pour pallier la contrainte de temps.

IntroductionDepuis le début de la pandémie COVID-19,les centres de transfusion n’ont cessé d’actualiser les critères d’éligibilité au don de sang.Le don de sang après vaccination COVID-19 est un nouveau volet à prendre en considération.Nous rapportons une revue des recommandations  internationales à ce propos et les mesures prises par le Centre National Marocain deTransfusion Sanguine et d’Hématologie. 
Données des instances internationalesFin Octobre 2020,selon la liste de l’OMS,près de 200 candidats vaccins contre le SARS-CoV-2 sont en cours de développement, faisant appel à huit plateformes technologiques différentes.Les donneurs doivent  fournir des informations sur la date de vaccination ,le type du vaccin et tout effet secondaire.Le Centre Européen de Prévention et de Contrôle des maladies (ECDC),l’Association Américaine des Banques de Sang(AABB), l'Administration Américaine des Denrées Alimentaires et des Médicaments (FDA) sont les premiers à avoir publiés des recommandations à propos du délai à observer après vaccination COVID-19 pour pouvoir donner son sang.Le Haut Conseil de la Santé Publique (HCSP), début Février 2021 , a émis ses premières recommandations. (VoirTableau 1). Au Maroc, les autorités ont opté pour deux vaccins : Sinopharm (Wuhan) et AstraZenega.Le CNTSH a mis en place de nouveaux critères de don de sang après vaccination COVID-19 ( Tableau 2).
Conclusion Les centres de transfusion doivent actualiser leurs critères d'éligibilité au don de sang en fonction des types de vaccins adoptés dans leurs pays afin d'assurer une bonne gestion de l'impact de cette phase de vaccination COVID-19 sur la disponibilité et la sécurité du sang et des produits sanguins.

Introduction Depuis l’émergence du SARS-CoV-2, les établissements de transfusion sanguine ont été confrontés à un nouveau souci relative à la place réelle du dépistage de ce virus chez la population des donneurs de sang.
Matériel et Méthodes Dans ce travail nous avons étudié :
1*Les données publiées à propos de l’utilisation des tests sérologiques SARS-CoV-2.
2*Les recommandations des instances internationales à propos de la place des tests sérologiques SARS-CoV-2 chez les donneurs de sang.
3*Les performances de quelques trousses sérologiques SARS-CoV-2 ;
Résultats
  1*Pour la HAS, les tests sérologiques SARS-CoV-2 peuvent avoir des indications particulières en complémentarité avec les données des tests moléculaires. Pour la FDA, les tests sérologiques SARS-CoV-2 peuvent être utilisés pour déterminer l’exposition au virus, ainsi que dans le cas d’une surveillance sérologique.
  2*En l’absence de données sur la transmission du SARS-CoV-2 par les produits sanguins, les instances scientifiques internationales (ECDC, OMS, FDA, HAS, HCSP) ne recommandent pas de dépistage du SARS-CoV-2 pour le don de sang.
  3* La sensibilité varie d’une technique sérologique SARS-CoV-2 à l’autre montrant une grande faiblesse pendant la première semaine après début des symptômes. Dans 07 trousses sur 09, les fournisseurs précisent que leurs tests SARS-CoV-2 ne doivent pas être utilisé pour le screening chez les donneurs de sang (Tableau 1).
Conclusion Les tests sérologiques n’ont pas de place pour le dépistage du SARS-CoV-2 chez les donneurs de sang mais peuvent être utilisés dans le cadre d’une étude de séroprévalence et/ou d’une stratégie de serosurveillance de la COVID-19.

Tableau 1 : Comparaison de performances de quelques trousses sérologiques immunologiques SARS-CoV-2

IntroductionDepuis le début de la pandémie COVID-19, le risque de transmission du SARS-CoV-2 par transfusion sanguine préoccupent les professionnels des centres de transfusion.
Matériel et méthodesDans ce travail nous avons étudié :
1.Les publications des instances internationales à propos de ce risque.
2.Les données sur la détection de l’ARN du SARS-CoV-2 dans le sang des patients COVID-19 et les donneurs de sang.
3.Les cas publiés à propos de la transfusion de produits sanguins issus de donneurs COVID-19 positifs après le don et l’évolution chez les receveurs.
Résultats
*Le SRAS-CoV-2 est un nouvel agent infectieux et pas d'évidence pour exclure avec certitude le risque de transmission transfusionnelle qui reste un risque théorique.
*L'ARN du SRAS-CoV-2 a été détecté avec une charge faible et l'infectivité du virus n'a pas été confirmée chez les donneurs.
*La transfusion de produits issues de donneurs positifs au COVID-19 après le don n’ont donné aucune preuve de la transmission du virus aux receveurs.
*Par précaution, les centres de transfusion doivent prendre les mesures nécessaires pour atténuer le risque de transmission du SRAS-CoV-2 par les produits sanguins.
*Le renforcement du système d'hémovigilance et l'informations post-don constituent un maillon très  important pour la sécurité transfusionnelle au cours de la pandémie COVID-19.
ConclusionLe SARS-CoV-2 n’est pas une menace directe pour la sécurité transfusionnelle, mais soulève des problèmes d'approvisionnement en sang.Les mesures mises en place par les centres de transfusion pour minimiser le risque de transmission transfusionnelle doivent prendre en compte la nécessité d'assurer la disponibilité des produits sanguins.

Introduction. Pour assurer l'apport d'oxygène aux tissus, les concentrés de globules rouges (CGR) transfusés doivent conserver des caractéristiques optimales durant les 42 jours de stockage. Nous avons évalué la qualité de l'hémoglobine (Hb) dans les CGR sur cette période de conservation, et détecté la présence d’un pool de sous-unités alpha-hémoglobine (pool α-Hb) solubles durant le stockage.
Méthodes. A partir de 21 GGR préparés à l’EFS (Rungis) et conservés à +4-6°C, des prélèvements sont réalisés en début (J3-J8) et en fin (J38-J42) de stockage, ainsi qu’à 2 temps intermédiaires. Pour chaque échantillon, GR et surnageant sont séparés et les lysats de GR préparés. L’état d’oxygénation de l’Hb est déterminé par spectroscopie d'absorbance UV/visible ; le pool α-Hb est mesuré (ng d’α-Hb libre /mg de sous-unités d’Hb, ou ppm) sur support de chromatographie d’affinité chargé en Alpha-Hb Stabilizing Protein (AHSP) recombinante, liant spécifiquement l’α-Hb.
Résultats. Les spectres d'Hb montrent des caractéristiques similaires à ceux de l'Hb oxygénée native. Un pool α-Hb est détecté dès J3-J8 (126±23 ppm ; écart interquartile EI =21), valeur supérieure au pool α-Hb observé chez des sujets sains (81±15 ppm, n = 20). En fin de conservation des poches (J38-J42), on observe une augmentation significative du pool α-Hb (152±8 ppm, p <0,0001 ; EI =48,5).
Conclusion. L'Hb dans les CGR conserve ses capacités de transport de l’oxygène pendant les 42 jours de stockage. Nous montrons la présence d'un pool α-Hb soluble dans les CGR et son augmentation significative durant le stockage. La valeur du pool reste cependant négligeable quant à la capacité des CGR à délivrer l’oxygène.

Il existe deux configurations pour le mélange des Buffy Coats (BC): le « Train » (utilisé actuellement dans notre Production) et l’« Octopus », qui présente d’importants avantages en terme d’ergonomie. Les aspects évalués dans cette étude comparative sont la qualité des CP et le temps de fabrication.
Les dispositifs utilisés sont le CompoStop™ FD51600 (Train) et le CompoStop™ FT52600 (Octopus), deux nouveaux codes dont les tubulures sont sans DEHP, commercialisés par Fresenius Kabi. Les mesures standard du contrôle qualité ont été effectuées durant la fabrication et le stockage de 16 CP (8 avec le Train et 8 avec Octopus). De plus, pour chacune des deux configurations, la durée des différentes étapes de préparation a été chronométrée sur 3 séries de 4 CP.
Tous les CP préparés sont conformes aux spécifications suisses. Le rendement en plaquettes est légèrement plus faible (sans être significatif) pour Octopus (3.45 ± 0.42·1011/unité, [2.85-4.01]) que pour le Train (3.65 ± 0.32·1011/unité, [3.28-4.21]).
Concernant le temps de processing pour 4 CP, l’Octopus (26 min 19s ± 2 min 43s) s’est montré plus rapide que le Train (28 min 27s ± 1 min 42s). L’étape de connexion des BC est plus lente de 5 min 39s pour Octopus mais cette différence est compensée par un gain de temps sur le rinçage des poches de BC (5 min 4s) ainsi que sur d’autres étapes comme la préparation du kit et son pliage.
En conclusion, la méthode Octopus permet de préparer des CP conformes aux normes et plus rapidement qu’avec le Train. L’optimisation du processus avec Octopus et l’acquisition de plus de pratique devraient permettre de réduire encore le temps de processing et améliorer la qualité des CP.

Contexte Dans le cadre du développement d’un appareil à connexion stérile (Maconnect, Macopharma) permettant de réaliser simultanément 6 connexions, le SFS a établi un protocole de tests en conditions réelles afin d’évaluer l’appareil pour la préparation des concentrés plaquettaires (MCP).
Méthode Préparation de 65 MCP (1 MCP= 5 BC (Fresenius Kabi), 1 solution SSP+ (Macopharma) et 1 kit TACSI (Terumo BCT)) avec la Maconnect par 5 opérateurs sur 17 jours. Les critères mesurés sont : le temps de connexion/MCP, la conformité visuelle des connexions, la facilité d’ouverture, le nombre de MCP/h/opérateur. Des tests d'étanchéité (C-LAB, Acémis) des connexions ont été réalisés : 36 connexions après stripage ;108 connexions entre des tubulures de 4 fournisseurs différents en « Sec-Humide » ou « Humide-Humide » ;48 connexions « Sec-Humide » avec des longueurs de tubulures allant de 4 cm à 0,5cm.
Résultats La productivité moyenne est de 1’15’’/MCP et 32 MCP/h. La facilité d’ouverture des connexions (n=30) a été évaluée à 2/4 à t=0 et à 3/4 après 1h (1=facile à ouvrir ; 4=impossible). L’étanchéité des connexions stériles est conforme pour les 192 connections testées. 2 ruptures d’étanchéité ont été constatées, dues au positionnement incorrect des tubulures dans la mâchoire.
Conclusions Dans des conditions réelles de production, la Maconnect remplit les requis d’utilisation pour l’étanchéité des connexions avec un gain constaté de productivité. La machine pourrait facilement s’intégrer dans le processus du SFS. Cependant deux axes d’optimisation pourraient être envisagés comme le placement des tubulures dans les mâchoires et une ouverture manuelle des connections facilitée.

Contexte INTERCEPT™ Blood System utilise l’amotosalen et les UVA (IA) pour l’inactivation des agents pathogènes et des leucocytes dans les concentrés plaquettaires (CP). Le dispositif avec trois poches de conservation (TS), marqué CE, permet le traitement des plaquettes d’aphérèse (CPA) double ou triple dose et des mélanges (MCP) issus de 10-12 unités de sang total. L'objectif de l'étude était d'évaluer l’efficacité de l’IA pour l'inactivation de 2 bactéries non testées et le maintien de la stérilité jusqu’à 7 jours de stockage.
Méthodes Des CPA en solution additive (65% PAS/35% plasma) ont été mélangés, avec ~720 ml et 10 à 12 ×1011 plaquettes/unité. Les CP ont été inoculés avec Lactobacillus delbrueckii ou Citrobacter koseri à des titres différents (n=3 par souche) puis traités par IA dans un dispositif TS. Des échantillons prélevés avant et après illumination aux UVA, après incubation avec le CAD, et après 3, 5 et 7 jours de stockage, ont été analysés par étalement (100 µl-10 ml) sur un milieu approprié. Le volume résiduel de chaque poche a été ajouté volume pour volume à des flacons de culture.
Résultats Les titres infectieux pouvant être inactivés par le traitement IA et permettant le maintien de la stérilité jusqu’à 7 jours de stockage après échantillonnage complet des CP traités avec l’IA ont été obtenus (Table).
Conclusion Ces résultats définissent pour Lactobacillus delbrueckii et Citrobacter koseri les titres bactériens qu’INTERCEPT Blood System pour les plaquettes est capable d'inactiver et dans la limite desquels la stérilité est maintenue durant la période de stockage jusqu’à 7 jours.

Inactivation bactérienne dans les plaquettes traitées par INTERCEPT avec échantillonnage jusqu'à 7 jours de conservation

Introduction INTERCEPT Blood System utilise l'amotosalen et les UVA (IA) pour atténuer les agents pathogènes et les leucocytes dans le plasma et les plaquettes.
Objectif Résumer les données obtenues quant à l’efficacité du système pour inactiver un large échantillonnage de virus, bactéries et parasites dans les concentrés plaquettaires (CP) en solution additive (PAS).
Méthodes Les CP-PAS ont été inoculés  avec des titres élevés d’agents pathogènes et les échantillons prélevés avant et après le traitement IA ont été évalués pour leur niveau d'infectivité en culture cellulaire ou à l’aide de modèles animaux. Les facteurs de réduction (FRL exprimés en log10) ont été calculés comme la différence entre titres infectieux avant et après traitement IA.
Résultats Un FRL ≥4,0 a été revendiqué pour 13 virus, 19 bactéries et 4 parasites dans les CP-PAS [>4,3 - >7]. Des données d'inactivation ont été obtenues pour 25 virus enveloppés, 6 virus non-enveloppés, 22 bactéries et 4 parasites. L'inactivation de virus émergents incluant les flavivirus et les coronavirus (Table) a été démontrée. Les parasites présentent une sensibilité élevée au traitement IA avec des FRL >6,0 pour P. falciparum, >5,0 pour T. cruzi et >5,3 pour B. microti. Les bactéries évaluées, dont 8 gram négatif, 11 gram positif et 2 spirochètes, présentaient toutes (sauf la forme sporulée de Bacillus cereus) une sensibilité élevée (FRL >4,5) voire très élevée pour ≥70% d’entre elles (FRL >6,0).
Conclusions Le traitement IA est efficace pour réduire les niveaux d'infectiosité d'un large spectre d'agents pathogènes dans les PC avec une majorité de FRL ≥4,0.

Inactivation de virus émergents par amotosalen et UVA (CP en PAS)

Introduction INTERCEPT Blood System utilise l'amotosalen et les UVA (IA) pour atténuer les agents pathogènes et les leucocytes dans le plasma et les plaquettes.
Objectif Résumer les données obtenues quant à l’efficacité du système pour inactiver un large échantillonnage de virus, bactéries et parasites dans les plasmas frais congelés (PFC).
Méthodes Les PFC ont été inoculés avec des titres élevés d’agents pathogènes et des échantillons prélevés avant et après le traitement IA ont été évalués pour leur niveau d'infectivité en culture cellulaire ou à l’aide de modèles animaux. Les facteurs de réduction (FRL exprimés en log₁₀) ont été calculés comme la différence entre titres infectieux avant et après traitement IA.
Résultats Un FRL ≥4,0 a été revendiqué pour 15 virus, 6 bactéries et 3 parasites dans les PFC [>4,2 - >10,6]. Des données d'inactivation ont été obtenues pour 16 virus enveloppés et 3 virus non-enveloppés. L'inactivation de virus émergents incluant les flavivirus et les coronavirus (Table) a été démontrée. Les parasites présentent une sensibilité élevée au traitement IA avec des FRL >6,9 pour P. falciparum, >5,0 pour T. cruzi et >5,3 pour B. microti. Les bactéries évaluées, dont 3 gram négatif, 1 gram positif et 2 spirochètes présentaient toutes une sensibilité élevée (FRL >4,2) voire très élevée pour ≥80% d’entre elles (FRL >5,9).
Conclusions Le traitement IA est efficace pour réduire les niveaux d'infectiosité d'un large spectre d'agents pathogènes dans les PFC avec une majorité de FRL ≥4,0.
 

Inactivation d’arbovirus et coronavirus dans le plasma par traitement IA

Le plasma de convalescent de la COVID-19 (CCP) est l'une des options thérapeutiques limitées disponibles pour le traitement des patients gravement malades atteints de la COVID-19. Il y a de plus en plus de preuves que le CCP peut réduire la charge virale et la gravité de la maladie; et réduire la mortalité. Cependant, des préoccupations concernant le risque d'infections transmises par transfusion (ITT) et d'autres complications associées à la transfusion de plasma demeurent. Le traitement de réduction des agents pathogènes amotosalen / UVA (A/UVA-RP) pour le plasma offre une atténuation du risque d'ITT.
Cette étude a évalué l'impact de l'A/UVA-RP sur les anticorps anti-SARS-CoV-2 dans 42 CCP à l'aide de quatre tests complémentaires: anticorps totaux contre la protéine S1 par test d’amplification PCR dépendant de l’agglutination (ADAP), anticorps totaux contre la protéine N par ADAP, neutralisation du récepteur ACE-2 par ADAP, neutralisation de l'infectivité virale par un pseudovirus rapporteur et profil d'anticorps contre 11 antigènes par une puce présentant des protéines antigéniques de coronavirus (COVAM). L'A/UVA-RP n'a pas eu d'impact négatif sur les anticorps anti-SARS-CoV-2 et d'autres épitopes viraux, n'a eu aucun impact sur l'activité neutralisante ou d'autres médiateurs potentiels de l'efficacité du CCP. Enfin, une réactivité immunitaire croisée avec d'autres antigènes de coronavirus a été observée augmentant le potentiel d'activité neutralisante contre d'autres coronavirus émergents. Les résultats de cette étude soutiennent la sélection de CCP efficaces combinés à l'utilisation d'A/UVA-RP dans la production de CCP pour les patients atteints de la COVID-19.

Un changement de CAD « Compound Adsorption Device » est planifié pour les dispositifs d’atténuation des pathogènes (INTERCEPT® Blood System, IBS, Cerus), portant sur le solvant de suspension utilisé lors de la fabrication des billes de polystyrène divinylbenzène de la nouvelle référence MN202.
Cette étude a pour buts :
De valider la conformité de 16 MCP-IA préparés à partir de 8 CLP avec des dispositifs à deux poches de conservation DS et matrice d’adsorption CAD en MN202, avec deux solutions de conservation utilisées à l’EFS : InterSol et SSP+.
Et de vérifier la qualité des MCP-IA dans ces dispositifs avec un temps de CAD de 16 heures et conservés jusqu’à 7 jours.  Le dispositif est testé en conditions limites pour les paramètres de volume (375 - 420 ml), de contenu plaquettaire (7,0 ≤ QPA ≤ 8,0.1011) et de plasma résiduel (44-47%), ces paramètres étant plus critiques pour les performances du CAD.
Les MCP intermédiaires avant IBS sont conformes aux pré-requis établis.
Les 16 MCP IA sont conformes aux caractéristiques des PSL pour le contenu en leucocytes déterminé avant traitement IBS, le volume et contenu en plaquettes et le pH à péremption à J7. Les valeurs individuelles d’amotosalen résiduel dans les MCP-IA sont conformes, la cinétique de réduction montrant des valeurs ≤7.5 µM dès 2 heures d’adsorption.
Les attributs biologiques (Table) suivis au cours de la conservation traduisent un métabolisme plaquettaire normal et comparable à d’autres dossiers de validation, et apparaissent homogènes. Quelques différences sont observées pour le métabolisme en SSP+ et InterSol en lien avec la composition de ces solutions mais sans relation avec le changement apporté sur le CAD.

Table : Données de conservation des MCP-IA traités en SSP+ et InterSol

Les contrôles d’hémolyse des CGR sont réalisés d’une part dans le cadre règlementaire de la surveillance à 42 jours de la filière (plan d’échantillonnage : PE) et d’autre part pour vérifier que les défauts de procédés lors de la préparation des CGR n’impacte pas leur qualité (contrôles des levées de doute : LD)
Objectif Pour les contrôles PE, l’objectif de l’étude est de corréler le % d’hémolyse en fin de conservation avec des paramètres connus au début (paramètre donneur ou dispositif de prélèvement utilisé). Pour les contrôles LD, l’objectif est de contrôler le taux d’hémolyse à J7, et de suivre ce taux à J28 et J42, afin d’évaluer le risque de non-conformité
Matériel et méthodes Les données de contrôle ont étés analysés depuis 2017, l’ensemble des paramètres donneurs (IMC, hématocrite (HT)…) et paramètres physiques des poches de CGR (dispositif, volume prélevé) ont été intégrées à cette étude. Des analyses multiparamétriques de corrélation et d’analyse de variance ont été effectuées sur les résultats d’hémolyse aux jours 7-28-42.
Résultats Pour les CGR-PE, 254 données à J42 ont été analysés : l’incidence de l’IMC (<25-25-30->30) est effective pour les dispositifs TAB (ANOVA p<0.001). Pour les CGR-LD, 2662 contrôles ont été analysés avec 87% de TAB. A J7, 1.6% sont non-conformes (>0.8%), et 4%, supérieurs à 0.3%, ont été suivis à J28 et J42 ce qui nous renseigne sur un taux minimal prédictif d’un risque de non-conformité à J42.
Discussion A ce stade, les résultats doivent être consolidées par des contrôles renforcés sur l’hémolyse des CGR issus de donneurs avec une IMC>25. D’autre part, les CGR LD dont l’hémolyse >0.3% à J7 doivent mis de côté pour surveillance.

Contexte La sécurité transfusionnelle infectieuse constitue une préoccupation majeure en Transfusion Sanguine. En effet, malgré l’amélioration de la qualification biologique, le risque de transmission des virus tels que le VHB et le VHC est réel. Une surveillance épidémiologique régulière pourrait réduire ce risque. Cependant, les données concernant la séroprévalence de ces virus sont parcellaires. D’où l’intérêt de ce travail.
Objectif Le but de ce travail est de déterminer la séroprévalence des hépatites virales B et C chez les donneurs de sang.
Méthodologie Il s’agissait d’une étude retrospective, portant sur les donneurs de sang qui s’est déroulée au Centre de Transfusion Sanguine de Yamoussoukro, de 2017 à 2020. Les tests ELISA ont été utilisés pour le dépistage de l’AgHBs et des Ac Anti-VHC. L’extraction des données a été effectuée à partir du logiciel PROGESA et de Microsoft Excel version 2019. L’analyse statistique a été réalisée à l’aide du logiciel SPSS version 2016.
Résultats Parmi 18112 donneurs de sang, 14473 (79,9%) étaient de sexe masculin et 3639 (21,1%) de sexe féminin, avec un sex ratio de 3,98 en faveur des hommes. La tranche d’âge de 18 à 45 ans était prédominante (97,79%) avec un âge moyen de 30 ans. Les séroprévalences observées de 2017 à 2020 étaient respectivement de 11,4% ; 10,7% ; 11,3% ; 11,7% pour le VHB et de 4,5% ; 4,8% ; 2,4% ; 4,3% pour le VHC. 0,69% de co-infections VHB/VHC ont été observés.  
Conclusion Malgré, la sélection rigoureuse des donneurs de sang et l’utilisation des tests ELISA, les séroprévalences du VHB et VHC restent élevées.
Mots clés Donneurs de sang, VHB, VHC, Séroprévalence

Les évaluations externes de la qualité (EEQ) des paramètres de conformité des produits sanguins labiles sont organisés à l’EFS depuis plus de 20 ans entre les laboratoires de contrôle qualité (CQ). En 2020, dans le cadre de l’European Blood Alliance (EBA), ce programme a été proposé, à l’ensemble de ses membres.
Objectif Outre l’objectif de démontrer l’équivalence des procédures inter-laboratoires, le but de cette étude est d’évaluer la faisabilité opérationnelle et logistique du programme EEQ-CQ à l’échelle internationale.
Matériel et méthodes En 2020, 4 cycles (2 sur Concentré de Globules Rouges pour des mesures d’hématocrite et d’hémoglobine et 2 sur Concentré Plaquettaire pour la concentration plaquettaire) ont été réalisés, incluant 20 laboratoires CQ (15 en Europe, 5 en France). Les colis préparés sur Nancy et Besançon, ont été envoyés après avoir choisi un conditionnement adapté puis réceptionnés dans les différents pays en 3 jours maximum. Pour chaque cycle, a été établi, un rapport anonymisé reprenant une exploitation Lewey-Jennings, et des calculs de biais, Z-score.
Résultats Malgré les conditions d’acheminement différentes entre les pays, cette phase pilote a montré la possibilité de réaliser des EEQ à l’échelle internationale, avec néanmoins un besoin de standardisation des étapes de préparation, incluant les documents de transport.
Discussion L’axe d’amélioration principal est d’optimiser les conditions d’acheminement. Pour 2021, un planning a été établi, incluant d’autres sites organisateurs (Europe et EFS), et de nouveaux tests tels que l’hémolyse des CGR et leucocytes résiduels. Le programme d’EEQ pour le CQ PSL entrera alors dans une phase opérationnelle.

Le suivi de la destruction des produits sanguins labiles (PSL) est l’un des indicateurs de la maitrise de la gestion du stock. Le but de notre étude a été de déterminer le taux et d’analyser les causes de destruction des PSL.
Il s’agit d’une étude exhaustive sur 3 ans (2018-2020). Pour chaque PSL détruit, nous avons relevé et classé la cause de destruction : liée à l’établissement transfusionnel (prélèvement, préparation, péremptions…) ou retour des établissements sanitaires…
Au total, 3,2 % des PSL ont été détruits (7 426 /233 988 PSL prélevés). Les PSL détruits ont été répartis comme suit : CGR (61%), PFC (26%), CSP (11,5%), cryoprécipités (0,5%) et sang total (1%). La destruction était liée au prélèvement (0,2%), à la préparation (32,5% dont 82% étaient des sérologies positives), à la péremption (1,6%) et aux retours des établissements sanitaires (65,7% dont 74% étaient des CGR). La destruction a significativement diminué de 3,5% en 2018 à 2,5% en 2020 (p<0,001). Cette diminution a concerné les CGR (de 6,7 à 3,9%, p<0,001) et les PFC (de 2,9 à 1,9%, p<0,001) alors que celle des CSP est restée stable entre 1,2 et de 1,6 %. De même, une diminution significative (p<0,001) des retours a été constatée.
Le retour des CGR dans notre centre a été à l’origine d’un taux de destruction plus élevé que celui rapporté (1%). La recrudescence des retours a été concomitante au déménagement du centre en dehors du CHU. Elle a posé un problème éthique aussi bien que de coût. Une maitrise relative a été possible grâce à une communication entre les médecins prescripteurs et celui du conseil transfusionnel. Cette action doit encore se continuer afin de réduire au maximum la destruction.

L’impact d’un traitement Intercept sur la capacité hémostatique plaquettaire reste débattu. L’étude par viscoélastométrie (VE) quantifie les propriétés mécaniques plaquettaires dans un caillot de sang total.
Objectifs étude fonctionnelle plaquettaire par VE en condition thrombocytopénique créée in vitro puis application à l’étude ex vivo de concentrés plaquettaires (EFFIPAP : plaquettes traitées Intercept vs. non traitées ; transfusion pour thrombocytopénie d’une hémopathie maligne - Garban 2018).
Méthodes Avec VE-ROTEM, la composante plaquettaire est obtenue par la différence EXTEM - FIBTEM des élasticités maximales (MCE) dérivées du paramètre MCF (Solomon 2015).
Du sang de 20 donneurs sains consentants est fractionné pour reconstitution autologue : culot érythrocytaire avec plasma et plaquettes lavées afin d’obtenir des numérations plaquettaires (NP) normales et basses, jusqu’à 20 G/L.
Des prélèvements sont effectués avant et après transfusion : étude ancillaire EFFIPAP-bio (Dijon, Grenoble, Lille).
Résultats (1) Avec la relation établie entre MCE et NP un intervalle de référence est défini sur l’étendue des NP (Fig.1). L’incubation avec aspirine a un effet faible mais statistiquement significatif : l’approche est sensible à un défaut fonctionnel mineur sur l’étendue des NP. (2) Aucune différence des MCE entre les types de concentrés n’est trouvée, en prenant en compte la NP (Fig.1&2). Les rendements transfusionnels sont en accord avec ceux de EFFIPAP.
Conclusion L’étude fonctionnelle plaquettaire par VE (résultat exprimé en MCE) est faisable en condition thrombocytopénique. Les résultats d’EFFIPAP-bio n’indiquent pas une altération fonctionnelle due à Intercept.

Fig.1 : Elasticité maximale (MCE) en fonction de la numération plaquettaire – sang total normal reconstitué à différentes numérations. Les résultats MCE une heure après transfusion de EFFIPAP-bio sont superposés, pour les trois bras de EFFIPAP

Fig.2 EFFIPAP-bio: rapports des MCE observées / attendues une heure après transfusion pour les trois bras de EFFIPAP ; bras 1 : non-traitées, en plasma N=9 ; bras 2 : non-traitées, en solution de conservation N=17 ; bras 3 = traitées N= 11

Le parvovirus B19 (B19V) est la cause de pathologies humaines allant de l'infection infantile bénigne aux arthropathies, anémie sévère et anasarque fœtal. Si la transmission du virus s’effectue par voie orale ou verticale, celle par voie sanguine reste possible, en particulier par les produits labiles. Pour réduire les risques de transmission, des étapes d’élimination/inactivation virale sont intégrées au procédé de préparation. Pour évaluer leur efficacité, la quantification par qPCR est souvent inappropriée et les systèmes de titrage infectieux avec des parvovirus animaux peuvent être mal représentatifs du B19V. Des systèmes cellulaires permissifs sont disponibles, mais nécessitent encore des optimisations. Nous avons développé une méthode cellulaire de détection des virions infectieux B19V en évaluant sa transcription dans la cellule hôte. Une nouvelle lignée, UT7/Epo-STI, a montré la plus grande sensibilité à l'infection. Des clones stables ont permis de démontrer une corrélation entre infectivité et stades SG2M du cycle cellulaire. 2 clones testés, B12 et E2 ont atteint des niveaux de sensibilité supérieurs à ceux des cellules de référence UT7-S1 et CD36+. Ces résultats mettent en évidence l'importance du cycle cellulaire pour la sensibilité au B19V, et proposent une nouvelle méthode cellulaire simple et efficace pour quantifier les unités infectieuses du B19V.
Brevet BD20875/EP20306551 “Novel human erythroid progenitor cell line highly permissive to B19 infection and uses thereof” Dec 2020
Ducloux C, You B, Langelé A, Goupille O, Payen E, Chrétien S, Kadri Z Enhanced Cell-Based Detection of Parvovirus B19V Infectious Units According to Cell Cycle Status. Viruses 2020

L’Établissement français du sang (EFS) Hauts-de-France - Normandie, issu du regroupement de l’EFS Nord de France et de l’EFS Normandie, a harmonisé son Conseil transfusionnel (CT) jusqu’alors spécifique à chacune des deux régions, tant en délivrance qu’en Immunohématologie (IH). La gestion des Informations post-don (IPD) déclarées hors heures ouvrables, a été intégrée au CT. Le but était d’alléger la tâche des techniciens de délivrance assurant les nuits et week-ends tout en limitant au maximum les blocages systématiques des produits issus du don.
Nous décrivons ici l’analyse des 19 semaines qui ont suivi la mise en place de cette nouvelle organisation, le 6 janvier 2020. Le suivi porte sur le nombre d’appels hebdomadaires, les tranches horaires les plus sollicitées ainsi que sur les motifs d’appels spécifiques aux IPD, au CT et à l’IH.
Si, indéniablement, cette organisation présente des avantages tels que l’homogénéisation des pratiques, la vision globale des stocks et des besoins, la diminution des blocages de produits sanguins labiles en période de garde et l’efficience de l’organisation (réduction du coût secondaire à la diminution du nombre global d’astreintes), il n’en demeure pas moins des inconvénients tels que des sollicitations beaucoup plus fréquentes en cours d’astreinte et des situations cliniques et/ou biologiques difficiles à régler en raison des spécificités locales.

L’EFS Hauts-de-France -  Normandie issu des EFS Nord de France et de l’EFS Normandie a été constitué le 1er janvier 2018.
Les deux ex-ETS avaient des pratiques différentes concernant la reprise des PSL. La nécessaire harmonisation de nos pratiques, nous a amené à réfléchir à la meilleure organisation tant en terme de sécurité transfusionnelle que d’efficience, la nôtre mais aussi celle des  établissements de santé (ES) que nous approvisionnons.
Avant de faire le choix de l’une ou l’autre organisation, nous les avons évaluées en mesurant l’impact de chacune d’entre elle sur :
-             La destruction de CGR
-             La surconsommation en CGR de groupe O
-             Le nombre d’ETP
-             Le surcoût pour les ES
 
Les deux organisations existantes n’ont montré aucune différence en terme de destruction de CGR, ni en terme de surconsommation en CGR de groupe O.
La mise en place de la reprise généralisée des CGR nécessitait un surcroit d’ETP qui impactait fortement l’efficience de nos activités.
L’existence d’un stock de CGR immobilisés pouvait avoir des conséquences graves en période de tension sur les stocks.
L’expérience des deux ex régions ne démontrait  pas de contribution supérieure  à l’intérêt du patient transfusé, intérêt qui est d’obtenir le bon produit au bon moment, adapté à sa pathologie.
C’est donc la solution de non reprise qui a été choisie.
Depuis le 1er janvier 2020, l’EFS HFNO ne reprend plus que les PSL distribués dans les dépôts d’urgence.
Un an après cette nouvelle organisation, les indicateurs montrent que les ES ont adapté leurs pratiques et qu’il n’y a pas eu de dérive en terme de destruction de PSL ou de surconsommation en CGR de groupe O.
 

Introduction Le groupe AB représente 3% de la population avec 20% des individus de groupe A2B. Parmi ces derniers, 10 à 25% présentent des anticorps (Ac) anti-A1, soit 0,06 à 0,15% de la population. Bien que ces Ac soient considérés sans importance clinique, la recommandation en France est de transfuser chez ces patients des concentrés de globules rouges (CGR) uniquement de groupe O ou B.
 Cas cliniques Nous rapportons les observations de 3 patients de groupe A2B avec Ac anti-A1 transfusés avec des CGR A à partir d’un dépôt de délivrance (DD) dans 2 établissements de santé. Dans  les 3 cas, le dysfonctionnement initial correspond à une erreur de délivrance par non vérification de la mention biologique spéciale (MBS) sur la carte de groupe. Dans les unités de soins, la MBS n’a pas été vue non plus.  Cliniquement, dans un cas, le patient a présenté des signes d’hémolyse intravasculaire (EIR grade 1). Dans les 2 autres cas, aucune manifestation clinique n’a été signalée.
 Discussion Dans les 3 cas rapportés, les CGR A ont été délivrés à partir d’un DD. Les consignes transfusionnelles indiquées sur la carte de groupe papier n’ont pas été vérifiées dans tous les  cas et dans 1 cas dans le logiciel de gestion du DD. Une analyse des causes profondes a été réalisée et des actions d’amélioration ont été mises en place.
 Conclusion Les 3 cas présentés de transfusion incompatible chez des patients de groupe A2B avec Ac anti-A1 à partir d’un DD soulèvent la problématique des résultats immuno-hématologiques non intégrés de manière automatique dans les logiciels de délivrance ainsi que l’importance de la bonne visibilité de la MBS figurant sur la carte de groupe et de sa prise en compte
 
 

Nous avons constaté une absence d’amélioration des non conformités des prescriptions de PSL malgré la communication des indicateurs en CSTH et la resensibilisation ponctuelle des soignants. De plus, des réclamations clients ont été remontées suite à des réponses non harmonisées apportées par les techniciens de délivrance. Pour réduire ces dysfonctionnements, nous avons décidé d’élaborer un document d’aide à la prescription répondant aux exigences des BPT.

Afin d’impliquer les techniciens de délivrance dans la rédaction de ce document nous avons lancé un appel à candidature au sein du service pour participer à ce travail piloté par l’encadrement technique et médical.

Le document se présente sous forme d’une affiche au format A3. Elle comporte l’ordonnance de PSL où chaque partie à compléter par le prescripteur fait l’objet d’une légende détaillant ce qui est attendu. Une attention particulière a été portée à la gestion des demandes urgentes, aux modalités de demandes de mise en réserve ou de produits scellés. Deux modèles ont été rédigés, un pour le CHU et un autre pour les cliniques tenant compte des spécificités de leurs activités. Nous avons complété notre affiche par un logigramme qui permet de contrôler la conformité de la prescription et des documents IH associés avant leur envoi à l’EFS.

Le document sera d’abord présenté à notre équipe et proposé aux services à l’origine des réclamations, accompagné d’une présentation sur site. Une diffusion plus large est ensuite prévue à l’ensemble des ES après des adaptations en fonction des premiers retours.

Nous pourrons suivre son efficacité grâce aux indicateurs de non-conformités et au suivi des réclamations clients.

Introduction Le choix du concentré plaquettaire (CP) par le personnel de Délivrance/Distribution s’effectue sur la quantité de principe actif (QPA) puis sur la durée de conservation du CP. Cette stratégie n’a pas été ré-évaluée avec les derniers procédés de sécurisation et de préparation (Intercept® Amotosalen et Dual Storage) ni avec l’augmentation de la durée de conservation à 7 jours.
Matériel et méthode Entre Juin 2020 et Février 2021, quatre types de CP prophylactiques ont été administrés à dix-neuf patients en cours d’induction ou de greffe de cellules souches hématopoïétiques: 1) QPA 0.5x1011 à 0.7x1011/kg et durée de conservation < J6; 2) QPA 0.5x1011 à 0.7x1011/kg et durée de conservation J6-7; 3) QPA > à 0.7x1011/kg et durée de conservation < J6; 4) QPA > à 0.7x1011/kg et durée de conservation J6-7. La variation des incréments plaquettaires corrigés (CCI), des intervalles transfusionnelles (IT) et la survenue d’hémorragie ont été observés.
Résultats Les CCI à 24h sont d’autant plus élevés que les CP sont frais (J2-J3-J4), et présentent une QPA supérieure à 0.7x1011/kg. Seule la stratégie 2) QPA 0.5x1011 à 0.7x1011/kg et durée de conservation J6-7 semble être associée à un IT plus court (- 1 jour) dans 2/3 des cas. Quelque soit le type de CP administré, aucun évènement hémorragique n’a été constaté.
Discussion Chez les patients présentant une durée d’aplasie prolongée, la variation de la durée de conservation et de la QPA ne semble pas impacter la survenue d’hémorragie ni l’IT. Ces résultats nous encouragent à proposer une étude clinique prospective de plus grande envergure.
 

Une inefficacité transfusionnelle plaquettaire (ITP) peut être évoquée lorsque le RTP (Rendement Post Transfusionnel) est <0,2 ou le CCI (Corrected Count Increment) <7 après 2 transfusions de plaquettes conformes aux recommandations. Les ITP peuvent être de cause non immunologiques (splénomégalie, fièvre, sepsis, CIVD, …) ou  immunologiques, généralement associées à des immunisations HLA et/ou HPA.
En  cas d’ITP secondaire à une allo-immunisation, le recours à des CPA HLA et/ou HPA compatibles est recommandé.
Pour cibler les ITP et améliorer leur prise en charge, la requête BO intitulée DIST_Receveurs_Massifs_PLAQ (avec un seuil de QPA ≥ 3.10¹¹/10 kg de poids hebdomadaire) est extraite automatiquement chaque semaine et envoyée aux responsables de délivrance de l’EFS HFNO afin d’en analyser la cause, en collaboration avec les cliniciens.
Nous avons étudié 63 patients receveurs massifs sur une période de 6 mois. Parmi eux, 13 relevaient d’une cause non immunologique (épisode aigu). Sur les 50 patients restants, 7 n’ont pas eu de recherche d’anticorps anti-HLA et 14 sur 43 (1/3) avaient des anticorps anti-HLA significatifs.
Au regard de la fréquence élevée des immunisations HLA, l’analyse des QPA délivrées est une aide précieuse pour adapter rapidement la prise en charge transfusionnelle et suivre l’efficacité des transfusions de CPA HLA compatibles.
Néanmoins, le lien entre l'administration de CPA HLA compatibles et l'espacement des transfusions n'apparait pas clairement dans cette étude car les ITP sont souvent multifactorielles.
En conclusion, la requête sur les receveurs massifs de CP peut servir d’alternative aux calculs de rendements souvent limités par le manque de données.

Depuis 2016, plusieurs presque-incidents ou incidents graves transfusionnels avérés au sein d’établissements de soins (ES) transfuseurs gérant un dépôt d’urgence (DU) autorisé nous ont amenés à nous poser un certain nombre de questions. Ces presque-incidents ou incidents graves ont pour certains impacté ou failli impacter l’avenir transfusionnel et/ou obstétrical de patientes jeunes souvent dans un  contexte de prise en charge obstétricale. Pour exemple de presque-incident, en 2018, une patiente est programmée pour un accouchement par césarienne sur placenta praevia. Le site de délivrance de PSL n’est prévenu du contexte que le matin du bloc. Cette patiente était de phénotype érythrocytaire rare. L’équipe soignante questionnée à postériori confirme qu’elle aurait utilisé le stock d’urgence vitale en cas de nécessité absolue de transfuser. Or, la transfusion n’aurait été possible qu’avec des CGR cryoconservés au CNRGS, les CGR du dépôt étant phéno-incompatibles. Notre réflexion ne remet évidemment pas en cause la nécessité de disposer d’un DU au sein des ES, ni la compétence de ceux-ci à analyser ces incidents et à mettre en place des mesures correctives et préventives. Néanmoins il est important de souligner que la présence d’un stock d’urgence vitale sur place ne doit atténuer ni la vigilance vis-à-vis de certaines situations immuno-hématologiques à risque, telle qu’un phénotype érythrocytaire rare ou une allo-immunisation complexe, ni la sensibilisation/formation du personnel transfuseur à ces situations. Il apparait primordial de gérer ce stock de façon adaptée à chaque situation immuno-hématologique, qu’elle soit simple ou complexe quand la situation le permet.

La maîtrise du stock des CGR RH:-1 requiert l’application des pratiques de gestion du stock afin d'éviter le risque de pénurie. Le recours à la transfusion de CGR RH1 à un patient RH:-1 peut se discuter dans certaines situations. Nous rapportons notre expérience de transfusion de CGR RH1 à des patients RH:-1.
Notre étude rétrospective (février 2018-janvier 2021) a concerné les patients RH:-1 transfusés par des CGR RH1. La décision revient au médecin chargé du conseil transfusionnel en tenant compte des données médicales du patient, de l'état de stock et après concertation avec le médecin prescripteur. Une RAI pré-transfusionnelle est systématiquement effectuée en plus du cross-match obligatoire par la réglementation en vigueur.
Pendant la période de l'étude, les CGR RH:-1 représentaient environ 11 % du stock. Au total, 304 CGR RH1 ont été transfusés pour 137 patients (moyenne: 2,21 CGR/patient, extrêmes: 1-4 CGR) ayant un âge moyen de 72,5 ans [extrêmes: 20 - 101 ans] et un sex-ratio de 1,44.  L’indication a été posée, devant un stock limité, pour un âge avancé (quelque soit le sexe) et/ou un pronostic vital réservé.
Même si c'est une dérogation aux règles de la compatibilité transfusionnelle, cette pratique permet de préserver une ressource limitée aux polytransfusés (tous âges confondus) et aux femmes en âge de procréer.  Un dialogue entre le médecin prescripteur et le médecin de l’établissement de transfusion est indispensable afin d’évaluer le ratio bénéfice/risque, de réduire la réticence du prescripteur et d’assurer un suivi post-transfusionnel optimal.

Plusieurs thérapeutiques (antiviraux et/ou anti-inflammatoires) ont été utilisées afin de prendre en charge les malades de la COVID19. L’hypothèse d’une efficacité de l’immunothérapie passive via la transfusion de Plasma de donneurs convalescents Covid (PCC) riche en anticorps anti-SARS-CoV-2 a été proposée à titre compassionnel. Un PUT (Protocole d’Usage Thérapeutique) a été autorisé par l’ANSM le 29/04/20 pour la prise en charge de certains patients.
Pour répondre aux exigences du PUT et assurer un suivi à l’échelle de la région Auvergne-Rhône-Alpes, les malades ont été inclus via une Réunion de Concertation Pluridisciplinaire régionale (RCP) pluri-hebdomadaire réunissant infectiologues, réanimateurs et EFS. Les cliniciens présentent les dossiers, les malades inclus reçoivent 4 PCC en 2 à 4 jours et font l’objet d’un suivi clinique et biologique régulier. L’évolution de la maladie a été enregistrée dans une grille de suivi, centralisée sur le site EFS de Lyon Sud.
Du 07/05/20 au 27/05/21, 282 patients ont été inclus. Les comorbidités les plus fréquemment concernées sont les lymphomes (38%), les LLC (13%) et les maladies auto-immunes (15%). Une amélioration clinique a été observée chez 59% des patients suivis, notamment dans les lymphomes (67%) et les maladies auto-immunes (68%). Pour d’autres comorbidités l’amélioration est moindre (22% dans les myélomes). L’amélioration apparait d’autant plus nette que le patient est traité avant l’aggravation respiratoire.
Ces premiers résultats devront être confortés par la consolidation des résultats nationaux et des études qui permettent d’affirmer l’efficacité du PCC et en préciser les indications.

 

L’épreuve de compatibilité au laboratoire (ECL) est obligatoire avant toute transfusion de concentrés de globules rouges (CGR) en Tunisie. L’objectif était d’analyser les étiologies des ECL incompatibles.
L’étude est transversale (janvier 2020 –avril 2021). Les données ont été collectées à partir du registre des ECL et du logiciel de l’institution. Pour tous les cas, des examens immuno-hématologiques ont été réalisés : test de Coombs direct (TCD), recherche d’anticorps irréguliers (RAI), témoin auto, TCD du CGR. L’âge, le genre, le motif de la transfusion et les antécédents transfusionnels ont été relevés.
10649 cross matchs ont été recensés. 129 ECL étaient incompatibles correspondant à 103 patients. L’âge moyen était de 49 ans [12-85]. Le sexe ratio M/F était de 0,7. Le motif de transfusion était le syndrome myélodysplasique dans 26% des cas. 91% des patients étaient polytransfusés. Les incompatibilités étaient secondaires à : auto-anticorps (53 cas), allo-anticorps (7 cas), allo anticorps+auto-anticorps (14 cas) et auto-anticorps chez le donneur (18 cas). Les spécificités d’allo-anticorps retrouvées étaient: anticorps de spécificité indéterminée (10 cas), anti-RH3 (3 cas),  anti-RH4 (1cas), anti-RH3+ anti-KEL1+ anti-KEL3 (1 cas), anti-RH1+ anti-RH2 (1cas), anti-FY1 (1 cas), anti-MNS3 (1 cas), anti-JK1 (1cas), anti-KEL3 (1 cas) et anti-HTLA (1cas).
L’ECL présente de nombreux avantages par rapport à la RAI. Cette dernière garde sa place dans certaines situations particulièrement chez les polytransfusés. L’ECL a cependant ses limites. Le respect de tous les tests réglementaires permet de les éviter.

Mots clés : Produits sanguins labiles- Hémovigilance - Traçabilité -Transfusion

Introduction  Les systèmes ABO et Rh Kell sont les principaux systèmes à respecter en transfusion sanguine, ils peuvent faire apparaitre des allo anticorps dirigés contre les antigènes que les receveurs ne possèdent pas.
Objectifs  Déterminer les fréquences phénotypiques chez les donneurs de sang et les patients receveurs de sang admis en hématologie et oncologie CHU d'Oran.
Matériels et méthodes  Cette étude a été réalisée au centre de transfusion sanguine du CHU d’Oran sur un échantillon de 729 donneurs de sang et 276 patients, chez lesquels nous avons effectué un groupage ABO et phénotype Rhésus Kell.
Les logiciels Microsoft OFFICE et SPSS V20 ont été utilisés pour la saisie et l’analyse des données.          
Résultats et Discussion  Le groupe O est dominant et le groupe AB est minoritaire. Le Rhésus positif est majoritaire comparé au Rhésus négatif. Il n’existe pas de différence significative de la répartition des groupes sanguins ABO RH1 chez les donneurs de sang et les polytransfusés (p>0.05). Le groupe AB RH :-1 est faiblement représenté chez les deux populations (<1%). L’association D+C+c+E-e+ prédomine chez toute la population recrutée. Les phénotypes les moins observés sont D- C- E+ c+ e-, et D- C+ E- c+ e+ (0.36%) chez les polytransfusés et D+ C+E- c- e+ (0,27%) chez les donneurs. Les antigènes D- (13%), E+ (25%), c- (13%), e- (2,19%) sont peu représentés chez la population des donneurs de sang ce qui peut rendre difficile la recherche de concentrés de globules rouges compatibles et d’exposer au risque de l’allo-immunisation.
Conclusion  Les résultats de cette étude sont similaires à  ceux trouvés dans d'autres régions du pays.

 

Nous rapportons 2 observations au cours desquelles le génotypage RH a permis d’expliquer l’apparente discordance entre le phénotype RH d’un enfant et celui de ses parents.
1er cas: enfant de phénotype RH:-1,w2,3,4,5 née d’un père RH:1,2,3,4,5 et d’une mère RH :–1,–2,–3,4,5 marocains (fig.1). Le génotypage montre la transmission d’un haplotype paternel rare associant RHD*D-CE(4-7)-D [RHD*01N.07] et RHCE*cE [RHCE*03], et dont le phénotype RH:–2,12 peut être déduit. Le phénotype RH:w2 apparent de l’enfant serait lié à la réaction croisée de certains réactifs monoclonaux anti-RH2 avec l’antigène RH12 (G). La transfusion de CGR RH:–2 est recommandée pour éviter une alloimmunisation anti-RH2. Ce cas souligne en outre l’intérêt d’explorer l’expression affaiblie des antigènes RH quelle que soit l’origine ethnique des patients.
2ème cas: enfant de phénotype RH:w1,–2,3,4,5 née d’un père RH:–1,–2,–3,4,5 et d’une mère RH:–1,2,3,4,5 caucasiens (fig.2). Le génotypage RH montre la transmission de l’allèle maternel RHD*D faible de type 2 [RHD*01W.2] considéré dénué de risque d’alloimmunisation anti-RH1. Chez la mère, la présence de l’haplotype dCe en trans expliquerait l’affaiblissement d’expression antigénique (effet Ceppellini) en deçà du seuil de détection sérologique. Ce cas illustre la difficulté parfois rencontrée pour émettre un conseil transfusionnel et conduire la prévention de l’alloimmunisation anti-RH1 au cours de la grossesse. Si le phénotype RH:w1 maternel ne peut être confirmé par sérologie, la transfusion en CGR RH:–1 et l’injection d’Ig anti-RH1 peuvent être maintenues par prudence, sachant que l’allèle RHD d’origine maternelle rend le génotypage fœtal RH1 ininterprétable.

fig.1

fig.2

Introduction  Dans la pratique médicale en Côte d’Ivoire, si le diagnostic de l’anémie normochrome normocytaire (ANN) par saignement, par lyse mécanique au cours des hémoglobinopathies et par insuffisances médullaires quantitatives au cours des hémopathies malignes semble être évident, l’hypothèse de la lyse des globules rouges par action toxique des Ac est rarement évoquée.
Ce travail a pour objectif d’explorer l’auto-immunisation anti-érythrocytaire chez les patients présentant une ANN et d’en déterminer les facteurs d’influence.
 
Méthodologie  Il s’agissait d’une étude transversale réalisée sur 100 patients hospitalisés dans les services cliniques du CHU de Cocody présentant une ANN avec au moins un signe clinique de la triade de Chauffard. Pour ce faire plusieurs techniques ont été utilisées conjointement à savoir le test de Coombs direct à 4 °C et à 37°C, le test de Coombs indirect avec l’éluât à 4°C et 37°C et le test à la papaïne.
 
Résultats  33% des sujets possédaient des auto-anticorps (auto-Ac) anti-érythrocytaires. Parmi ces auto-Ac 46,67% sont de type IgG, 20% de type complément et 33,33%de type mixte. 54,55%  de ces auto-Ac ont été observés chez les patients présentant des maladies infectieuses. Les Ac chauds sont tout aussi responsables d’AHAI d’origine infectieuse  et idiopathique que les Ac froids.  L auto-immunisation n’était pas statistiquement liée à l’âge et au sexe.
 
Conclusion  Au terme de notre étude, nous avons mis en évidence la présence d’auto-Ac au cours des ANN. La principale étiologie était constituée des maladies infectieuses.
 
 
Mots clés  Auto-immunisation ; anémie normochrome norrnocytaire ; anémie hémolytique auto-immune
 
 

Observations Patiente n°1 (56 ans) suivie depuis 2008 pour une thrombocytémie essentielle. En 2019, une érythromyélémie révèle une myélofibrose secondaire. Le groupe sanguin met en évidence un aspect de double population érythrocytaire pour les antigènes (Ag) RH3 (E) et RH4 (c) en l’absence de transfusion récente, anomalie déjà relevée en 2015. L’étude moléculaire (BM) révèle une mutation MPL W515K (VAF: 54%) et ASXL1 (VAF: 8%) avec perte d’hétérozygotie en 1p36.33-p32.3. Patient n°2 (73 ans) atteint depuis 2011 de leucémie myelomonocytaire chronique avec détection d’une mutation du gène TET2 au diagnostic. En 2019, une hyperleucocytose révèle une forme proliférative avec présence d’un clone anormal à 46 chromosomes comportant une délétion interstitielle du chromosome 13. Le groupe sanguin O RH: -1,-2,-3,4,5 KEL: -1 est discordant avec 3 déterminations antérieures O RH: 1,2,-3,4,5 KEL: -1. La BM détecte une mutation supplémentaire du gène MPL W515L (VAF: 96%) et une perte d’hétérozygotie en 1p36.33-p31.3. Le génotypage RH est compatible avec la prédominance d’un clone circulant exprimant uniquement un haplotype dce chez un sujet initialement DCe/dce. L’évolution hématologique compliquée par la survenue d’un lymphome T/NK est rapidement défavorable.
Discussion Nous rapportons 2 observations d’anomalie d’expression, partielle ou totale, d’Ag du système RH survenant dans un contexte d’hémopathie maligne avec mutation MPL. Elles sont associées à une perte d’hétérozygotie incluant les gènes RHD et RHCE (1p36.11) situés à proximité du gène MPL (1p34). Le risque d’allo immunisation anti-RH semble alors peu probable mais peu de données sont rapportées dans la littérature.  
 

L’allo immunisation reste un problème majeur  chez les patients dépendant d’un support transfusionnel, et notamment ceux souffrant d’hémoglobinopathies.  L'identification des patients répondeurs et non-répondeurs aurait l’avantage de mettre en place des pratiques préventives uniquement chez les patients à risque. Pour les différencier, nous proposons une approche basée sur l’étude de l'expression des récepteurs de chimio-attraction et ce directement dans le sang.
Cette étude a porté sur des patients drépanocytaires poly-transfusés, immunisés et non immunisés. Nous avons distingué les deux groupes de patients répondeurs et non-répondeurs sur la base du niveau d'expression de CCR7 à la surface des lymphocytes T (TL) CD4+.   L'expression de CCR7 est associée à la chimio-attraction des LT.  Cette chimio-attraction est liée à d’autres récepteurs, et notamment CXCR4. Ainsi, les niveaux de LT CCR7+CXCR4+ chez les patients non allo-immunisés indiquent l'existence de niveaux plus faibles de chimio-attraction. Cette chimio-attraction est essentielle dans l'allo-immunisation, pour le recrutement des cellules T naïves et la promotion des rencontres entre ces lymphocytes T et B, conduisant à la différenciation des cellules B et à la production d'anticorps contre les GR. L’évaluation de l'expression de CCR7 et CXCR4 pourrait être un élément prédictif à prendre en compte pour distinguer les 2 populations de répondeurs et non répondeurs, et appliquer des mesures préventives (CGR phénotypés étendus), uniquement chez les répondeurs.  

Les réactions hémolytiques dues à une allo-immunisation persistent en l'absence de connaissances sur l’ensemble des  mécanismes qui sous-tendent ces réactions contre les globules rouges (GR). L’allo-immunisation se caractérise principalement par la production d’anticorps dirigées contre les GR. Les lymphocytes T CD4+ jouent également un rôle majeur dans cette production d’immunoglobulines, cependant le rôle des lymphocytes T CD8+, et donc l’activité cytolytique,  n’est que peu documentée.

Nous avons donc exploré et comparé les phénotypes des LT CD8+ mémoire anti-Jkb entre un groupe de patients drépanocytaires polytransfusés,  n’ayant jamais été immunisés malgré un régime de transfusion élevé, et un groupe de patients polytransfusés immunisés contre le Jkb. Neuf peptides Jkb de 8 mers, chevauchant de 5 mers ont été utilisés pour restimuler les LT CD8+ et étudier leur lymphoprolifération, leur production de cytokines et de perforine. Le contrôle positif, pour chaque patient, a été obtenu en stimulant les LT CD8+ avec un superantigène, l'entérotoxine B.Parmi les 13 patients présentant une réponse humorale anti-Jkb, 46% d’entre eux ont une réponse T CD8+ mémoire anti-Jkb. Cette réponse est fonctionnelle, les LT CD8+ prolifèrent et sécrètent des cytokines (IFNγ, TNFα, et IL2) et de la perforine en réponse aux peptides sélectionnés. Nous montrons ainsi pour la première fois que des réponses T CD8+ perforine/cytotoxique peuvent être présentes chez les patients allo-immunisés.

Nous rapportons l’observation récente de 2 patients de groupe O, suivis respectivement pour aplasie médullaire et LAM, dont toutes les hématies, ou une partie d’entre elles pour le 2ème patient, sont agglutinées par le réactif anti-A (clones 16243G2 + 16247E6 Grifols) décrit comme source de réaction croisée avec l’antigène Tn. A noter, chez le 1er patient, la survenue d’effets indésirables immédiats de type allergique (urticaire), mais sans hémolyse, après la transfusion d’un concentré plaquettaire de groupe A.
Le phénomène des hématies polyagglutinables, décrit en 1920, est lié à différentes situations conduisant à l’exposition de cryptantigènes érythrocytaires de nature glucidique (T, Tn, Tk …) qui sont la cible d’anticorps naturels irréguliers présents dans le plasma des adultes sains. Il n’est plus détecté de nos jours par les anticorps monoclonaux utilisés dans les réactifs de laboratoire, hormis dans d’exceptionnelles réactions croisées avec certains clones, et son diagnostic repose uniquement sur l’utilisation d’un panel de lectines spécifiques. Son impact transfusionnel a été longuement évalué, notamment pour la polyagglutinabilité T, et a conduit à recommander de transfuser en produits sanguins déplasmatisés. Néanmoins, de récents travaux tendent à remettre en question cette attitude.
La fréquence de la polyagglutinabilité Tn est très faible mais difficile à évaluer puisque non détectée en pratique. Par ailleurs, le taux d’Ac étant extrêmement variable selon les individus, l’impact transfusionnel éventuel, bien qu’attendu essentiellement sur le versant hémolytique,  reste également difficile à mesurer.

La découverte d’une agglutination faible à l’épreuve globulaire du groupage ABO fait discuter du diagnostic différentiel entre groupe A faible et groupe déficient en substance H. Dans le 2ème cas, on distingue les sujets « H-déficients de statut sécréteur » (ou « Para-Bombay ») des sujets « H faibles » (ou « Bombay Réunion »).
Le recours à un sérum-test anti-H, en détectant la présence de substance H sur les hématies, permet de valider rapidement un groupe A faible et de conseiller la transfusion de CGR O afin d’éviter un éventuel blocage au contrôle ultime.
En l’absence de substance H détectable, le recours au phénotype Lewis peut contribuer à orienter le diagnostic quand le résultat (LE:1,-2) permet de déduire le statut « non sécréteur » de l’individu.
Pour évoquer le diagnostic de « Para-Bombay », nous proposons une approche technique simple qui s’appuie sur l’analogie de ce phénotype avec celui observé chez les patients de groupe A sécréteur après greffe de CSH O. Dans ces 2 situations, l’agglutination faible des hématies du patient est liée à la présence de substance A extrinsèque, adsorbée sur les hématies à partir du plasma. De par ce phénomène, on peut observer, après 24h, une sédimentation des agglutinats dans les colonnes de microfiltration sur gel laissées à température ambiante. Cette sédimentation n’est pas observée pour les groupes A faible ou Bombay Réunion.
Le diagnostic de « Para-Bombay » ou « Bombay Réunion »  sera confirmé par l’étude des gènes FUT 1 et FUT2. Le conseil transfusionnel et obstétrical s’appuiera sur les conditions de la détection d’un anti-H dans le plasma, sachant que le retour d’expérience reste limité pour ces phénotypes rares.

Introduction L’ISBT répertorie plus de 70 allèles RHCE*ce dont 11 allèles nuls. Ces allèles nuls sont le fait d’événements génétiques variés (insertion, délétion, mutation). Nous présentons ici le cas d’une patiente avec un nouvel RHCE*ce nul et un allèle codant un groupe sanguin rare.
 
Méthodes les tests sérologiques automatisés et manuels pour l’expression des antigènes D, C, E, c, e ont été réalisés par des techniques standards d’hémagglutination avec des réactifs Bio-Rad. Après extraction de l’ADNg, le génotypage RH a été effectué à l’aide d’analyses de PCR en temps réel et de séquençage des 10 exons du gène RHCE.
 
Etude patiente enceinte de 25 ans de phénotype RH:1,w2,-3,-4,w5 originaire d’Afrique de l’Ouest.. Les analyses de PCR en temps réel montrent la présence d’un allèle RHCE*CeRN (RHCE*02.10.01) et d’un allèle RHCE*ce. Le séquençage confirme ces données et permet aussi d’identifier une mutation hétérozygote c.48G>C (pTrp16Cys) dans l’exon 1 du gène RHCE et une délétion hétérozygote c.366Gdel dans l’exon 3 du gène RHCE (p.Ser122Serfs*2). Cette délétion est associée à un décalage de cadre de lecture dans l'ARNm et à un codon stop prématuré dans le 3e exon, conduisant à une protéine Rh tronquée et non fonctionnelle. En raison de l'expression affaiblie des antigènes C et e, causée par l'allèle RHCE*CeRN et le phénotype c négatif, il est raisonnable de supposer que la nouvelle délétion est sur un allèle RHCE*ce.
 
Conclusion Nous décrivons un nouvel allèle RHCE*ce nul, RHCE*ce 48C,366delG, qui a reçu par l’ISBT le numéro provisoire :  RHCE*01N.12. En raison de l’allèle rare RHCE*CeRN, le phénotype de la patiente devient alors : RH:1,p2,-3,-4,p5, 32, -46.
 

Contexte Le système de groupe sanguin RH est le plus complexe. Il a une importance majeure en transfusion de par l’immunogénicité de ses antigènes et le pouvoir hémolytique des anticorps (Ac) développés, responsables de maladie hémolytique du fœtus et du nouveau-né (MHFN) et d’hémolyse post transfusionnelle, potentiellement fatale chez les drépanocytaires. Nous recensons les spécificités et variants RH rares les plus importants pour la pratique transfusionnelle dans une région à haute diversité génétique.
Méthodes Comparer les résultats de plusieurs études bibliographiques réalisées par notre équipe sur le système RH en 2021 (Transfusion, Transf Medicine Reviews, Transf Clinique et Biologique, Annals of Blood) et les observations pratiques du laboratoire d’immunohématologie moléculaire (IHM) de Créteil.
Résultats De manière attendue, les anti-RH18 et anti-RH46 apparaissent comme les Ac les plus importants en terme de dangerosité, d’incidence, et de difficulté de prise en charge. Plusieurs D partiels (DIV, DIIIa) associés à un risque d’immunisation et de MHFN important, sont retrouvés uniquement lorsque l’immunisation anti-D a déjà eu lieu ce qui soulève la question de leur dépistage car les techniques de groupage actuelles ne détectent pas d’affaiblissement sérologique pour ces variants. Pour les mêmes raisons, l’importance de plusieurs D partiels « Caucasiens » est probablement sous-estimée : DNB, DVII.
Conclusion Ces observations nous permettent d’adapter les recommandations de détection des variants en IHM et de proposer une surveillance immunologique de plusieurs D affaiblis susceptibles de ne pas présenter de risque d'alloimmunisation anti-D, afin de le démontrer.

Nous avons étudié les résultats de titrages d’auto-anticorps froids réalisés en 2020 dans le cadre de l’activité Immuno-Hématologie Erythrocytaire du LBM de l’EFS Auvergne-Rhône-Alpes. Cet examen est réalisé sur prescription médicale ou peut également être ajouté à l’initiative du biologiste chez les patients présentant un examen direct à l’antiglobuline (EDA) positif de type complément (à partir d’une intensité supérieure à 2+).
Les titrages d’auto anticorps froids sont réalisés en technique manuelle en tube. Le titre est établi en testant le plasma du patient et ses dilutions successives, vis-à-vis d’hématies autologues, d’hématies homologues adultes de groupe O (I+) et d’hématies homologues de nouveau-né de groupe O (i+) à 4°C et à 37°C si positif.
Un titre élevé d’anticorps froids (à partir de 64) peut conditionner le conseil transfusionnel de transfuser des CGR après les avoir tempérés ou réchauffés au moyen d’un dispositif adapté.
Nous avons pu exploiter les résultats de 862 titrages réalisés sur l’année 2020. Nous nous sommes intéressés au pourcentage de titrages positifs parmi les titrages réalisés, et notamment ceux dont l’examen direct à l’antiglobuline est négatif ou inférieur à 2+ en C3d. L’étude a permis de montrer que seule la positivité de l’EDA n’est pas un argument suffisant pour prédire d’un résultat positif du titrage chez le patient.
Nous avons investigué une possible corrélation entre un résultat positif et l’intensité de l’EDA, et avons recherché d’autres paramètres permettant d’affiner les indications au laboratoire (contexte clinique, autres arguments biologiques).

La mise à disposition du compte-rendu de résultats d’immuno-hématologie dans les services de soins est un enjeu-clé dans l’optimisation du délai de prise en charge transfusionnelle.
La diffusion du compte-rendu ne peut se faire qu’après validation de celui-ci par un biologiste habilité, cette étape est l’un des paramètres critiques du délai de rendu de résultats.
En couplant l’utilisation en routine du biologiste de garde dans le logiciel métier WALA à des règles de gestion définies dans le logiciel Inlog sélectionnant les dossiers sur des critères prédéfinis, nous avons pu automatiser la validation biologique pour 91,2% des dossiers de demande de groupages sanguins, dépistage de RAI ou examens directs à l’antiglobuline traités quotidiennement. Cette validation « au fil de l’eau » a permis une amélioration du délai de rendu de 114 minutes pour des périodes comparables tout en augmentant la sécurité transfusionnelle par l’usage de comptes-rendus définitifs, y compris en période de permanence des soins. En complément, ce développement a permis de filtrer les dossiers pour lesquels l’expertise du biologiste est requise selon des critères définis au préalable (existence d’une pathologie de type hémoglobinopathie ou greffe de cellules souches hématopoïétiques, antécédent d’allo-anticorps connu, groupes rares, saisie ou technique manuelle, etc.) tout en harmonisant la validation biologique régionale.
En conclusion, la validation au fil de l’eau permet de prévenir un retard en délivrance tout en sécurisant la prise en charge en fournissant un dossier immuno-hématologique complet de manière plus précoce, y compris en période de permanence des soins.

Introduction L’allo-immunisation anti-érythrocytaire est un problème majeur chez les patients transfusés. Elle peut conduire à des retards ou des impasses transfusionnelles, du fait de la nécessité de trouver des CGR dépourvus des Antigènes considérés.

Objectif Une analyse rétrospective des allo-immunisations post-transfusionnelles en France au cours de ces 5 dernières années, et plus particulièrement au sein de notre région Bourgogne Franche- Comté (BFC) a été réalisée.

Méthode A l’aide d’une requête, les données ont pu être extraites des bases régionales EFS. Des données épidémiologiques, la répartition des allo-immunisations selon l’âge et le sexe des patients, le nombre moyen de CGR transfusés en fonction du nombre d’allo-anticorps identifiés, la répartition des différents types d’allo-anticorps et la répartition par système ainsi que les associations les plus fréquentes au sein des allo-immunisation multiples ont pu être analysées en BFC et comparées à toute la France. En parallèle une analyse région par région a pu être réalisée.
Résultats Nous avons recensé 66261 patients et 82629 allo-anticorps identifiés. Les Allo-Ac les plus fréquemment mis en évidence sont : l’anti-RH3 (14,2%), l’anti-KEL1 (13,8%) et l’anti-RH1 (11,4%). Cependant, selon la région étudiée, le pourcentage de ces allo-Ac varie de façon significative.
 
Conclusion/Discussion Les données régionales EFS permettent à un instant T de réaliser une cartographie des allo immunisations afin de mettre en évidence ou non la prédominance de certains allo-anticorps qui pourraient différer des données de la littérature et nous permettre d’ajuster les phénotypes disponibles dans nos stocks de CGR régionaux.
 

Suite aux nouvelles recommandations EFS pour les drépanocytaires, nous avons instauré la réalisation d’un génotypage RHD et RHCE chez tous les patients drépanocytaires ayant reçu moins de 12 épisodes transfusionnels et/ou allo immunisés.
Suite à la mise en place de cette mesure, nous avons analysé les résultats de génotypage en regard des résultats sérologiques. L’objectif de cette étude est de mieux appréhender l’intérêt du génotypage, pour améliorer la prise en charge des patients.
Les génotypages sont adressés au laboratoire d’Immuno Hématologie Moléculaire de l’EFS PACC, qui utilise dans cette indication la technique eMAP (Elongation-mediated Multiplex Analysis of Polymorphisms) Bioarray, Immucor® avec différents kits : HEA, RHD et/ou RHCE. Cette technique est complétée par une PCR en temps réel à la recherche d’allèle RHCE*CeRN et une PCR allèle spécifique à la recherche d’allèle RHCE*ceAG (ce254) ainsi que par un séquençage des 10 exons des gènes RHD et/ou RHCE en cas de résultat indéterminé aux kits BioArray, ou si le patient présente une ambigüité sérologique sans variant identifié.
Sur la période d’étude, plus d’une centaine de génotypages* ont été réalisés. Nous avons analysé la proportion de variants retrouvés en biologie moléculaire comparativement à la technique sérologique : sur 100 génotypages réalisés, 21 variants sont retrouvés, seuls ou en association.
Nous avons ensuite mis en parallèle la présence d’antigène variant avec les résultats sérologiques (technique, intensité, ...), à la recherche d’un intérêt prépondérant d’une technique par rapport à une autre, mais également pour adapter au mieux la consigne transfusionnelle provisoire pour ces patients.

Nous rapportons le cas d’une anémie hémolytique survenue suite à l’injection d’ioméprol (Iomeron®) pour un examen d’imagerie chez une patiente de 66 ans suivie pour thrombose portale et myélofibrose secondaire. Dans l’heure suivant l’injection, la patiente présente une hémoglobinurie macroscopique, une hémoglobinémie à 6,2 g/dl et une haptoglobine indosable. L’examen direct à l’antiglobuline réalisé à J2 est modérément positif (2+) de type C3d.

La recherche d’anticorps anti-ioméprol met en évidence un anticorps de titre faible (titre = 1) en test indirect à l’antiglobuline sur hématies traitées par la trypsine. A la demande de son hématologue référent, une recherche d’anticorps anti-iodixanol (Visipaque®) est réalisée dans la même technique : elle est positive à un titre modéré (titre = 8).

Il s’agit du premier cas de réaction croisée d’un anticorps anti-ioméprol avec une autre molécule de la même classe thérapeutique. Depuis 2000, un seul autre cas d’anémie hémolytique induite par un anticorps anti-ioméprol a été mis en évidence par notre laboratoire (en 2017) et la réaction avec le iodixanol était négative. Aucune réaction croisée entre produits de contraste iodés n’est retrouvée dans la littérature (des réactions croisées sont exceptionnellement décrites entre céphalosporines)

L’utilisation de ces deux molécules doit désormais être contre-indiquée chez cette patiente. La recherche d’anticorps dirigés contre d’autres produits de contraste iodés [iopromide (Ultravist®) et iohexol (Omnipaque®)] va être prochainement réalisée pour s’assurer de l’absence de réaction croisée avec ceux-ci.

L’allo-immunisation plaquettaire post-transfusionnelle est une complication potentiellement sérieuse de la transfusion. En effet les allo-anticorps produits, principalement dirigés contre les antigènes HLA I, peuvent conduire à un état réfractaire (ER) qui compromet le succès de la transfusion de concentrés plaquettaires. La rate orchestre la réponse alloimmune mais les cellules spléniques initiant ce processus ne sont pas précisément identifiées. Parmi les splénocytes, les cellules B de la zone marginale (MZB) sont connues pour réagir rapidement aux antigènes sanguins.
L’objectif de cette étude est d’évaluer l’implication des MZB dans l’alloimmunisation plaquettaire et l’ER associé.
Nous avons développé un modèle murin d’allo-immunisation qui repose sur une multi-transfusion de plaquettes d’haplotype H2b dans une souris H2d. Ce protocole mène à la production d’allo-anticorps antiplaquettaires (anti-H2b) mis en évidence par cytométrie en flux. La transfusion de plaquettes H2b dans les souris alloimmunisées conduit à leur élimination de la circulation en moins de 2h, traduisant un ER.
Dans ce modèle, l’élimination des MZB par immunodéplétion entraîne une diminution de l’ordre de 50% de la production d'allo-anticorps. La délocalisation des MZB suite à un traitement au FTY720, un antagoniste des S1P1, conduit également à une réduction significative de la production d’alloanticorps. Lorsque les MZB sont absentes ou délocalisées, les plaquettes transfusées circulent encore 24h après la transfusion, indiquant un rôle majeur des MZB dans la prévention de l'ER.
En conclusion, nos résultats montrent que les MZB favorisent la production d’allo-anticorps impliqués dans les ER.

Un antigène érythrocytaire privé est retrouvé chez moins de  0.1% de la population.
Dans un contexte obstétrical, l’immunisation maternelle anti-privée dirigée contre un antigène paternel est suspectée en cas d’anémie fœtale ou néonatale et/ou d’hyperbilirubinémie post-natale chez une mère ayant des RAI négatives avec un EDA positif chez le nouveau-né. La recherche d’anticorps anti-privé dans ce cadre s’effectue en réalisant une compatibilisation croisée entre le sérum de la mère et/ ou l’éluat de l’enfant et les globules rouges du père. En cas de recherche positive, l’identification de l’anticorps est réalisée au CNRGS.
Dans cette étude rétrospective sur l’année 2020, nous avons étudié les indications et résultats de cette recherche. 18 demandes ont été reçues. Les contextes étaient : 2 anticorps-anti-privés annoncés, 2 anticorps anti-privé suspectés, une RAI maternelle avec anticorps sans spécificité, 7 contextes  d’incompatibilité (3 incompatibilités ABO et 4 RAI maternelles positives) mais avec élution non contributive chez le nouveau-né, 1 bébé annoncé avec un EDA positif, un bébé avec un EDA très faible et enfin dans des contextes cliniques: accélération des vitesses au doppler de l’artère cérébrale moyenne du fœtus,  anémie néonatale,  mort fœtale in utero. Une seule recherche s’est avérée positive, un anti-Lu14 a été identifié, sans risque in utero ni à la naissance.
Au total, 1/18 recherche s’est avérée positive en 2020, l’anticorps ne présentant pas d’intérêt obstétrical. En cas de recherche positive, le suivi clinico-biologique est à adapter à l’identification de l’anticorps. Son titrage sera réalisé avec les hématies paternelles préalablement congelées.

Le CNRHP (Centre National de Référence d’Hémobiologie Périnatale) a pour mission le diagnostic et le suivi de l’ictère sévère du nouveau-né. Tous les bilans d’ictères adressés au laboratoire comprennent le dosage des diverses formes de bilirubine et un bilan d’incompatibilité foeto-maternelle avec EDA.
Tous les EDA positifs font l’objet d’un test d’élution soit à la chaleur soit par Elukit® en fonction du type d’anticorps.
Face à un EDA négatif, des demandes d’élution, plus sensible que l’EDA, sont fréquemment adressées à notre laboratoire.
Dans cette étude rétrospective nous avons analysé sur 12 mois la pertinence de cette prescription et essayé de déterminer l’indication pour laquelle elle pouvait avoir un intérêt particulier.
L’ensemble des bilans d’ictères néonataux reçus au CNRHP en 2019 a été analysé (n= 6 044). Parmi les 1076 bilans présentant une valeur de bilirubine pathologique, 612 avaient un EDA négatif. Sur 130 élutions demandées par le prescripteur en présence d’une situation d’incompatibilité avec un EDA négatif, 118 ont été réalisées et 58 étaient positives soit 49%. Il s’agit pour 99% des cas d’une incompatibilité ABO. Dans le groupe des bilirubines non pathologiques (4 953 prélèvements), 3 044 avaient un EDA négatif. Trente-neuf élutions ont été retrouvées positives (31%) sur les 122 réalisées en présence d’une incompatibilité avec un EDA négatif. Dans 67% des cas, il s’agit d’incompatibilités ABO.
En conclusion, dans le bilan étiologique des cas d’ hyperbilirubinémie pathologique, la réalisation du test d’élution est indiquée de façon systématique en présence d’une incompatibilité avec EDA négatif, tout particulièrement pour les incompatibilités ABO.

La recherche et titrage des auto anticorps froids sont des éléments pertinents du conseil transfusionnel. Un titre élevé (≥ 64) oriente vers une transfusion de CGR réchauffés afin d’éviter une hémolyse post transfusionnelle.
Dans le cadre de sa demande d'extension d’accréditation portant sur cette analyse, le LBM de l’EFSAURA, ne participe ni à un EEQ, ni à une Comparaison Inter Laboratoires : au regard de la norme 15189, ceci ne permet pas au laboratoire de justifier de l’exactitude des résultats rendus.  Ce constat a fait l’objet un écart critique lors de l’évaluation du LBM par le COFRAC.
Aucun EEQ commercialisé n’existe en raison de la labilité des auto-anticorps froids et la fréquence faible de réalisation de cette analyse
Le LBM de l’EFS AURA a donc mis en place une CIL avec le LBM EFS BFC permettant un échange a minima annuel et avec un seul site du LBM.
La fréquence de participation est déterminée en tenant compte
- du faible nombre annuel d'examens
- du volume nécessaire de l'échantillon
- du caractère labile et instable de l'auto-anticorps froids entraînant des difficultés de transfert inter-sites
La mise en place de cette CIL a nécessité la formalisation:
- d'une fiche technique précisant les modalités de préparation et d'envoi
- d'un contrat de collaboration entre les 2 LBM
Un an après sa mise en route, nous confirmons une bonne capacité d’exploitation des résultats qui conforte la qualité des résultats rendus: ceci  encourage le déploiement de cette pratique entre les laboratoires des différents ETS. Toutefois  il est indispensable de poursuivre la comparaison intra-laboratoire déjà initiée

Le test de Kleihauer est indispensable au diagnostic des hémorragies foeto maternelles et à l’adaptation de la dose de Rhophylac® dans le cadre de la prévention de l’immunisation maternelle.
Le LBM de l’EFSAURA utilisait jusqu’alors, dans chaque série de test, un CQI non quantifié, validant la bonne coloration du frottis : au regard de la norme 15189, ceci ne permet pas de justifier de la maitrise de la technique dont le résultat est rendu en nombre d’hématies fœtales pour 10 000 hématies adultes. Ce constat a fait l’objet d’un écart critique lors de l’évaluation par le COFRAC du LBM de l’EFS AURA.
Le laboratoire a donc fabriqué en interne un CQI de dilution déterminée ayant une stabilité 2 semaines. Ce CQI sert à la fois de témoin de coloration inclus dans chaque série sans être compté et permet d’assurer une analyse de tendance du CQI quantitatif.
Le compte est réalisé
Dans chaque laboratoire site de façon hebdomadaire
Systématiquement si test de Kleihauer patiente estimé ≥ 20HF  
La valeur cible attendue est définie par une moyenne des résultats de l’ensemble des sites réalisant des tests de Kleihauer  sur  les 5  premiers lots de CQI fabriqués. La conformité est établie par rapport à la valeur cible +/- 35% conformément aux données de la validation de méthode réalisée par le LBM
Un tableau de saisie des résultats par site et commun à l’ensemble du LBM permet d’établir une courbe d’analyse de tendance des résultats de CQI. Les données sont exploitées a minima au moment de la Revue de Direction du LBM afin d’assurer la comparabilité des résultats rendus intersites et d’ajuster le calcul de la valeur cible attendue avec un plus grand nombre de valeurs.

Introduction Lors d’une immunoprophylaxie pour prévenir l’allo-immunisation anti-RH1, un anticorps anti-D résiduel (ADR) est retrouvé lors des recherches d’agglutinines irrégulières (RAI). Un ADR et un allo-anticorps anti-RH1 ont la même réaction d’agglutination à la RAI, mais leur cinétique diffère. La lecture de la RAI étant semi-quantitative, une intensité observée plus forte qu’attendue doit faire suspecter un allo-anticorps anti-RH1. A l’inverse, une intensité trop faible peut signifier une protection insuffisante. Nous avons voulu établir une courbe de référence de décroissance de l’intensité des ADR dans le temps.
Matériel et méthodes Nous avons recueilli 364 données brutes de RAI auprès de 9 sites EFS d’avril à juillet 2020, concernant des femmes RH:-1 ayant bénéficié d’une séroprophylaxie standard anti-RH1. La valeur retenue était la moyenne des intensités obtenues avec les hématies RH:1 du panel d’identification en technique Coombs indirect, rapportée au délai entre l’injection et le prélèvement. L’analyse a été faite séparément en fonction de la dose d’immunoprophylaxie et de l’automate des laboratoires.
Résultats Pour la dose de 300 µg administrée, nous notons la même tendance de décroissance avec les deux automates utilisés. Des seuils d’alerte d’intensité haute ont pu être établis.
Discussion Les courbes de référence étant acquises, par dose et par automate, nous démarrons maintenant une seconde phase prospective où les laboratoires vont devoir repérer les valeurs anormales et envisager un micro-titrage afin de confirmer ou non la présence d’un allo-anticorps anti-RH1.

L’Examen Direct à l’Antiglobuline (EDA) fait partie du bilan systématiquement demandé par les services d’hématologie dans le contexte d’une exploration d’Anémie Hémolytique Auto-Immune (AHAI). Notre site EFS de l’hôpital Lyon Sud réalise également l’EDA élargi à la recherche d’immunoglobulines de classe IgA, IgM et la fraction C3c du complément fixés sur les hématies, les IgG et C3d étant détectés par l’EDA habituel. Une recherche d’agglutinines froides (AF) fait aussi partie du bilan.

Les prescriptions et résultats des EDA élargis réalisés pendant deux ans (2019 et 2020) sur les sites EFS de Lyon ont été analysés afin de comprendre leur utilité et leur place dans l’exploration des AHAI. 304 dossiers ont été étudiés avec, pour chaque résultat positif (4,3% des dossiers : 4 IgA, 5C3c, 7 IgM), la recherche du contexte clinique et les antériorités. En parallèle, 106 demandes d’AF ont également été analysées.

Le but de cette étude a été de répondre à plusieurs questions : Quelle est la place de l’EDA élargi par rapport à l’EDA classique dans le contexte d’AHAI ? La recherche d’AF est-elle justifiée en cas d’EDA de type complément négatif ?
Les réponses nous permettront ainsi de mieux cibler les indications de ces analyses souvent chronophages car réalisées en techniques manuelles.

L’objectif était d’évaluer les taux des allo et auto-immunisations anti-érythrocytaires chez des patients polytransfusés pour hémoglobinopathies.
Suivi prospectif, sur 3 ans (2018-2020), de patients polytransfusés pour hémoglobinopathies, par test indirect à l’antiglobuline (TIA) pour la recherche d’anticorps irréguliers (RAI) et test direct à l’antiglobuline (TDA) post-transfusionnels sur cartes gel ID-Diamed. Les CGR transfusés sont systématiquement phénotypés RH-KEL1 et compatibilisés.
Il s’agissait de 76 patients (35 thalassémiques, 37 drépanocytaires et 4 drépano-thalassémiques) polytransfusés. Le sex-ratio était de 1,3 et l’âge moyen de 24 ans. Le total des CGR transfusés était de 1 941 , soit 25,5 CGR/patient (1-127). Un total de 81 RAI et de 27 TDA ont été pratiqués. La prévalence globale de l’allo-immunisation était de 2,6 %, soit 2,9 % chez les thalassémiques et 2,7% chez les drépanocytaires (p >0,01). L’incidence de l’allo-immunisation était nulle puisque les deux anticorps identifiés (anti-E) ont été retrouvés chez deux patients dès leur inclusion. L’auto-immunisation (TDA positif à IgG) a concerné les patients thalassémiques avec une prévalence de 17,1% (p>0,01).
Le taux d’allo-immunisation était inférieur à celui retrouvé chez nos patients entre 1990-2009 (16,6%). L’absence de nouvelle allo-immunisation s’explique par la généralisation du phénotypage RH-KEL1. Nos patients s’immunisent moins que ceux en Europe de par leur plus grande homogénéité génétique avec les donneurs de sang.

Les anticorps monoclonaux ont pris une place importante dans le système de soins et sont actuellement indiqués dans plus de soixante pathologies. La forte expression de la molécule CD38 par les cellules plasmocytaires a permis le développement d’anticorps spécifiques pour le traitement de patients atteints de Myélome.
Le Daratumumab et l’Isatuxumab ciblent le CD38, fortement exprimé à la surface des cellules myélomateuses mais également en faible quantité à la surface des globules rouges. La présence de ces anticorps dans le plasma des patients, plusieurs mois après l’injection, peut perturber la Recherche d’Anticorps anti-érythrocytaires et la rendre positive en se fixant sur les hématies-tests du panel. Cette positivité non spécifique peut masquer un allo-anticorps.
Plusieurs stratégies ont été suggérées afin d’atténuer les interférences du médicament. Nous avons étudié chacune de ces méthodes en compilant les avantages et les limites (traitement des hématies-tests, utilisation d’hématies de sang de cordon, neutralisation du médicament, CD38 solubles (sCD38), cellules Stroma Daudi). Nous avons également dressé le bilan des analyses IH (phénotypes étendus) réalisées avant l’instauration du traitement ainsi que le bilan des allo-immunisations des patients suivis à Lyon, entre le 1er Janvier 2018 et le 16 Juin 2020. Les résultats obtenus montrent une bonne prescription des examens immuno-hématologiques pré-transfusionnels et une bonne communication du traitement instauré. Le taux d’allo-immunisations chez les patients suivis (2,5%) correspond aux données de la littérature avec la mise en évidence d’un anticorps anti-S (MNS3) et un anticorps anti-Fya (FY1) chez 2 patients.

Dans le cadre de la prophylaxie rhésus de la femme enceinte RH:-1, le test de Kleihauer (KH) permet d’adapter la posologie du Rhophylac®. Au CNRHP, le marquage anti-RH1-BRAD3-FITC en cytométrie en flux (CMF) est utilisé en complément du KH pour connaitre le statut RH1 des hématies fœtales (HF) et la nécessité ou non de traiter la patiente. Ce traitement est nécessaire chez la patiente RH:-1 mais aussi RH1 partiel. Le marquage BRAD3 peut être informatif dans ce dernier cas de figure comme le montre le cas de Mme ZEN, 34SA, KH à 80HF/10000hématies adultes prescrit pour diminution des mouvements actifs fœtaux. Elle possède un variant RH1 positif faible de type 4.0 ou 4.3 avec risque d’alloimmunisation anti-RH1, nécessitant l’injection de 3 doses de Rhophylac®. Un marquage en CMF a été réalisé afin de savoir s’il était possible de détecter des hématies fœtales RH:1 parmi la population maternelles RH1 positif faible. Pour cela, nous utilisons 3 témoins : négatif, positif et enfin le sang de la patiente enrichi en sang fœtal RH:1 afin de savoir si un phénotype RH:1 peut être distingué de la population maternelle, ce qui était le cas pour Mme ZEN. Enfin, le sang de la patiente testé seul montre un signal unique permettant de conclure que le fœtus n’est pas RH1 positif possèdant probablement le variant RH1 partiel hérité de sa mère. Il n’y a donc pas de risque d’alloimmunisation anti-RH1 ni nécessité de traiter la patiente. La CMF BRAD3 a donc tout son intérêt chez la patiente RH1 partiel en complément du KH dans le cadre de la prophylaxie rhésus. Intérêt d’autant plus important que chez ces patientes le génotypage RHD fœtal sur échantillon de sang maternel est ininterprétable.

La recherche d‘anticorps anti-érythrocytaires (RAE) chez les femmes enceintes est primordiale afin de prévenir la maladie hémolytique du nouveau-né. Le but était d’évaluer la prévalence de l’alloimmunisation antiérythrocytaire (AE).
Il s’agit d’une étude  rétrospective sur les femmes immunisées [Janvier 2017-Avril 2021].Les patientes ayant reçu l’immunoprophylaxie anti-RH1 ont été exclues. Les données recueillies étaient : antécédents obstétricaux et transfusionnels, spécificité et titre des allo-anticorps (Ac). La RAE était réalisée par Coombs indirect (CI) sur carte gel Grifols® ainsi que le titrage des Ac .
Parmi 4081 RAE (4038 patientes), 116 (2,84%) étaient positives. 43 allo-anticorps ont été identifiés chez 28 patientes. Le taux d’alloimmunisation était estimé à 0,69%. La première RAE était faite au-delà de 24 SA dans 7 cas. 13 femmes étaient multipares. Les antécédents obstétricaux relevés: avortement (3 cas), mort fœtale intra-utéro (6 cas) et transfusion in-utero (6 cas). Neuf femmes avaient des antécédents transfusionnels dont cinq polytransfusées. 16 femmes étaient RH 1. 11 cas avaient des anticorps  dirigés contre les antigènes du système Rhésus Kell (RH-K), 7 cas avaient des Ac dirigés contre les antigènes des systèmes non RH-K et 10 cas avaient des associations. Le titre de l’anti-RH1 variait du pur à >2048, l’anti-RH2 du pur à 128, l’anti-RH3 de 2 à 4, l’anti-KEL1 était à 128 et l’anti-RH4 était positif au pur.   
L’AE reste encore un problème majeur dans le suivi obstétrical. Il est fondamental  d’instaurer un calendrier de suivi immunohématologique national chez les femmes enceintes en Tunisie.

Nous rapportons et analysons le cas d’un incident transfusionnel causé par un anti-MNS1.
Patiente âgée de 61 ans, multipare, de groupe A RH:-1, transfusée en 2020 par 2 CGR phénocompatibles RH-KEL1 et compatibilisés. En 2021, elle a reçu une 2ème transfusion par 2CGR O RH:-1(en raison d’une difficulté de groupage ABO constatée par l’équipe de nuit)  compatibilisés suite à laquelle le service transfuseur a déclaré  une réaction hémolytique aiguë per-transfusionnelle. Le laboratoire a trouvé :1/ sur échantillon pré-transfusionnel: cross-match en TDI à 37°C négatif en tube et positif en gel, RAI positive à anti-MNS1 et phénotype de la patiente MNS :-1, 2/ sur échantillon post-transfusionnel : TDA positif (IgG), élution (-). Elle a été ensuite transfusée par 2 CGR MNS :-1 sans effet indésirable. A la demande d’une 4ème transfusion, le cross-match était positif avec 3 CGR MNS/-1 . L’enquête a montré un autoanticorps de type IgG et des agglutinines froides de titre 256 rendant difficile la sélection de CGR compatibles.
L’anti-MNS1, le plus souvent naturel et inactif à 37°C, est généralement considéré sans intérêt transfusionnel. Cependant, il peut être immun, post-transfusionnel ou post-gravidique, induisant une hémolyse post-transfusionnelle ou une maladie hémolytique fœtale et/ou néonatale à issue parfois fatale. Dans notre pays, en l’absence de RAI pré-transfusionnelle systématique, l’épreuve de compatibilité à 37°C peut passer à côté de cet Ac. L’association d’un autoanticorps rend la sélection de sang approprié encore plus longue et laborieuse exigeant une communication étroite avec le médecin transfuseur pour conduire à bien la conduite transfusionnelle

Dans le domaine de la transfusion sanguine, le groupe O peut être codé par plusieurs allèles. Les plus fréquemment rencontrés sont des allèles dits « délétionnels » à l’origine d’une protéine tronquée non fonctionnelle. Ces derniers ont en commun la mutation del G261-.

2 à 5% de la population des donneurs caucasiens ne possèdent pas la mutation del G261- ; il s’agit du groupe O2 possédant l’allèle O02. Celui-ci comportedes polymorphismes nucléotidiques (Single NucleotidPolymorphism) induisant des variations génomiquessimilaires à l’allèle codant pour le groupe A.

Ainsi l’épreuve sérique d’un sujet O2 montre une réaction plus faible voire absente avec l’hématie A1 qu’avec l’hématie B contrairement à ce que l’on pourrait attendre pour un groupe O. Ce profil ne permet pas de faire la distinction entre un groupe A faible avec des anticorps anti-A1 et un groupe O2, à l’origine d’erreurs transfusionnelles.

Nous rapportons ici un cas rencontré dans notre établissement et faisons une mise au point sur cette entité rare.

 

Introduction : Le Congo-BZV est peuplé de populations d’origines diverses auprès desquelles s’organisent parfois des collectes de sang cédé aux patients congolais.
Objectif : Analyser les pratiques immuno-hématologiques dans le contexte congolais afin d’évaluer sécurité immunologique transfusionnelle.
Méthodes : Etude de la pratique immuno-hématologique au Congo – BZV de 2002 à 2017 : Comparaison des données des ABO/RhD et des phénotypes Rh-kell, entre des populations d’origines différentes.   
Résultats : Au Congo-BZV l’immuno-hématologie se résume au groupage ABO/RhD. Les fréquences des GS sont de 20,36% (groupe A), 20,15% (Groupe B), 3,06 (groupe AB), 56,43% (groupe O) et 97,15% (D+). Comparés avec le Gabon, le Sénégal, le Togo, le Bénin et le Burkina Faso, ces résultats sont les mêmes. Cependant, ils sont différents avec les européens (France) 45% (A), 9% (B), 42% (O), et avec les asiatiques (Chinois) 26,6% (A), 32% (B), 28,6% (O). Le phénotypage Rh-kell n’est fait que sur les D négatif (2,85%), de façon non systématique. Les différentes fréquences des phénotypes : DCcee : Congo (1,4%), Gabon (13,4%) et Liban (32,56%), et pour Dccee, Congo (78,8%), Gabon (67%) et Liban (2,32%).
Conclusion : L’étude confirme selon la population : les fréquences ABO/RhD et des allèles RHD/RHCE ne sont pas les mêmes. Elle montre que la transfusion se pratique avec un risque élevé d’alloimmunisation. Le renforcement des pratiques immuno-hématologique associé à la recherche permettra d’améliorer la sécurité immunologique transfusionnelle.
Mots clés : Immunohématologie, alloimmunisation, sécurité immunologique transfusionnelle, Congo-Brazzaville

 

Les thrombopénies néonatales (TNN) immunes représentent moins de 5% des thrombopénies précoces (< 72 h) du nouveau-né (NN), l’alloimmunisation plaquettaire restant une étiologie peu fréquente. Ce diagnostic avoisinerait 33 % des cas de TNN adressés au laboratoire d’immunologie plaquettaire.
Le but de cette étude rétrospective était de déterminer la fréquence des thrombopénies néonatales alloimmunes (NAIT) parmi les suspiscions de NAIT et d’identifier les alloanticorps en cause.
131 NN ont été explorés, mais seulement 123 TNN ont pu être exploitées.
30 NN sont compatibles avec leur mère dans les 11 systèmes antigéniques plaquettaires majeurs (HPA). Le génotypage de 2 NN n’a pas pu être déterminé par concentration en ADN extrait trop faible; 91 NN sont incompatibles avec leur mère dans un ou plusieurs systèmes HPA. 29 NN ont une mère immunisée par un ou plusieurs alloanticorps antiplaquettaires anti-HPA-1a, 5a ou 5b, 3a, 15b et CD109. Le diagnostic de NAIT est donc porté dans 31,9% des cas, la proportion de garçons étant de 58,6%.
Cette étude montre que la fréquence des NAIT retrouvée est en accord avec la littérature tout comme la proportion de garçons plus souvent thrombopéniques. Une double ou triple alloimmunisation maternelle pourrait être un facteur de gravité de la TNN. Cependant, le nombre de cas est faible bien que 75% des mères soient incompatibes avec leur NN dans un des 11 systèmes HPA. Cette différence pourrait être liée soit à la rareté des alloimmunisations soit aux techniques sérologiques manquant de sensibilité. Ce travail est donc à poursuivre dans une visée prospective afin d’améliorer les critéres diagnostiques et les recommandations de prise en charge.

Un test de Coombs direct positif est observé chez un peu moins de la moitié des patients atteints par la COVID-19. Ces mêmes patients peuvent développer des symptômes sévères ainsi qu’une anémie pouvant justifier l’administration de composés érythrocytaires.
L'interprétation d'un test de Coombs direct positif chez des patients COVID-19 récemment transfusés peut s’avérer complexe. Avant que la recherche d’agglutinines irrégulières ne se positive, un test de Coombs direct positif est parfois le seul signe avant-coureur de la présence d’un allo-anticorps de transfusion et peut prédire le début d’une hémolyse intravasculaire. Chez un patient COVID-19 transfusé, il est donc primordial de différencier les anticorps induits par la COVID-19 et les éventuels allo-anticorps transfusionnels.
La technique d’élution est tout à fait appropriée dans le sens où les auto-anticorps provoqués par la COVID-19 n’ont aucune spécificité quand ils sont testés contre les panels commerciaux. Cependant, la technique d’élution est une technique fastidieuse et chronophage. Il y a donc lieu de sélectionner les patients COVID-19, récemment transfusés et présentant un test de Coombs direct positif pour lesquels une élution est primordiale. Pour ce faire, la chronologie de transfusion, les signes clinico-biologiques d’hémolyse ainsi que le rendement post-transfusionnel en hémoglobine doivent faire partie d’un arbre décisionnel en faveur ou non d’une élution.
En conclusion, la technique d'élution intégrée dans un processus décisionnel approprié joue pleinement son rôle pour prévenir les réactions transfusionnelles graves chez les patients COVID-19 présentant un test Coombs direct positif.

L'état réfractaire aux transfusions plaquettaires lié à l’immunisation HLA I reste un problème majeur en hématologie. Les techniques de détermination des anticorps anti-HLA sur support solide (Immucor® et One Lambda® (OL) utilisant des antigènes uniques (Single Antigen (SA)) recombinants sont utilisés pour sélectionner les produits plaquettaires HLA compatibles. Le test HISTOSPOT (HS) (BAG®) est une méthode d'identification des anticorps anti-HLA basée sur la détection par spot coloré ciblant un antigène unique immobilisé. L’intérêt est de fonctionner de manière automatisée sur MR.SPOT®. Le logiciel HISTOMATCH HLA AB détermine la coloration de chaque spot afin de déterminer les spécificités des anticorps. L'objectif de cette étude est de tester la capacité de HS en comparaison avec OL SA à détecter les anticorps anti-HLA classe I à partir de 56 sérums de 54 patients réfractaires ayant reçu des CPA HLA mismatch. Au total, 1414 spécificités de HLA classe I (433 HLA-A, 981 HLA-B), ont été détectées par OL SA. La MFI est > 5000 pour 825 SA et < 5000 pour 589. 66% de ces spécificités ont été détectées par HS. Lorsque la MFI de OL SA est > 5000, 16 % des spécificités n'ont pas été identifiées par HISTOSPOT (concordance à 84%), et 60% lorsque la MFI OL SA est < 5000 (concordance à 40%). 32 spécificités ont été détectées par HS mais pas par OL SA. Enfin, HS dans la prédiction d’inefficacité plaquettaire est moins sensible que OL SA (21% vs 45%), mais plus spécifique (86% vs 52%) et a une meilleure valeur prédictive positive (72% vs 63%). Sa pertinence sur la sélection des produits plaquettaires HLA compatibles doit être étudiée.

Introduction Les pan agglutinations du panel d’identification lors des RAI, dues à des auto anticorps, des anti-publics ou des mélanges d’anticorps, empêchent la détermination des spécificités d’anticorps présents dans le plasma. L’adsorption et l’identification sur l’adsorbat sont des outils pour la levée de cette difficulté. D’un point de vue transfusionnel, l’adsorption permet de choisir le CGR le plus adapté sans avoir recours systématiquement à la qualification « phénotype étendu ». 
Matériels/méthode Plusieurs méthodes d’adsorption sont décrites, nous présentons les résultats de la méthode « avec ajout de Liss », (solution de basse force ionique) : analyse du taux de positivité et répartition des spécificités, sur une période de 6 ans. 
Résultats 4738 bilans d’adsorptions (sur hématies autologues ou homologues) réalisés sur un nombre total de 42 076 RAI identifications, soit 11% des RAI identifications. 27% de positivité dont ¼ d’auto anticorps et ¾ d’allo anticorps. 
Les spécificités les plus fréquemment retrouvées seules dans l’adsorbat sont les anti-RH1, JK1, RH3, RH8. Dans près de 20% des cas un mélange d’anticorps est retrouvé. 
Discussion/Conclusion La méthode d’adsorption en solution de basse force ionique permet d’identifier des spécificités d’anticorps rapidement et d’assurer la sécurité immuno-hématologique des transfusions, sans avoir recours, par prudence, aux CGR phénotypés étendus.

Si la transfusion d’un patient requiert 2 déterminations de son groupe sanguin (GS) ABO RHK, l’arrêté du 15 mai 2018 rappelle que « La détermination du phénotypage érythrocytaire est effectuée sur la base d'une seule réalisation sur un seul échantillon sanguin ». Nous rapportons l’évolution des redondances de GS au CHU de Caen.
Dans la mesure où les résultats immuno-hématologiques des patients de l’établissement sont intégrés au dossier transfusionnel informatisé depuis juillet 2018, les déterminations en excès (au-delà de 2 déterminations par patient) sont étudiées et comparées aux données antérieures (issues des services de facturation du CHU).
En 2020, parmi les 23 407 déterminations réalisées chez 13 840 patients, 4.8% sont des déterminations en excès, versus 11% entre les 1/1/2016 et 15/12/2018, tandis que le nombre de déterminations a régressé de 12% et que le nombre de patients transfusés est stable (environ 3 500 chaque année).  Le recours au DTI, sur lequel les demandes de GS sont saisies, a permis de limiter les déterminations en excès, même s’il persiste une proportion importance d’examens inutiles, aussi constatée en 2020. La généralisation de l’usage du DTI et l’optimisation des alertes qui y sont paramétrées doivent permettre de progresser.
Aussi, la procédure « Groupage sanguin » (2019), oriente la prescription des tests IH. L’objectif est dorénavant de la compléter afin de guider les prescripteurs vers 1, 2 ou aucune détermination du GS selon le contexte clinique du patient.
Ainsi, l’effort de pertinence de prescription et de prélèvement des examens IH est à poursuivre afin notamment de lutter contre les automatismes à l’origine d’examens inutiles et coûteux.
 

Contexte :
L’EFS Hauts de France Normandie, site de Lille est le site référent de sa région dans le suivi de la femme enceinte par les analyses qu’il propose : RAI /Identification, titrage, dosage pondéral et génotypage fœtal.
Il collabore notamment avec la maternité Jeanne de Flandre, la plus grande maternité de France réalisant plus de 5 700 naissances annuelles.
L’allo-immunisation fœto-maternelle est la cause majeure d’anémie hémolytique chez le fœtus et le nouveau-né. La recherche et le suivi des anticorps anti-érythrocytaires sont donc des éléments prépondérants du bilan de suivi immuno-hématologique chez la femme enceinte.
Le laboratoire s’est intéressé à la pertinence de l’utilisation d’une nouvelle génération de RAI chez la femme enceinte allo-immunisée.
 
Méthode :
Cette étude est réalisée sur l’automate QWALYS® Evo utilisant la technologie EMT- réactifs I-Mag Screen de DIAGAST.
Cette méthode innovante consiste à utiliser un panel d’hématies magnétisées : un anticorps Anti-Glycophorine A (GPA) est couplé à une particule de fer permettant une liaison covalente à la GPA présente à la surface de toutes les hématies.
Elle est éprouvée sur une sérothèque d’échantillons connus issue de femmes enceintes allo-immunisées (anticorps identifiés et titrés) et complétés par ceux de la routine du laboratoire et présentant un intérêt obstétrical.
L’objectif étant de déterminer les performances de ce nouveau réactif sur cette population.
 
 

La région CVL comporte 40 établissements de santé (ES) (10 sans dépôts de sang) réalisant régulièrement des transfusions sanguines. La réglementation impose aux transporteurs de PSL d’avoir une licence de transport intérieur et de suivre la décision du 10/03/2020 définissant les principes de bonnes pratiques prévues à l’article L.1222-12 du CSP en réalisant notamment une convention avec l’ES. Le but de ce travail est de faire l’état des lieux régional de ce fonctionnement.
Une grille d’audit a été élaborée et adressée par mail à chaque ES.
36 ES (6 sans dépôts) ont réalisées cet audit. 61% des ES avaient un prestataire externe pour le transport des PSL avec toujours une convention. Dans 20% des cas un transport simultané de personne ou de produit non liés à la transfusion (dans 57% il s’agissait d’un prestataire externe) était mis en évidence; Le délai d’acheminement respectait la convention dans 85% des cas. 63% des chauffeurs étaient formés, ils avaient dans près de 80% des cas un kit en cas d’incident (1% de périmés) et 95% avaient des consignes claires en cas d’accident. Dans 73% des cas, le délai d’acheminement était conforme à la convention existante.
20% des transports de PSL étaient réalisés avec un transport simultané de personne ou de produit non lié à la transfusion, environ un tiers des chauffeurs n’étaient pas formés. Lors des inspections de dépôts de sang ; un contrôle de l'existence et de la conformité d'une convention de transport en cas de recours à un prestataire externe; de la formation des chauffeurs est nécessaire. Au-delà, la question de l'intérêt de la mise en place d'une autorisation nationale spécifique au transport de PSL peut se poser.

Introduction  L’activité transfusionnelle est considérée comme étant l’une des activités les plus sensibles à la validité des identités des patients.
Ce travail rapporte deux incidents graves de la chaine transfusionnelle causés par des erreurs d’identification des malades.
1er Cas clinique  Il s’agit d’un nourrisson de 4 mois, hospitalisé au service de réanimation cardio-vasculaire pédiatrique pour une chirurgie de CIV.Cette intervention a nécessité deux transfusions successives dont l’une était fatale.
2ème cas clinique  Patiente âgée de 79 ans, diabétique type 2, hypertendue et dialysée chronique admise aux urgences pour hémorragie digestive haute et état hémodynamique instable. La transfusion sanguine de CGR a été indiquée en urgence. Suite à cette transfusion, un incident transfusionnel grave a été déclaré.
Une enquête d’hémovigilance autour des deux cas a conclu que des dysfonctionnements majeurs du processus de vérification de l’identité des patients étaient la cause du décès du 1er cas par incompatibilité ABO et d’une hémolyse aigue grave pour le deuxième cas.
Discussion  Les erreurs d’identité des patients sont considérées comme la cause principale des incompatibilités ABO graves, ceci a été prouvé en transfusion sanguine. En effet ces erreurs transfusionnelles pourraient être évitées si une bonne conduite de contrôle d’identité est tenue correctement.
Conclusion  Gérer l’identité du patient et garantir son lien avec les différents éléments de son dossier médical sont les défis de la sécurité transfusionnelle.

 

Tableau 1. Répartition des résultats de la recherche des marqueurs sérologiques infectieux dans la population d’étude selon les Banques du Sang

Tableau 2. Notification des résultats de la qualification des dons et réalisation du prélèvement sanguin pour contrôle chez les DS

Nous rapportons ici un an d’utilisation de plasma de patients convalescents au SarS–Cov2 (PFC Covid-19) dans le cadre du Protocole d’Utilisation Thérapeutique (PUT). 

L’indication est validée au cours d’une RCP pour chaque patient. Par ailleurs, des PFC Covid-19 ont également été délivrés dans le cadre de l’essai clinique CORIMUNO CORIPLASM, avec un circuit d’obtention et d’accompagnement différent. Ce nouveau PSL a nécessité la formation des équipes médicales et paramédicales (titulaires et intérimaires) ES et EFS sur le plan organisationnel et sur le plan clinique: circuits, documents spécifiques de surveillance, débits adaptés à la pathologie respiratoire et cardiaque, rappel de compatibilité. 

Une centaine de réunions formelles et informelles a été effectuée dans 7 services cliniques ayant réalisé la transfusion des PFC Covid : 5 de médecine et 2 de réanimation.

40 patients ont été transfusés en isogroupe sauf 1 en AB soit 151 PFC PUT avec une posologie de 4 sur 2 jours, parfois 3 ou 4 sur 3 ou 4 jours.

24 avaient une pathologie hématologique, 5 une HTA, 5 une PR, 3 une SEP. Ils étaient âgés de 18 à 90 ans, 27 étaient des hommes, de différents groupes sanguins 17 O, 19 A et 4 B.

9 EIR modérés et 1 grave ont été déclarés: 5 troubles respiratoires (liés ou non à une surcharge avec 1 passage en réanimation), 4 allergies, 1 RFNH. Le taux de déclaration (6,6 pour 100 PFC) est 20 fois supérieur au taux habituel. Qui de l’interaction quotidienne de la correspondante hémovigilante avec les IDE et médecins, du rôle des PFC et/ou celui de la pathologie Covid sont à l’origine de cette augmentation, véritable mise en lumière de l’investissement et de la collaboration des équipes ?

Introduction La délivrance de CGR non phénotypés RHK augmente dans  notre ES pour les receveurs âgés (espérance de vie réduite, transfusion ponctuelle).  Peu de  RAI post-transfusionnelles sont prescrites (RAI PT < 5%). Nous avons colligé ces receveurs sur 10 mois pour  favoriser la RAI PT et évaluer le taux d’immunisation méconnu.
Méthodologie Du 1/03 au 31/12/19, les IDE du dépôt de sang ont tracé les patients avec au moins 1 CGR non phénotypé RHK. Le CHv et son suppléant ont favorisé la remise d’une ordonnance pour la RAI PT. En l’absence de RAI PT, recherche d’une RAI pré-transfusionnelle les mois suivants.  Nous avons retenu les RAI PT à au moins 28 jours de la transfusion.
Résultats 208 sur 382 transfusés en CGR non phénotypés RHK ont une RAI PT ≥ 28 j, effectuée en moyenne à 50 j (écart moyen 19 j).  Age moyen 81 ans (écart moyen 9), 50% d’hommes. Transfusions de CGR : 65% non phénotypés RHK sur 1 antigène, 29% sur 2 et 6% sur 3. Antigènes concernés : 113 K- ont eu du K+ (48% ≥ 2 Ag), 87 E- du E+ (65% ≥ 2 Ag), 49 c- du c+ (39% ≥ 2 Ag), 26 C- du C+ (50% ≥ 2 Ag), 9 e- du e+, 9 D- du D+ (55% ≥ 2 Ag). 5 patients (3 F 2 H) se sont immunisés (2.4%) : 1 anti K à J 67, 1 anti K à J 201 (RAI PT nég à J 41), 1 anti E à J 45, 1  anti K et  anti Lea à J 34 (RAI négativée à J 144), 1  anti DCE à J 37 puis anti Jka à J 63.
50 receveurs ont eu une RAI entre J7 et J27 (moyenne J18), toutes négatives.
Conclusions Le taux d’allo-immunisation est faible : 2.4%. L’apport de l’Ag D est rare avec 1 immunisation (11%). Plus de 50 % ont eu du K+, avec 2.6% d’immunisation.  Ces résultats  ne nous incitent pas à modifier nos pratiques de délivrance chez ces receveurs ni pour la RAI PT.
 

Introduction Le contrôle à réception du colis de PSL en station pneumatique PSL (SPPSL) reste une étape critique de l’acte transfusionnel et ne doit faire l’objet d’aucune dérogation. En 2020, 18128 attestations de demande de PSL ont été adressées à l’EFS.
Organisation L’agent missionné par l’unité de soins pour réceptionner la commande de PSL en SPPSL est muni d’une attestation composée  de 2 volets auto détachables : un volet glissé dans la cartouche rigide à destination de l’EFS. Le second, conservé par l’agent permet à réception de la cartouche avec le colis d’assurer les vérifications de conformité.                                
Méthode Durant 8 semaines en partenariat avec l’EFS, toutes les attestations de demande de remise de PSL non conformes (NC) ont été transmises à l’hémovigilance à J+1. Un courrier mentionnant les points critiques identifiés a été adressé aux cadres des services concernés.
Résultats 272 NC ont été recensées et 182 courriers envoyés (figure 1). Une attitude positive des unités de soins conventionnels émerge, témoin d’une réelle implication des cadres de santé. Les secteurs de soins intensifs n’infléchissent pas leur courbe de NC et portent en majorité sur l’identification de l’agent. Le travail en 12h  et la mobilité importante des soignants, accentuée par la situation sanitaire augmente le délai de rencontre avec les agents, contribuant à une réactivité allongée ou voir absente.
Conclusion Une évolution numérique permettrait de sécuriser cette étape qui reste fragile dépendante du facteur humain. Le blocage immédiat du  colis de PSL en  SPPSL avec alerte de l’EFS mettrait fin  à des dysfonctionnements potentiellement graves.
 

Figure 1 : Pourcentage de non-conformité (NC) relevées sur les attestations de remise des PSL rapporté au nombre de fiche de délivrance nominative (FDN) au cours des 8 semaines d’expérimentations

Contexte L’EFS a implémenté l’atténuation des agents pathogènes par le procédé INTERCEPT Blood System utilisant l'amotosalen et les UVA (IA) pour 100% des concentrés de plaquettes (CP) en novembre 2017. 4 à 11% des CP étaient traités IA auparavant. Nous avons comparé les taux d’évènements indésirables receveurs (EIR) et l’utilisation des CP -IA sur deux périodes successives à partir de 2010.
Méthodes Les données ont été extraites des rapports d'hémovigilance (HV) de l'ANSM pour la période 2010-19. Des tests t ont été effectués sur les 5 EIR les plus courants sur deux périodes distinctes de 5 ans (2010-14 [P1], 2015-19 [P2]). Les changements annuels ont été évalués par les tests du chi carré.
Résultats Les EIR  sont passés de 526 (2010) à 359 (2019) pour 100000 CP distribués et sont présentés par odre décroissant d’incidence dans le Tableau. Des augmentations annuelles significatives se sont produites pour l'allo-immunisation (2012) et les réactions fébriles non hémolytiques (RFNH) (2013) en P1. Aucune augmentation significative n'est survenue en P2. Des réductions significatives de l'incompatibilité immunologique et de l'allo-immunisation ont été observées en 2016-2017 et 2017-2018, respectivement. L'utilisation des CP et des concentrés de globules rouges (CGR) a augmenté de 17,8% et 3,1%, respectivement, de 2010 à 2019, mais la croissance annuelle moyenne a diminué pour les deux composants entre P1 et P2. Aucune infection bactérienne n'a été signalée pour les CP-IA.
Conclusion Les données nationales d’HV montrent une amélioration progressive de la sécurité des transfusions de plaquettes sur une période de 10 ans avec une continuité lors de l’adoption complète des CP-IA.

EIR les plus courants / 100000 CP transfusés et adoption des CP-IA, France, 2010-19

Le service de qualification biologique des dons à l'EFS Bretagne identifie un échantillon positif pour le virus de l’hépatite E (VHE). Le don incriminé a été prélevé le 30/09/2019 chez un donneur de 32 ans domicilié en Bretagne. Les produits issus de ce don encore en stock sont détruits ou réorientés. Deux concentrés plaquettaires ont été transfusés le 04/10/2019 chez deux patientes hospitalisées dans deux établissements de santé (ES).
Suite à l'information post don du 06/11/2019, des enquêtes d’hémovigilance sont menées dans les ES. La patiente 1, 69 ans, atteinte de myélome multiple, présente une virémie VHE positive à 4.95 log le 19/11/2019.La patiente 2, 53 ans, suivie pour un lymphome B présente une virémie positive à 3 ,77 log le 16/11/2019. Leur suivi biologique et clinique est mis en place en collaboration avec les cliniciens. La patiente 1 présente une augmentation des transaminases. Un traitement par ribavirine est instauré à compter du 05/02/2020. Elle décèdera peu après de son myélome. La patiente 2 ne présente aucune anomalie clinique ou biologique. Aucun traitement n’est institué. La charge virale est négative à partir du 15/04/2020 et la patiente est considérée comme guérie de l’infection à VHE. Les analyses réalisées par le Centre National de Référence VHE indiquent que les 2 patientes et le donneur sont tous les trois porteurs d’un virus de génotype 3 et l’analyse phylogénétique confirme l’identité des souches. Cela permet de conclure à une imputabilité certaine de la transfusion.
Ces deux cas illustrent le bon fonctionnement du réseau d’hémovigilance qui a permis de confirmer le caractère transfusionnel de deux cas d’hépatite E à partir d’un même don.

Les erreurs d’administration de CGR ABO incompatible sont sources de morbidité importante voire de mortalité. Ces incidents sont évitables par le respect des bonnes pratiques. En moyenne 5 incidents persistent chaque année, le dernier décès date de 2010. La France est un des rares pays à promouvoir l’intérêt du Contrôle Ultime de Compatibilité pour prévenir les transfusions ABO incompatibles. Dans notre étude, nous sommes interrogés sur l’intérêt de ce test.
Les 10 cas d’erreurs d’administration de CGR ABO incompatible déclarés sur e-FIT en 2019 et 2020 ont été analysés en évaluant les étapes du contrôle Ultime de Concordance et du contrôle Ultime de Compatibilité.
Dans les 10 incidents, le Contrôle Ultime de Concordance Patient-Prescription-PSL est incorrect principalement par une identité non vérifiée du receveur. D’autre part, le test du contrôle Ultime de Compatibilité n’a jamais stoppé la transfusion du CGR incompatible. En effet, même si la technique du test est retrouvée correcte dans 7 cas sur 10, l’interprétation reste erronée voire non réalisée.
Le Contrôle Ultime de Compatibilité devrait être le verrou de sécurité qui alerte et stoppe la transfusion du CGR incompatible. Cette étape a été inefficace. Dans tous les incidents le CGR a été transfusé. Ces éléments nous interrogent. La technique du test est-elle un poids psychologique tel, ou une fausse sécurité dispensant les équipes soignantes  des contrôles préalables comme la simple vérification de l’identité du receveur? Une analyse parallèle de presqu’incidents d’administration de CGR ABO incompatible stoppée par le Contrôle Ultime de Compatibilité nous permettrait d’évaluer le gain réel apporté par ce test.

La déclaration des effets indésirables chez les patients est une étape majeure de la surveillance transfusionnelle. La relation entre la quantité de produits sanguins labiles (PSL) transfusés et le nombre d’effets indésirables receveurs (EIR) qui en découle représente la clé de voute de l’évaluation du système déclaratif transfusionnel. Des résultats récents (Seuront-Scheffbuch & Seuront, 2018, Physica A, 505, 707–715) menés sur 12 établissements de soins de la région Picardie ont ainsi montré que le nombre d’EIR (NEIR) rapportés annuellement entre 2004 et 2015 évoluait comme une loi de puissance du nombre de PSL transfusés (NPSL), i.e. NEIR = a(NPSL)b avec b = 1.44 pour 10 de ces établissements et b = 1.11 pour deux d’entre eux. L’existence de ces lois de puissance indique un fonctionnement optimal du système d’hémovigilance, et implique une relative prédictibilité de la relation entre EIR et PSL. Il apparait également que l’exposant b présentait une variabilité interannuelle et que la loi de puissance pouvait ponctuellement prendre la forme d’une relation linéaire, i.e. b = 1, ce qui représente un indice fort de déficience du système, toute déviation à une loi de puissance étant symptomatique d’un dysfonctionnement. Dans ce cadre, sur la base de données observées entre 2016 et 2020, nous évaluerons d’une part la capacité prédictive des lois de puissance en confrontant statistiquement la relation obtenue entre 2004 et 2015 et celle observée entre 2016 et 2020, et d’autre part la nature de la variabilité temporelle des exposants b obtenus chaque année afin de tester une éventuelle récurrence des états fonctionnels ou dysfonctionnels du système d’hémovigilance. 

La déclaration des effets indésirables chez les patients est une étape essentielle de la surveillance transfusionnelle. La relation entre la quantité de produits sanguins labiles (PSL) transfusés et le nombre d’effets indésirables receveurs (EIR) qui en découle apparait ainsi comme la pierre angulaire de l’évaluation de la sécurité du processus transfusionnel. Dans ce cadre, deux indices complémentaires de la qualité du système transfusionnel sont (i) la présence d’une corrélation significative positive entre PSL et EIR (i.e. plus un établissement de soins transfuse, plus la probabilité d’occurrence d’un EIR augmente), et (ii) la significativité statistique de cette corrélation. Toutefois, nos observations de l’évolution temporelle des EIR et PSL sur 12 établissements de soins (ES) de la région Picarde montrent à la fois des corrélations, négatives et positives, entre PSL et EIR, tout comme leur absence totale. Sur la base de ces résultats nous proposerons une évaluation de la qualité des systèmes transfusionnel et déclaratif de ces ES permettant d’identifier et d’évaluer leur efficience, à l’aide d’indices statistiques, à la fois objectifs et quantitatifs. Nous proposerons également une approche statistique permettant d’évaluer au cours du temps de manière objective les efficiences relatives des systèmes transfusionnel et déclaratif d’un ES sur la base des statistiques déclaratives. Cette méthode permet en outre via l’identification des années où d’éventuels dysfonctionnements de ces systèmes conduisent à des sur -ou des sous-déclarations d’EIR de discuter l’origine de ces dysfonctionnements en termes d’efficience ou de déficience.

L’hyperhémolyse post-transfusionnelle retardée est une complication sévère chez les drépanocytaires transfusés et est associée à un taux non négligeable de mortalité. Malgré une meilleure compréhension de sa physiopathologie, elle reste souvent sous-diagnostiquée. Nous rapportons un cas de réaction hyperhémolytique post-transfusionnelle retardée à issue fatale et nous discutons les difficultés diagnostiques et thérapeutiques. 
Patiente âgée de 30 ans suivie depuis l’âge de 22 ans pour drépanocytose homozygote sans antécédents transfusionnels. Elle a subi un échange érythrocytaire par 4 CGR phénotypés, déleucocytés et compatibilisés pour une cholécystectomie.  Le taux d’hémoglobine (Hb) a augmenté de 8 à 10,6 g/dL en post-transfusionnel immédiat. A J5 post-transfusion : altération de l’état général, ictère cutanéo-muqueux, hémoglobinurie et anémie hémolytique (Hb : 4,7 g/dL). Deux autres CGR phénotypés ont été transfusés avec hausse transitoire de l’Hb puis chute rapide à 4,6 g/dL après 2 jours et apparition de douleurs des membres supérieurs et inférieurs. L’enquête immunohématologique a mis en évidence des autoanticorps sans alloanticorps masqué. La patiente a été mise sous corticothérapie avec éviction des transfusions. Elle est décédée 24h après dans un tableau de détresse respiratoire aiguë.
Plusieurs leçons sont tirées de cette observation. La prise en charge des drépanocytaires se doit d’être multidisciplinaire. Le suivi post-transfusionnel doit être rigoureux avec déclaration obligatoire de tout effet indésirable afin de ne pas passer à côté de cette complication et d’éviter le recours à une nouvelle transfusion.

Depuis la généralisation du sang phénotypé, l’allo-immunisation RH-KEL1 a drastiquement diminué. Nous rapportons et analysons le cas d’un alloanticorps anti-RH4 secondaire à une erreur transfusionnelle.
Patient âgé de 68 ans, polytransfusé pour une insuffisance rénale terminale depuis 2006. Il est suivi en orthopédie depuis 2019 pour chirurgie post-traumatique.  En janvier 2021, le patient a été transfusé par 2 CGR compatibilisés par test indirect à l’anti-globuline en tube. La recherche des agglutinines irrégulières (RAI) réalisée le lendemain sur le prélèvement pré-transfusionnel a montré un anti-RH4. Il n’a pas été noté d’effet indésirable post-transfusionnel. 
   L’enquête au laboratoire a montré :
- En pré-transfusionnel : groupage  O RH :1,2,-3,-4,5  KEL :-1
- En post-transfusionnel : double population avec l’anti-RH4 et RH2, RAI négative et test direct à l’anti-globuline positif avec un anti-RH4 à l’élution.
 - Deux cartes de groupes appartenant à deux patients homonymes datant de 2006 et 2019 ont été retrouvées dans le dossier du patient, avec deux dates de naissances différentes et deux phénotypes différents (RH :2,-4 et RH :-2,4).
    Ce cas pointe la défaillance de l’identitovigilance dans notre système transfusionnel. Les éléments de la sécurité transfusionnelle à renforcer sont : 1/ la vérification de la date de naissance au lit du patient, exigée par notre réglementation dans l’identification de l’échantillon prélevé mais rarement vérifiée à l’épreuve ultime 2/ la traçabilité informatique (DMI et dossier transfusionnel) et 3/ l’introduction d’une compatibilisation et/ou une RAI pré-transfusionnelle sur support en gel chez les polytransfusés

Dans le cadre de la pandémie COVID-19, des donneurs ont signalé à l’Etablissement de Transfusion Sanguine (ETS) après leur don de sang une infection par le SARS-CoV-2 ou le contact avec une personne infectée.
Lorsque les produits issus de ces dons ont été distribués ou délivrés par l’ETS, et que cette Information Post Don (IPD) doit être nécessairement connue de(s) l’établissement(s) destinataire(s), des prescripteurs, une Fiche d’Information Post Don (FIPD) doit être déclarée en hémovigilance (e-FIT).
En mars 2020, 2 nouveaux items «nature d’IPD» ont été créés dans e-FIT : «Coronavirus» et «Risque coronavirus (exposition)». Le premier item correspond au cas où le donneur (avec ou sans symptômes) est diagnostiqué positif au SARS-CoV-2. Le second item est sélectionné en cas de symptômes évocateurs chez le donneur mais sans confirmation biologique, ou de contact avec une personne infectée.
A ce jour, 147 FIPDs «Coronavirus» et 38 FIPDs «Risque Coronavirus» ont été déclarées dans e-FIT.
Sachant que pour les plaquettes, l’inactivation des pathogènes par Intercept® (amotosalen) est réputée performante sur les coronavirus (SARS-CoV et MERS-CoV) et que les plasmas ont été orientés vers la plasmathèque, les enquêtes descendantes d’hémovigilance ont principalement concerné les receveurs de CGR.
L’analyse des déclarations a apporté des informations sur : symptômes du donneur, délais entre le don et l’apparition de l’IPD, confirmation biologique ou non de l’infection, devenir des produits sanguins, résultat de la paillette du don pour le SARS-CoV-2, résultat des enquêtes menées chez des receveurs de CGR. Celles-ci n’ont pas mis en évidence de transmission transfusionnelle du SARS-CoV-2

Introduction La transfusion sanguine est une thérapeutique irremplaçable mais qui peut se compliquer d’effets indésirables variés. La fièvre est un symptôme, isolé ou associé, qui peut compliquer une transfusion.
Matériel et Méthodes L’analyse a porté sur toutes fiches mentionnant l’apparition d’une fièvre au cours ou au décours d’une transfusion.
Résultats Sur les 85 incidents transfusionnels recueillis sur 4 ans ,34 comportaient une fièvre (40%). La moyenne d’âge des patients était 48.6 ± 22.9 ans [6mois, 82 ans]. Le sex-ratio F/H=1,2. La moitié des accidents (N=18 ; 52.9%) étaient survenus dans les services de médecine (52,9%), suivis par les services de chirurgie et hématologie respectivement (41.1% et 5.8%). Les incidents de grade 1 étaient les plus fréquents (73,5 %) suivis par les incidents de grade 3 (8,8 %) et de grade 2 (5,8 %). La majorité des incidents transfusionnels comportant une  fièvre étaient des réactions fébriles non hémolytiques (23,53%) suivis par les réactions allergiques (8,82%). La fièvre était à l’origine de la découverte d’une allo-immunisation érythrocytaire chez 8,82% des patients par la réalisation systématique d’une RAI . Nous notons également 2 cas d’allo-immunisation HLA, un cas probable de TRALI, un cas de transfusion d’un CGR hémolysé et une infection bactérienne probable. L’enquête était négative dans 11,76% des cas et incomplète dans 26,47% des cas.
Conclusion La réaction fébrile non hémolytique demeure sous nos cieux l’étiologie la plus fréquente de fièvre compliquant la transfusion. La déleucocytation systématique des CGR permettra de réduire considérablement cette complication en Tunisie.

La prescription d’un CGR, rédigée par l’interne de garde, arrive pour une épistaxis majeure chez une patiente (FS) née en 1935 connue de groupe AB. Un bilan a été prélevé mais les résultats ne sont pas encore disponibles. L’interne de garde est de nouveau appelée, car l’état de la patiente est préoccupant. Celle-ci rédige une nouvelle prescription en UVI.
Cette « patiente » est hospitalisée pour isolement COVID dans une unité gériatrique peu habituée aux transfusions nocturnes depuis plusieurs semaines.
La technicienne en poste à l’EFS délivre, en urgence vitale conformément aux procédures EFS, en absence de document de groupage présenté, un CGR de groupe O. L’IDE qui ne dispose pas de document, réalise le CUPT mettant en évidence une patiente de groupe A et un CGR de groupe O. En raison de la compatibilité observée, le produit est transfusé.
L’EFS alerte sur la discordance de groupe ABO-RHKel1 entre le tube reçu et l’antériorité. Un nouveau prélèvement est demandé. L’IDE évoque alors une confusion de patiente, il s’agirait de Mme BG. Mais cette dernière est de groupe O ce qui n’est pas cohérent avec le CUPT.
L’IDE qui doit assurer un nouveau prélèvement pour l’EFS contrôle alors le bracelet et découvre qu’il s’agit de Mme MC, connue de groupe A. Le tube arrivera à l’EFS non étiqueté et sans date et heure de prélèvement sur la demande.
Nous analysons les dysfonctionnements successifs au sein de l’ES, sans conséquences pour la patiente sur le plan transfusionnel, puisque la procédure d’urgence vitale a permis d’éviter un accident transfusionnel grave. L’infirmier en état de stress n’a jamais vérifié l’identité de la patiente ni oralement  ni sur son bracelet.

Introduction Depuis fin 2018, en Normandie, les ES ont constaté, lors des délivrances de concentrés plaquettaires (CP) une augmentation de la proportion des MCP divisés. Ces nouvelles pratiques ont fait émerger plusieurs problèmes : traçabilité, augmentation de la charge de travail pour les soignants et de la fréquence de transfusion de CP, inadéquation de la quantité de principe actif (QPA) par rapport aux recommandations HAS. Nous avons souhaité quantifier ce dernier point.
Méthode Cinq établissements de santé ont participé à cette analyse pour l’année 2020. Le questionnaire comprenait les items suivants : poids des patients (>40 kg), nombre et type de CP transfusés (MCP ou CPA), QPA transfusée par rapport au poids du patient. Pour chaque patient, la QPA reçue était comparée à la QPA préconisée selon les recommandations HAS.
Résultats 404 patients transfusés par 926 CP dont 859 MCP, 786 délivrances dont 140 avec 2 MCP. La QPA est conforme aux recommandations pour 407 délivrances, supérieure à la borne haute pour 141 et inférieure à la borne basse pour 238 délivrances.
Ainsi, 30% des délivrances aboutissent à une transfusion sous-dosée en plaquettes, avec une proportion d’environ 50% pour les patients ayant un poids entre 60kg et 80kg.
En comparaison avec l’année 2018, certains ES ont pu montrer que le taux de délivrances sous-dosées avait considérablement augmenté, ainsi que le nombre de doubles transfusions.
Conclusion La mise en place sur les sites EFS de ces nouvelles pratiques de délivrance semble rendre plus difficile le respect des recommandations en termes de QPA pour les patients, tout en augmentant l’activité de délivrance à l’EFS et de transfusion dans les ES. 

Introduction L’analyse concerne les dons de sang total (DST) dont l’hémoglobine (Hb) mesurée en qualification biologique du don (QBD) est inférieure à 14 g/dL chez les hommes (H) et 13 g/dL chez les femmes (F). Certains DST ont fait l’objet d’un dosage pré-don de l’Hb capillaire (CAPI) conformément à la réglementation.
Méthode Les périodes étudiées portent sur 4 mois (un par trimestre) pour l’ensemble des données et sur l’année entière pour les DST avec une Hb QBD inférieure à 13g/dL chez les H et 12g/dL chez les F.
Résultats Les données quantitatives sont reportées dans le tableau 1. Les analyses statistiques porteront sur la répartition par ETS, par typologie de donneur (sexe, âge, donneur connu ou non), par phénotype Rhésus et Duffy, et sur l’impact du délai entre deux dons.
Conclusion Cette analyse est un état des lieux avant la mise en place de la prévention de la carence en fer par dosage de la ferritinémie. Elle permet d’estimer, dans ces populations, le pourcentage de donneurs qui seront concernés par le dosage de la ferritine, ce qui contribuera à prévenir les situations d’anémie et à diminuer les cas d’aggravation d’anémie.

tableau 1

Introduction, en Europe, la législation requiert que les signes vitaux soient enregistrés pendant les transfusions et les prélèvements de cellules souches par aphérèse.  Cela s'effectue avec des dispositifs médicaux non connectés . Il en résulte une charge de travail associée à un risque accru d’erreur de transcription. De plus le suivi est discontinu et dépend de la disponibilité du personnel. Nous avons testé l’utilisation de capteurs connectés UMANA® T1, C’est un dispositif médical connecté non invasif (Marqué CE en classe 2b). Il mesure en temps réel et simultanément, Température, TA, Pulsations, ECG dérivation D1, Fréquence respiratoire, SaO2 et détection de chute. Ces fonctions sont supportées par un patch Nano-Imprimé à usage unique épais de 50 microns. 
Matériel et méthodes, les capteurs sont connectés par Bluetooth à un smartphone lui-même relié à Internet par 4G/5G ou Wi-Fi. Les données sont transmises sur une plateforme Cloud. Cette plateforme permet aux professionnels visualiser les  paramètres. Et surtout un module « machine learning » surveille en permanence les données, détecte les anomalieset envoie alarmes et notifications. 
Résultat discussion, ce premier essai a montré que l’utilisation des capteurs est facile et bien acceptée.  L’accès aux données est permanent, Les algorithmes notifient les anomalies sans délai, et permettrait de prédire certains risques de manière anticipée. 
Conclusion, Cet essai continue intégré avec les logiciels de traçabilité et hémovigilance. Une série avec un effectif plus important sera nécessaire pour démontrer  la prédiction d’effets secondaires, et l’intérêt de surveiller en conditions ambulatoires ou pendant les transferts.

Le dispositif connecté UMANA T1(R)

Introduction Le système de santé mondial s’est confronté à une nouvelle maladie à coronavirus (COVID-19), qui s’est rapidement propagée dans le monde entier, entraînant sa déclaration par l'OMS en tant que pandémie en Mars 2020. Cette Pandémie a mis à rude épreuve, les pratiques et la sécurité transfusionnelle.
 L’objectif de ce travail est de soulever l’impact de la pandémie sur l’activité du don du sang, de démontrer l’importance du système d’Hémovigilance en tant que dispositif de veille sanitaire, enfin, de définir les perspectives d’avenir pour le développement du système d’hémovigilance au Maroc.
 Discussion Depuis l’apparition de la pandémie Sars-Cov2, les systèmes de sang vivaient un double challenge, d’une part, la pénurie de sang causée par le confinement et ses contraintes de mobilité et d’autre part, de nouvelles discussions sur la transmission du virus par transfusion sanguine ont émergé.
Les recommandations émanant des sociétés scientifiques, telles que (ECDC) et (AABB) ont incité les services de sang à renforcer leur vigilance et à adopter des mesures proactives pour assurer la sécurité des produits sanguins.
Afin de surmonter la possibilité d'avoir des dons de sang issus de donneurs asymptomatiques, l’OMS recommande la mise en place un système de recueil des informations post-don pour que les donneurs puissent signaler une maladie évocatrice de la COVID-19 ou un contact avec un cas confirmé.
Conclusion   L’Hémovigilance est un dispositif de veille sanitaire qui permet la compréhension des risques liés au sang et à ses constituants. Il permet aussi d’évaluer l’efficacité globale des mesures de sécurité prises dans les services de la transfusion sanguine.

Introduction La thrombopénie est observée au cours de 10% de grossesses et nécessite un diagnostic précis pour une prise en charge adaptée.Nous rapportons deux cas de femmes  enceintes ayant présenté une thrombopénie au cours de la grossesses avec la prise en charge thérapeutique qui leur a été accordée.
Observations Patiente 1 : 35ans admise aux urgences et hospitalisée au service de réanimation pour purpura pétéchial, gingivorragies, hématurie avec accident vasculaire cérébral hémorragique sur une grossesse estimée à terme.L’examen trouve un déficit moteur du membre supérieur droit avec   participation faciale.L’hémogramme objective une anémie à 5.4g/dl qui après transfusion par 02 culots de globules rouges est remontée à 8.9g/dl.Une thrombopénie est retrouvée à 1000 /mm3 pour laquelle la patiente a bénéficié de transfusion de 05 concentrées plaquettaires standards et corticothérapie sans amélioration.Elle a accouché par voie normale d’un nouveau-né bien portant, puis adressée au service de chirurgie pour splénectomie. Patiente 2 : 29 ans à 36 semaines d’aménorrhée hospitalisée au service de réanimation pour Pr-éclampsie, hypertension artérielle et thrombopénie autour de 108 000/mm3.La patiente est sortie après stabilisation hémodynamique avec un traitement à base de corticothérapie et anti hypertenseur.Quatre jours après elle est réadmise pour Pré-éclampsie et bénéficie d’une césarienne pour souffrance fœtale aigue au début du travail.Elle a accouché d’un nouveau-né à 1kg 800g.
Conclusion L’association thrombopénie et grossesse implique une prise en charge pluridisciplinaire adaptée à l’étiologie pour minimiser les risques materno- fœtaux dont le risque hémorragique.
 

Contexte Suite à l'adoption des concentrés de plaquettes (CP) atténués pour les agents pathogènes par le procédé INTERCEPT™ (CP-IA), l’AP-HM a évalué l'impact du changement sur les besoins en transfusion et sur la sécurité des patients.
 
Objectifs Comparer l'utilisation de CP et de concentré de globules rouges (CGR) et les événements indésirables receveurs (EIR) sur les patients adultes et pédiatriques en hématologie-oncologie au cours de 4 périodes, une avant et trois après introduction des CP-IA.
 
Méthodes Les données démographiques, les transfusions de CP, les besoins concomitants en CGR et les EIR ont été analysés sur 4 périodes : Janvier-Mars 2017 (pré-IA), Janvier-Mars 2018 (post-IA, CP traités par dispositifs pour simple dose, SV ou LV), Mai-Juillet 2019 (dispositif pour double dose, DS, également utilisé), Janvier-Mars 2020 (idem avec 16% des CP transfusés à jour 6 ou 7). Les CP sont produits à partir de mélanges (MCP-IA) ou par aphérèse (CPA-IA). Les comparaisons statistiques (ANOVA, test CMH ou test de Fisher) sont réalisées pour chaque période par rapport à 2020.
 
Résultats Table. Les consommations de CP et de CGR et la durée du support plaquettaire n’ont pas augmenté pour les périodes post-IA. Les EIR enregistrés sont rares. Le passage à 6-7 jours pour 16% des CP transfusés n’a pas eu d’impact significatif.
 
Conclusion Cette étude rétrospective sur 4 périodes pré et post-IA n'a pas montré d’augmentation de l'utilisation de CP ou de CGR ni d’augmentation des EIR. Les variations d’âge et de pathologies peuvent générer des différences entre les périodes mais la mise en place de l’atténuation des pathogènes n’a pas eu d’impact négatif sur les indicateurs suivis.

Consommation de CP au cours des différentes phases de l'étude

La drépanocytose est une hémoglobinopathie grave. Bien que le dysfonctionnement des globules rouges (GR) soit majeur, les polynucléaires neutrophiles (PNN) jouent un rôle important dans la physiopathologie de la maladie.  L'une des atteintes les plus graves de la drépanocytose est la vasculopathie cérébrale (VC). La mise en place d’échanges transfusionnels mensuels (ETM) permet de ralentir l’évolution de la VC, sans la guérir dans la majorité des cas. L'objectif est d'étudier l'impact des ETM sur les anomalies des PNN, afin de comprendre si la persistance d’une inflammation leucocytaire pourrait contribuer à la non-guérison de la VC malgré le maintien d’un taux d’HbS < 40% durant des années.
Les patients drépanocytaires non traités présentent une hyperleucocytose à PNN avec un phénotype inflammatoire et âgé par rapport aux témoins sains, caractérisé par une surexpression des intégrines CD18/CD11b et CD18/CD11a, un niveau plus élevé de PNN âgés circulants CD184 high/CD62Llow ainsi qu'un niveau plasmatique élevé d'élastase. Chez les patients en ETM, nous avons constaté une persistance de l’hyperleucocytose à PNN malgré une durée médiane d’ETM de 3.6 ans, une expression identique des intégrines, sélectines, et marqueurs de vieillissement des PNN, ainsi que des taux comparables d’élastase plasmatique, témoins d’un état inflammatoire chronique persistant. Enfin, des expériences d’adhérence en flux dynamique ont montré une adhérence accrue des PNN des patients, qu’ils soient en ETM ou non. Notre étude montre que le remplacement des GR drépanocytaires n'est pas suffisant pour inverser le phénotype pathologique des PNN, pouvant expliquer l'efficacité incomplète des ETM sur la VC.

L’émergence de SARS-CoV-2 a entraîné un afflux massif de patients à l’hôpital et particulièrement en réanimation créant de nombreux problèmes. L’un d’entre eux est la transfusion, tant du côté de l’EFS (sécurité, collecte et stocks) que du transfuseur (soins habituels et demande spécifique inconnue liée au COVID-19). Un des risques était la pénurie avec nécessité de planifier des restrictions transfusionnelles. Nous avons analysé en parallèle l’activité transfusionnelle dans un CHU ainsi que la collecte et la délivrance au niveau de l’EFS entre le 24/02 et le 31/05/2020 et les avons comparées aux données de 2019.
L’activité globale a baissé de 33% sur la période (arrêt des soins réglés hors urgence ou soins ne pouvant être différés et admissions de 2291 patients COVID-19) alors que la transfusion n’a été réduite que de 17%. 237 patients COVID-19 (10,3%) ont nécessité une transfusion, dont 45 pour hémorragie. Parallèlement, la baisse des dons a été contenue à 11% avec une discrète augmentation des stocks.
La diminution de l’activité ne se traduit que par une baisse modérée de l’activité transfusionnelle, celle-ci dépendant principalement de la chirurgie urgente, des syndromes hémorragiques et de la prise en charge des patients en aplasie chimio-induite ou ayant des pathologies hématologiques. Le confinement a entraîné une diminution des dons par suppression des collectes mobiles mais avec un impact limité sur une courte période par mobilisation des donneurs réguliers. Il n’a pas été observé d’inadéquation entre demande et suppléance et il n’a donc pas été nécessaire de mettre en place des restrictions.

Introduction : 
La transfusion sanguine requiert des protocoles, des procédures et un programme d’hémovigilance qui font défaut dans les pays en développement. L’objectif de cette étude était d’évaluer le niveau de connaissances du personnel de santé­­ en matière de pratique transfusionnelle. 
Matériels et Méthodes :
Il s’agissait d’une double étude évaluative des connaissances en matiére de pratique transfusionnelle avec une prospective évaluant les pratiques auprès du personnel (médical et paramédical ) et une rétrospective exploitant les commandes de produits sanguins labiles (PSL). 
Résultats :
L’évaluation des connaissances du personnel a montré avec un taux de participation de 64,3%, une absence de formation en matiére de transfusion chez 63,5% du personnel soignant. La phase pré-transfusionnelle portant sur les qualificatifs attribués aux PSL, leurs températures de conservation et le cross-matching a donné un taux de bonnes réponses (TBR) de 31,7 %; à la phase transfusionnelle les éléments à surveiller et accidents ou incidents pouvant survenir avec un TBR de 87,7%- 13,4%- 21,6%; enfin à  la phase post-transfusionnelle, la sécurité transfusionnelle-hémovigilance a donné un TBR de 21,1%- 12,4 % .  L’analyse rétrospective des commandes de PSL reçues a montré que 998 patients (60,2 % féminin ,avec une sex-ratio de 1,5) ont reçu 1058 PSL (867 concentrés de globules rouges, 3 concentrés plaquettaires, 188 plasma frais congelés) et 1495 du sang total (moyenne ± 3 poches/ malade). 
Conclusion :
Cette étude pointe la nécessité de cibler les lacunes pour définir des programmes d’actualisation et d’amélioration des connaissances en transfusion du personnel médical et paramédical.
 

Introduction La transfusion sanguine reste un des piliers de la prise en charge de la population drépanocytaire. Notre étude porte sur l’évaluation de l’adéquation des pratiques transfusionnelles chez les patients drépanocytaires pris en charge en Bourgogne Franche Comté face aux recommandations nationales sur la période 2000-2020.
Matériel et méthodes 256 patients drépanocytaires ont été inclus dans l’étude. Le recueil de données a permis de mettre en relation les caractéristiques des patients (âge, sexe, immunisation, phénotype étendu, variant) et des CGR transfusés avec les critères des recommandations (phénotypage étendu, génotypage, consignes transfusionnelles, score HPTR).
Résultats 50% de la population drépanocytaire suivie en BFC est transfusée et la répartition homme/femme est équilibrée. 19 patients sont allo-immunisés. 128 patients ont bénéficié d’un génotypage. 33 patients ont un variant. Le calcul rétrospectif du score HPTR dévoile un seul patient à haut risque de complications post-transfusionnelles. On note une importante modification des pratiques transfusionnelles liée à l’application des premières recommandations spécifiques aux patients drépanocytaires en 2014.
Discussion Notre étude montre un impact significatif du respect des recommandations successives sur la prise en charge transfusionnelle des patients drépanocytaires. Le faible taux d’immunisation et de survenue de complications post-transfusionnelles sur la période de l’étude le montre. 
Conclusion Cette étude permet une meilleure connaissance de la population drépanocytaire en BFC. L’adéquation des pratiques aux recommandations représente un facteur clé de sécurisation transfusionnelle.
 

Les patients présentant un état réfractaire aux transfusions de plaquettes ne sont pas rares dans les centres d’hématologie et représentent un défi afin de maintenir un taux de plaquettes permettant le tarissement de saignements ou la prévention de ceux-ci. Une option thérapeutique est la mise en place de transfusion continue (TC) correspondant à la transfusion lente (en 4 à 6h) de 3 ou 4 concentrés plaquettaires (CP) sur 24h.
L’objectif était, d’une part de vérifier l’absence de rendement plaquettaire, selon la définition de l’HAS, à 1h et 24h avant le passage en TC tout en étudiant les causes de cet état réfractaire et d’autre part, d’observer les résultats obtenus, biologiques et cliniques, de l’application de cette stratégie sur le suivi des numérations plaquettaires quotidiennes et les évènements cliniques hémorragiques.
Nous avons réalisé une étude rétrospective sur les patients du CHU de Liège. Ceux-ci ont été sélectionnés via une extraction de notre logiciel médicotechnique (Glims®) sur la période du 01/01/2019 au 31/12/2020 et les dossiers médicaux (Omnipro®) des patients ayant reçu au moins 3 CP par 24h ont été revus afin de sélectionner les patients ayant bénéficié d’une TC.
Au total, sur cette période, 13 patients ont bénéficié d’au moins un épisode de TC. Pour chaque patient, nous avons étudié les causes de l’état réfractaire via la recherche d’une immunisation anti-HLA ou anti-HPA, la présence d’un état septique, d’un saignement ou encore d’un hypersplénisme. Le nombre d’épisodes de TC, la numération plaquettaire, avant et pendant chaque période de TC et la survenue d’évènements hémorragiques ont été étudiés. Les résultats détaillés seront présentés.

Notre centre est équipé par un logiciel Hematos (MedInfo) permettant de gérer la traçabilité des donneurs, des dons et des produits sanguins labiles (PSL) et communicant de façon multidirectionnelle entre les différentes activités de la chaine transfusionnelle. L'informatisation a permis de révéler une variété d'anomalies dues à des erreurs humaines d'identification des donneurs ou de transcription. 
Notre but a été de relever et d'analyser les anomalies décelées par le système informatique au laboratoire de qualification immunohématologique des dons afin de mettre l'accent sur l’intérêt de l’informatisation dans le renforcement de la sécurité transfusionnelle.
Nous avons relevé les anomalies constatées lors de la saisie informatique des résultats de groupage ABO RH1 et du phénotypage RH-KEL1 des dons de sang.
Les anomalies constatées ont été soit des discordances entre les résultats du laboratoire et l'historique du donneur soit des discordances entre le laboratoire et le contrôle du groupage ABO RH1 à partir de la tubulure. Les causes de ces anomalies étaient : inversion des tubes lors du don, inversion des donneurs ou erreur de l’étiquetage des tubes et/ou des poches, erreur lors de la réalisation du groupage (ordre des tubes), une insuffisance technique.
L’informatisation joue un rôle d’un filtre de blocage. Elle permet de réduire les erreurs secondaires à l’intervention humaine. La formation continue du personnel permet de maîtriser ces lacunes dans un système basé majoritairement sur le don familial en cabine fixe généralement encombrée.

Introduction : les infirmiers et sages-femmes représentent un maillon essentiel dans la thérapeutique transfusionnelle. L’évaluation de leurs pratiques professionnelles dans le domaine transfusionnel est indispensable dans la démarche d’amélioration de la qualité et de la sécurité des soins. Notre étude a pour objectifs de décrire le niveau global des connaissances et des pratiques du personnel soignant en matière de sécurité transfusionnelle et d’étudier les facteurs qui leurs sont associés.
 Méthodologie: étude descriptive transversale conduite de janvier à février 2020. La population était constituée d’infirmiers et sage femmes recruté de façon aléatoire. Nous avons utilisé un questionnaire afin d’évaluer leurs connaissances. Deux critères de jugement ont été utilisés : le score de connaissances et de pratiques et les proportions de bonnes réponses.
 Résultats : sur un total de 40 personnels interviewé, nous avons identifié des dysfonctionnements sur les pratiques transfusionnelles chez l’ensemble de ce personnel paramédical. Les causes des dysfonctionnements ont été repérées et des actions pour améliorer les pratiques ont été proposées.
Conclusion : Au cours de ces enquêtes, des indicateurs ont montré l’existence d’écarts parfois majeurs par rapport à la réglementation établie et aux exigences de la sécurité transfusionnelle. L’information et la formation des infirmiers et sage femmes restent des facteurs déterminants face à l’erreur humaine considérée comme à l’origine de la plupart des défaillances.
 

Introduction La mise en place de fiches techniques répondant à des objectifs de rationalisation de l’utilisation des produits sanguins permet de répondre à un des piliers de PBM « patient Blood Management » et constitue une source consultable et une référence pour la consolidation des acquis
Matériel et méthodes Une fiche technique d’aide pour la prescription de produits sanguins labiles a été élaboré en se référant au manuel de procédure de gestion de sang et aux circulaires en vigueur. Cette fiche comprend quatre parties : identification de ressources, aide-mémoire pour les posologies, les indications et les transformations des différents produits sanguins. Cette fiche a été distribué et expliqué aux étudiants de médecine au cours de leur stage d’hématologie. L’évaluation de la fiche a été réalisé selon la méthode de Kirckpatrick
Résultats Dix-huit étudiants ont été inclus dans cette étude. Tous les étudiants à l’unanimité ont jugé bénéfique l’usage des fiches techniques. L’évaluation des connaissances théoriques était globalement satisfaisante, la médiane des notes était de 14 (IQ1-3 :14-18). La médiane des notes pratiques, avant la distribution des fiches, était de 10 (IQ 1-3 :8-12) et 16 (IQ 1-3 :15-17) en post formation. La différence était statistiquement significative (p< 10-3, IC 95% (-7.2—4.8).
Conclusion L’usage de fiches technique constitue un moyen d’acquisition et de consolidation de compétences théorique et pratique. La généralisation de l’usage de cette fiche a été recommandé par le comité local hospitalier d’hémovigilance et une évaluation à distance est nécessaire est nécessaire afin de réaliser des mises à jour nécessaire.

Introduction L’espérance de vie de patients suivis pour beta thalassémie majeure a été améliorée ces dernières années. Toutefois, l’apparition de complications thrombo-emboliques, alourdit leurs prises en charge. L’objectif cette étude était d’étudier le profil thromboembolique de patients adultes suivis pour beta thalassémie.
Matériel et méthodes Il s’agit d’une étude descriptive transversale menée sur 7 mois au service d’hématologie au CHU LA RABTA. Les données épidémiologiques, cliniques, et biologiques ont été relevées à partir des dossiers médicaux. Une hyperplaquettose était définie par un taux de plaquettes supérieur à 450.000/mm3.
Résultats L’âge moyen des 41 patients inclus était de 26.2 ans. Deux tiers (N=30 patients ;73,2%) étaient splénectomisés. Trois patients (7.3%) avaient présenté des accidents thromboemboliques (un AVC, une embolie pulmonaire, une thrombose porte). Le taux moyen de plaquettes était de 629.550 /mm3 (extrêmes allant de 102.640 à 1052.370). Parmi les 34 patients (82,9%) porteur de thrombocytose, 25 (73,5%) étaient splénectomisés et 3 (8,8%) ont présenté les complications thromboemboliques.  Une association statistiquement significative a été relevée entre hyperplaquettose et splénectomie (p<0,0001), de même elle était significative entre hyperplaquettose et accident thromboembolique (p<0,0001).
Conclusion Une surveillance est nécessaire pour les patients béta thalassémiques porteurs de thrombocytose liée à la splénectomie. Cette étude soutient l’existence d’une majoration de risque liée à la thrombocytose.
 

Introduction La bêta-thalassémie est une hémoglobinopathie fréquente dans le pourtour méditerranéen dont la Tunisie. Les patients thalassémiques sont exposés à nombreuses complications.  L’objectif de cette étude était de décrire les complications chez les patients adultes polytransfusés.
Matériel et méthodes Il s’agit d’une étude descriptive transversale menée sur 11 mois au service d’hématologie au CHU LA RABTA. Les données épidémiologiques, cliniques et biologiques ont été relevées à partir des dossiers médicaux des patients.
Résultats Quarante et un patients adultes ont été inclus. L’âge moyen était de 26.2 ans avec des extrêmes allant de 19 à 36 ans. Le genre ratio (H/F) était de 0.8. L’intervalle transfusionnel moyen était de 2.4 semaines, le taux moyen d’hémoglobine était de 8 g/dl (4.7 - 9.8). Le bilan immuno-hématologique a montré un taux d’allo-immunisation de 17% et d’auto-immunisation de 46%. Sous chélation martiale, le taux moyen de ferritinémie était de 2574 ng/ ml (95- 8720). Des complications à type de surcharge cardiaque étaient notifiés dans 8 cas (légère : 3 /modérée : 2 /sévère : 3) ; 36 cas de surcharge hépatique (10 légère ; 17 modérées et 9 sévère) et 26 complications endocriniennes. Aucun cas de séroconversion n’a été rapporté. Un seul cas de décès a été noté par complication cardiaque
Conclusion Les résultats de cette étude suggèrent que malgré l’amélioration de prise en charge des hémoglobinopathies ces dernières années la beta thalassémie reste encore un problème majeur de santé publique en Tunisie nécessitant surtout une bonne observance du traitement chélateur pour éviter les problèmes de surcharge en fer.

La transfusion in utero (TIU) constitue le principal traitement des anémies foetales. L’objectif  était de déterminer les indications de la TIU et évaluer le pronostic fœtal.
Il s’agit d’une étude rétrospective portant sur les cas de TIU [janvier 2018 -mai 2021]. Les données ont été collectées des dossiers Clinico-biologiques. Les patientes ont bénéficié : phénotypage érythrocytaire, recherche des agglutinines irrégulières (RAI) avec titrage par coombs indirect. Les TIU ont été réalisés  par des concentrés de globules rouges frais, déleucocytés, irradiés et compatibilisés avec le sérum de la mère.
Neuf  TIU ont été réalisées au cours de sept grossesses. L’âge maternel moyen était de 32 ans [24-38]. L’âge gestationnel moyen lors de la première TIU était de 24 SA [17- 33]. Les indications de la TIU étaient : infection à parvovirus B19 (1 cas) et allo-immunisation fœto-maternelle (6 cas). Une RAI était faite dans l’urgence chez toutes les patientes dont seulement deux avaient une RAI antérieure. Les allo-anticorps étaient : anti-RH1(1 cas), anti-RH1+anti-RH2 (1 cas), anti-RH1+anti-RH2+anti-MNS3 (2cas), anti-KEL1 (2 cas). Le titrage était fait dans quatre cas. Le titre de l’anti-RH1 variait de 256 à >2048. L’hémoglobine pré-transfusionnelle variait de 4 à 10,5 g/dl. Le pronostic était favorable dans un cas (parvovirus B19). Tous les autres cas étaient décédés par mort fœtale in utero.
L’allo immunisation fœto-maternelle constitue la principale indication de la TIU. En effet, celle-ci a amélioré le pronostic fœtal dans de nombreux pays. Néanmoins, le suivi immuno-hématologique régulier selon un calendrier national doit absolument être mis  en place dans notre pays. 

Alors que la déplasmatisation des greffons a permis de réduire la survenue d’hémolyse après greffe de CSH dans un contexte d’incompatibilité ABO mineure ; le Syndrome des Lymphocytes Passagers (SLP) reste une complication non prévisible survenant précocement après la greffe. Il correspond à une incompatibilité immunologique érythrocytaire liée à la réaction d’anticorps synthétisés par les lymphocytes du donneur contre les hématies du receveur.
Nous rapportons ici le cas d’un patient ayant présenté une hémolyse aigue en relation avec un SLP médié par 2 anticorps 10 jours post-greffe de CSH.
Monsieur M a bénéficié d’une greffe de CSH issues d’un donneur non apparenté. La greffe a été réalisée dans un contexte d’incompatibilité ABO mineure, le receveur et le donneur étaient respectivement de phénotype érythrocytaire B et O et de phénotypes RH KEL1 identiques.
Lors de la greffe, la RAE et l’EDA étaient négatifs chez le donneur et chez le receveur. Le titre des Ac immuns anti B chez le donneur était de 128. Le greffon n’a pas été déplasmatisé.
Le patient a été transféré en réanimation à J10 pour une anémie à 3.7 g/dl et un tableau clinique et biologique d’hémolyse sévère.
A J11, l’EDA était négatif ; à l’élution, 2 anticorps de spécificité anti-MNS1 et anti-B ont été mis en évidence. A J14, l’anticorps anti MNS1 a été retrouvé dans le plasma. Un génotypage du locus MNS1 a été réalisé sur les ADN du donneur et du receveur, le donneur étant MNS1 négatif et le receveur étant positif, cet anticorps a été attribué au donneur.
Ainsi le patient a présenté une hémolyse aigue induite par la présence d’Ac immuns anti-B de titre modéré et d’un néo anticorps hémolysant de spécificité anti-MNS1.

But de l’étude : définir le profil épidémio-clinique des patients atteints d’hémopathies malignes (HM) en phase palliative, quantifier leur besoin transfusionnel et préciser les indications transfusionnelles des concentrés de globules rouges (CGR) et des concentrés plaquettaires (CP).
Etude observationnelle rétrospective concernant tous les patients atteints d’HM en phase palliative et suivis pour une durée de 7 mois.
L’étude a concerné 24 patients d’âge médian de 63,5 ans (extrêmes: 5 - 91 ans) et de sex-ratio 2,4. Les HM étaient : LAM [n= 9 (37,5%)], SMD [n= 8 (33,3%)], LAL [n= 2 (8,3%)], MM [n=2 (8,3%)], AM [n= 2 (8,3%)] et LLC [n= 1 (4,2%)]. Les indications transfusionnelles ont été: syndrome anémique isolé dans 54% des cas (Hb : médiane à 6,8 g/dL, extrêmes : 5,3-9,2 g/dL) et associé à un syndrome hémorragique dans 29% des cas, syndrome hémorragique isolé dans 17 % des cas (Taux de plaquettes: médiane à 7 500/mm3 ; extrêmes: 3500 -20 000/mm3). Un total de 350 CGR phénotypés compatibilisés et de 592 CP ont été transfusés. La moyenne des épisodes transfusionnels était de 9,5 (extrêmes:3 - 20). La médiane de la consommation des CGR et des CP par patient était respectivement de 3,6 CGR et 10 CP.
Peu d’études se sont intéressées à l’estimation des besoins transfusionnels palliatifs lesquels constituent un lourd fardeau autant pour les patients que pour les établissements transfusionnels.

La transfusion de Concentrés de Granulocytes (CG) est indiquée chez des patients en aplasie profonde présentant une infection sévère non contrôlée. Deux produits sont disponibles : le Concentré de Granulocytes d’Aphérèse (CGA) monodonneur, et le Mélange de Concentrés de Granulocytes de Sang total (MCGST) issu de 20 donneurs.
Nous rapportons le cas d’un patient d’hématologie (HCL), qui présentait une indication de transfusion de CG : leucémie aigüe de diagnostic récent avec cellulite de la marge anale associée à une neutropénie fébrile. Mais le patient était connu avec un antécédent d’anticorps irréguliers de spécificité anti-Jka, alors que les CG contiennent une quantité importante d’hématies résiduelles (hématocrite entre 5% et 25%). La déserythocytation du CGA est une technique maitrisée par certaines équipes de prélèvement, mais le contexte sanitaire lié à la pandémie de COVID-19 contre-indiquait les prélèvements de CGA. Il fut donc nécessaire trouver une alternative thérapeutique. L’EFS AuRA a sollicité les tutelles dans le but de préparer et de transfuser un MCGST déserythocyté et a obtenu une « non opposition » à cette préparation.
La déserythrocyation a été réalisée par l’équipe de la Banque de Tissus et de Cellules de l’EFS AuRA selon la technologie de sédimentation sur Plasmion®, utilisée en routine pour la déserythocytation des greffons de moelle osseuse ABO incompatibles. Huit MCGST désérythrocyés ( hématocrite à 1%) ont été transfusés au patient permettant une évolution favorable de la cellulite et son drainage chirurgical, sans réactivation de l’anti-Jka (RAE négative) et sans hémolyse. Le patient a ainsi pu bénéficier de la cure d’induction de son hémopathie.

 

L’incompatibilité ABO n’est pas un obstacle à la greffe de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH), qui peut se faire en situation ABO identique, en incompatible majeure (le receveur a des anticorps [Ac] ABO dirigés contre le greffon), ou en incompatibilité mineure (le greffon a des Ac ABO dirigés contre le receveur).
Nous avons étudié sur un an  la prise érythrocytaire du greffon dans les greffes de CSH en situation d’incompatibilité ABO  mineure, sur le site EFS de LYS. Nous avons observé plusieurs cas de persistance des Antigènes ABO du receveur à la surface des hématies du greffon, alors que le chimérisme HLA mettait en évidence une prise de greffe à 100%. Au groupage sanguin, on observe une agglutination faible avec l’anti-A ou avec l’anti-A+B alors que le patient est devenu de groupe O.
Nous formulons l’hypothèse que cette situation est liée à l’adsorption passive des Ag ABO solubles qui continuent à être produits par les cellules sécrétrices (non hématopoïétiques) du receveur, sur les hématies de groupe O produites par le greffon.
La détermination du phénotype Lewis des patients, qui permet dans certains cas de déterminer le statut sécréteur des patients, est en faveur de cette hypothèse.
 

IntroductionL’anémie est décrite comme facteur de mauvais pronostic de l’infarctus du myocarde et la transfusion doit être prudente dans ce contexte. Nous rapportons le cas d’une patiente de 57 ans, admise pour un syndrome coronarien aigue associé à une anémie sévère dont l’issue était fatale. 
ObservationPatiente admise aux urgences pour douleur thoracique aigue.Son examen objective un mauvais état général avec ictère cutanéomuqueux généralisé.L’Electrocardiogramme montre un sus décalage ST et la troponine revient positive.La patiente mise en condition avec suivi de la cinétique de la troponine toutes les 6h.L’hémogramme montre une anémie à 5,6 g/dl régénérative.La LDH augmentée, la Bilirubine  totale et non conjuguée augmentées et l'Haptoglobine est effondrée.Elle fut  hospitalisée et une demande de sang  envoyée au centre de transfusion.On identifie un groupe sanguin A+CCeeKnég et une RAI positive.Le service averti pour préparation de sang compatible mais son médecin insiste sur l’urgence de la transfusion.Trois poches sont  livrées.La numération  de controle montre une hémoglobine  à 11 g/dl avec macrocytose.Après deux jours l'hémoglobine est à 3,5 g/dl avec macrocytose.Une autre demande de sang arrive  au centre de transfusion mentionnant une dyspnée et une altération de l’état général avec hémoglobine à 3g/dl .La RAI très positive  et le  test de coombs  très positif avec IgG et C3d.Le test direct de compatibilité positif avec toutes les poches isogroupes isophénotypes et avec des poches dépourvues des antigènes C et e.Entre temps la malade décède.
ConclusionL’association anémie SCA augmente l’incidence de la mortalité hospitalière à la phase aiguë de l’infarctus. 
 

IntroductionAu cours des pandémies,il faut  maintenir des services appropriés pour les populations vivantes avec maladies chroniques.
ObservationPatiente bêta-thalassémique vivante à Al Hoceima ,suivie à Rabat et connue avec anti-Jka et anti-S.Programmée le 23 mars 2020 pour une transfusion mais ne pouvant s’y rendre à cause de l'interdiction des déplacements inter-villes instaurée le 21 Mars par les autorités marocaines.Elle présente une anémie avec hémoglobine à 5,8 g / dl.Le CNTSH organise sa prise en charge transfusionnelle à Al Hoceima et elle fut transfusée le 25 Mars avec deux CGR préparés par le Centre de Transfusion d'Oujda et livrés par le Centre de Transfusion d'Al Hoceima.Le 06 avril,la NFS rapporte  un taux d'hémoglobine à 6,2 g/dl.Après  intervention du CNTSH,la patiente fut transfusée par 03 CGR préparés par le Centre de Transfusion d'Oujda et délivrés par le Centre de Transfusion d'Al Hoceima.Le 28 avril devant une anémie à 5,9 g / dl avec suspicion d'inefficacité transfusionnelle,le CNTSH contacte la responsable du service pédiatrique du CHU d'Oujda pour évaluation et prise en charge.Elle fut hospitalisée et mise sous corticothérapie.Le génotypage érythrocytaire réalisé au Centre de Transfusion de Rabat révèle qu'elle est Fya-.Le Centre de Transfusion d'Oujda prépare des CGR compatibles et elle fut transfusée avec 04 CGR Jka-, S- et Fya- avec bonne évolution clinico-biologique.Depuis,elle est suivie à Oujda selon un protocole bien établi.
ConclusionPendant les pandémies,les systèmes de santé doivent mettre en place des programmes appropriés pour assurer la continuité des soins aux patients souffrant de maladies chroniques telles que les hémoglobinopathies.
 

Introduction Dans cette étude nous avons voulu décrire les caractéristiques des patients transfusés en plaquettes aux urgences. Méthode Etude observationnelle rétrospective, dans 12 services d'urgence. Tous les patients transfusés en plaquettes en janvier et février 2018 ont été inclus. Résultats Nous avons inclus 86 patients dont l'âge médian était de 71 [56-78] ans. Trente-neuf (45,3%) patients étaient adressés par un professionnel de santé (laboratoire, onco-hématologue, EHPAD, médecin traitant). Une pathologie onco-hématologique sous-jacente était connue chez 69 patients (80,2%), et 29 (35,8%) étaient transfusés régulièrement. Un traitement entrainant un risque hémorragique était retrouvé chez 24 (27,9%) patients. Il existait un syndrome hémorragique à l’admission chez 42 (48.8%) patients, dont les localisations les plus fréquentes était ORL pour 16 patients (38,1%), digestive pour 9 patients (20,2%) et cutanée pour 7 (16,6%) d’entre eux. Le nombre de plaquettes avant transfusion était de 12 000 [9 750–18 500]/mm3, et ce nombre variait peu selon qu’il y avait ou non un syndrome hémorragique. Le rendement transfusionnel était de 18 000 [8750-23000] plaquettes/mm3. Quarante (46,5%) patients ont également reçu une transfusion de culots globulaires (CG). Un seul effet indésirable receveur a été constaté durant l’étude (œdème aigu du poumon) chez un patient également transfusé en CG. Conclusion La transfusion de plaquette aux urgences est un évènement rare. Les patients transfusés sont essentiellement suivis pour une pathologie onco-hématologique. Le nombre de plaquettes avant transfusion est en accord avec les recommandations de la Haute Autorité de Santé.

IntroductionLa pandémie COVID-19 peut compromettre les activités transfusionnelles.Les établissements de transfusion doivent préparer des plans appropriés pour faire face à cette pandémie.
Expérience du CNTSHDepuis Janvier 2020, le CNTSH suit en continu  les publications sur le SARS-CoV-2 et a mis en place les mesures suivantes :
Le renforcement du dispositif de veille scientifique et épidémiologique.
La régulation interrégionale à travers la mise en place d’un comité de suivi journalier du stock national en PSL.
Le renforcement des activités du don de sang travers la programmation des collectes dans le respect strict des mesures préconisées par les autorités marocaines et l’approvisionnement continu en réactifs et équipements critiques.
La mise en place de mesures de protection des donneurs et du personnel vis à vis du SARS-CoV-2.
Le renforcement de l’information post don et la mise en quarantaine du Plasma produit par les CRTS pendant 28 jours.
Le renforcement d’hémovigilance receveur en collaboration avec les services de soin.
Le renforcement de la communication interne et externe. 
L’accompagnement du Ministère de la Santé pour la réalisation d’une enquête Nationale de séroprévalence du SARS-CoV-2 chez les donneurs sang et pour la réalisation de la stratégie du Ministère de la Santé pour la sérosurveillance de la COVID-19 chez les donneurs de sang.
La non introduction de technique de dépistage pour le SARS-CoV-2. 
ConclusionLe CNTSH chargé de la politique du ministère de la santé en transfusion sanguine , a exprimé une réactivité continue depuis le début de la pandémie COVID-19 pour assurer  la disponibilité et la sécurité des produits sanguins au cours de cette crise sanitaire.

Au Mali, 12% de la population est porteuse du gène HbS dans sa forme hétérozygote et on estime que chaque année 5000 à 6000 naissances sont concernées par la drépanocytose*.
Depuis 2009, MSF soutient un projet médico-nutritionnel pour les enfants de moins de 5 ans au sein de l’hôpital de Koutiala, à l’Est du Mali composé d’une unité d’hospitalisation de 245 lits, d’une banque de sang et d’un laboratoire de microbiologie.Le dépistage de l’HbS est réalisé chez tous les enfants se présentant avec des signes évocateurs d’une drépanocytose grâce à un test rapide +/- un test de falciformation.La transfusion des enfants drépanocytaires est réalisée avec des CGR pédiatriques non déleucocytés compatibles ABO D et avec une épreuve de compatibilité au laboratoire (EDCL) simplifiée sur plaque et à température ambiante.
Les standards transfusionnels internationaux recommandent la transfusion de CGR phénotypés RHK (ou étendu si RAI +) et compatibilisés par un test indirect à l’antiglobuline (TIA) et un suivi régulier de la RAI. A Koutiala, il n’est pas possible à ce jour de suivre ces standards. De plus, la fréquence de l’alloimmunisation semble faible (4,4%)**.
MSF souhaite faire évoluer ses standards transfusionnels et le plan d’action pour Koutiala vise à développer le don volontaire, à implémenter l’ EDCL en TIA, et à mettre en place une collaboration avec les structures transfusionnelles régionales.
* Diallo DA et al. La drépanopanocytose en Afrique...Bul Acad Nat Med.2008 ; 192(7) 1361-73
**Diarra AB et al. Sécurité transfusionnelle et drépanocytose à Bamako, Mali...TCB 20 (2013) 476–481

Contexte En mars 2020, l’épidémie de la COVID19 a remis en cause les organisations de l’Etablissement Français du Sang suite à l’arrêt des collectes en entreprise et dans les établissements d’enseignement.  A cette date, il était difficile d’affirmer que la propagation du virus n’allait pas affecter l’approvisionnement des Etablissements de Santé. Pour suivre les évolutions de l’épidémie et ses éventuels effets sur la production de produits sanguins labiles (PSL), des cartes hebdomadaires ont été réalisées. Méthode : La cellule géomatique de l’EFS a réalisé un suivi des taux d’hospitalisations par département (données de Santé Publique France) qu’elle a croisé avec les résultats des prélèvements en collecte mobile en commune (cf carte) et en site fixe. Résultats ces représentations ont permis de constater que la propagation du virus n’a pas eu de retentissement direct et majeur sur la fréquentation des lieux de prélèvement notamment dans les zones à forte prévalence et aussi de conforter des choix organisationnels. Les baisses de stocks de PSL observées ont été liées aux annulations de collecte et au déconfinement du mois de mai 2020 qui comprenait 4 jours fériés. Lors de la mise en place sécuritaire des rendez-vous en collecte mobile à partir d’une application numérique, les cartographies ont présenté une vision synthétique par bassin de collecte des effets modérés de ce changement sur le nombre de dons. Conclusion les observations de la fréquentation des collectes dans le contexte épidémique témoignent de l’implication des donneurs et des associations bénévoles ainsi que du professionnalisme et des capacités d’adaptation des équipes de l’EFS au plus fort de la crise.
 

Taux d'hospitalisations liés à la COVID-19 et résultats des collectes semaine 13 2020

Introduction : La satisfaction des besoins en produits sanguins en Côte d’Ivoire demeure un constant défit. Les prélèvements annuels ne suffisent pas pour les besoins des hôpitaux. Afin d’accroitre le nombre de dons de sang, le CNTS a opté pour l’installation de plusieurs structures transfusionnelles sur l’ensemble du territoire, mais aussi pour l’utilisation d’équipes mobiles. Plusieurs sites de collecte de sang sont ainsi parcourus soit une fois soit deux à trois fois par an, devenant ainsi des sites de prélèvements réguliers de sang. Toutefois, de nombreuses anomalies sont souvent observées sur ces sites mobiles. L’objectif est de faire un point des anomalies rencontrées sur ces sites mobiles. Méthodologie : Etude prospective descriptive et comparative entre collectes mobiles et fixes aussi bien pour les dons réguliers que pour les dons fixes du 01 janvier au 29 Fevrier 2020. Données extraistes dans le logiciel médico-technique progesa. Résultats : Pour les donneurs réguliers sur site mobile, nous avons noté un taux élevé des marqueurs viraux positifs répétitifs chez ces derniers. Conclusion : Les nouveaux donneurs sont moins surs en terme de marqueurs viraux pour les dons de sang, toutefois, la non utilisation de logiciel de gestion des donneurs de sang pour ressortir les exclus pour marqueur viral positif constitue un risque de toujours prélever ces derniers ; d’où la nécessité de faire l’édition des donneurs interdits avant tout passage sur un site mobile régulier.

L’alloimmunisation anti érythrocytaire post-transfusionnelle due à une différence antigénique incompatible entre le donneur et le receveur est responsable des hémolyses érythrocytaires qui altèrent le pronostic vital du receveur. Sa survenue est accrue par le polymorphisme interethnique ou racial des systèmes sanguins érythrocytaires. L’homogénéité ethnique ou raciale est l’une des mesures de sécurité pour prévenir cette alloimmunisation surtout chez le drépanocytaire qui est généralement polytransfusé. Une revue a été conduite de mars 2018 à décembre 2020, à partir des publications dans PubMed, CrossRef, ResearchGate ; Google Scholar sur l’alloimmunisation anti érythrocytaire post-transfusionnelle chez le drépanocytaire et dans un contexte de population homogène. Elle visait à relever la fréquence des alloimmunisations, la spécificité des anticorps anti érythrocytaires, les facteurs de risque associés chez le drépanocytaire et à évaluer les politiques de transfusion sanguine. Les 12 articles sélectionnés ont regroupé 2367 drépanocytaires dont 309 étaient alloimmunisés. L’alloimmunisation anti-érythrocytaire variait de 2,9 à 43,95% avec une prédominance des anticorps anti Rhésus. L’homogénéité raciale ou ethnique est d’un apport indéniable dans la sécurité transfusionnelle immunologique chez le drépanocytaire. Elle devrait être associée aux stratégies de phénocompatibilité. L’existence d’alloanticorps inattendus malgré la phénocompatibilité relève l’importance de connaître les variants des systèmes sanguins chez le drépanocytaire et les différentes races ou ethnies.
Mots clés : alloimmunisation anti-érythrocytaire, Drépanocytaire, population d’ethnie ou race homogène.
 

Contexte- Les cellules souches mésenchymateuses (CSM) associées à des biomatériaux peuvent induire la reconstruction de grandes fractures osseuses. Une précédente étude a montré qu’un milieu de culture supplémenté avec des lysats plaquettaires humains (LP) pouvait potentialiser in vitro la croissance des CSM et in vivo la néoformation osseuse. Toutefois, sur 8 lots de LP sélectionnés capables d’induire la croissance des CSM, 1 lot s’est révélé inefficace pour la néoformation osseuse. L’objectif de cette étude a été de rechercher dans ces LP, les protéines cibles pouvant expliquer l’absence de néoformation osseuse.
Méthodes- Une analyse protéomique qualitative par spectrométrie de masse (HPLC-MS/MS Q-TOF) a été réalisée. Nous avons comparé l’échantillon du lot inefficace (Echantillon A) versus un échantillon d’un pool contrôle, formé des 7 lots de lysats fonctionnels (Pool I). Les outils Proteome Discoverer v.1.4 et PRCApp (application interne créée afin de simplifier la recherche de protéines ciblées) ont été utilisés afin d’identifier les protéines cibles.
Résultats- Cette analyse a révélé la présence de protéines particulièrement impliquées dans la régulation ostéogénique (formation osseuse et répression ostéogénique) ainsi que dans la répression angiogénique, uniquement dans le Pool I.
Conclusion- La capacité que présentent les LP à induire une néoformation osseuse varie en fonction des donneurs. Cette capacité semble dépendre de la présence de certaines protéines cibles impliquées dans l’ostéogénèse et/ou l’angiogénèse et l’absence de ces protéines pourrait contribuer à expliquer la non-fonctionnalité de l’échantillon à problème.

Des effets indésirables receveurs (EIR), peuvent apparaître après transfusion de concentrés plaquettaires (CP) chez des patients. Le temps de stockage des CP peut influencer leurs apparitions. Nous avons comparé le transcriptome plaquettaire de CP stockés pendant 2 jours (J2) et pendant 4 jours (J4), transfusés et ayant induit un EIR. Le but étant de mettre en  évidence les gènes potentiellement impliqués dans l’apparition d’EIR.
Nous avons comparé 2 EIR/Témoins (TCP) pour J2 et 2 EIR/TCP pour J4. Les données transcriptomiques ont été générées par séquençage via Ion Proton™. Les fichiers bruts ont été pré-traités avec le logiciel Partek Flow®. L’analyse différentielle des gènes et leur interprétation ont été réalisées avec TranSCApp (application interne), utilisant les bases de données Gene Ontology, KEGG pathaways et STRING db.
À J2, 373 gènes DE ont été identifiés, 168 gènes sous-exprimés et 205 sur-exprimés, qui semblent impliquer une sous-régulation de la voie de signalisation ribosomale et une sur-régulation de l’activation cellulaire : plaquettaire et immunitaire. À J4, 79 gènes DE ont été identifiés, 40 sous-exprimés et 39 sur-exprimés, impliqués notamment dans la machinerie transcriptionnelle et traductionnelle, ainsi que la voie de signalisation ribosomale principalement enrichie.
À J2, les plaquettes semblent maintenir leurs fonctions essentielles (hémostase et réponse immunitaire), contrairement à J4. Ceci pourrait s’expliquer par la dégradation des ARNm, due en partie à la dérégulation des protéines ribosomales (RPL et RPS). Ces observations renforcent l’idée des lésions de stockage.
 

Des effets indésirables receveurs (EIR) peuvent apparaître après transfusion de mélanges de concentrés plaquettaires (MCP). L’apparition d’un EIR pourrait-elle être associée à la dégradation des plaquettes durant leur stockage ? Pour ceci, nous avons analysé le protéome du culot (C) et du surnageant (S) de MCP stockés pendant 2 jours (J2) et pendant 4 jours (J4) respectivement, transfusés et associés à un EIR.

Nous avons comparé 2 S/C de MCP J2 et 2 S/C de MCP J4. L’analyse protéomique (label free LC-MS/MS) a été réalisée via le logiciel Proteome Discoverer 2.4. Les outils STRING db, KEGG pathway et IPA® ont été utilisés pour déterminer l’enrichissement des voies de signalisation. Des protéines d’intérêt identifiées ont été recherchées par Western Blot.

A J2, 423 protéines différentiellement exprimées (DE) ont été identifiées dans C et 94 dans S. A J4, 129 protéines DE ont été identifiées dans C et 43 dans S. Des protéines anti-apoptotiques (ENO1 et ILK), ont été retrouvées dans S, sous-exprimées à J2 et sur-exprimées à J4. ILK est aussi liée à l’organisation des jonctions cellulaires et au cytosquelette d’actine. Par ailleurs SRC qui a été retrouvée sous-exprimée dans S à J2, est impliquée dans l’organisation des jonctions cellulaires, mais aussi dans l’activité mitochondriale et l’apoptose. DYNC1/2, liée au cytosquelette, était sur-exprimée dans C à J4.

La différence du nombre de protéines DE entre J2 et J4 pourrait s’expliquer par leur dégradation progressive, ce qui pourrait aussi impacter l’intégrité des plaquettes et la qualité des CP. De plus, les protéines anti-apoptotiques sur-exprimées dans S à J4 évoque une libération après apoptose des plaquettes.

Lors de notre travail sur l’expansion ex vivo des cellules hématopoïétiques du sang placentaire, nous avons remarqué que la fonctionnalité des progéniteurs engagés et des cellules souches n’est pas maintenue au-delà de six heures à +4°C si les cellules sont resuspendues dans la solution d’albumine (4%), ce qui est la préparation routinière des greffons. Ce problème est complètement résolu si les cellules sont resuspendues dans un milieu de culture de nouvelle génération. Ceci permet le maintien des capacités fonctionnelles du greffon au moins jusqu’à 48 heures (Duchez et al, Cell Transplant, 2013). Cette approche peut encore mieux assurer le maintien d’un greffon non manipulé, car les cellules amplifiées ex vivo sont particulièrement vulnérables et sensibles à l’hypothermie.
Malheureusement, l’utilisation du milieu de culture n’est pas une option, car un lavage de cellules s’impose, ce qui implique l’interruption du circuit clos et une manipulation dans le centre greffeur, en raison du fait que le milieu de culture n’est pas injectable. Afin de résoudre ce problème, nous avons conçu une solution de conservation ayant une capacité comparable au milieu de culture, mais composée de produits injectables référencés dans le Vidal. Nous sommes arrivés à une solution de douze produits permettant, en proportion définie, de maintenir la capacité du greffon concernant le contenu des progéniteurs engagés (CFC) et des cellules souches hématopoïétiques (SRC). Cet effet est garanti pendant 24 heures à +4°C pour les cellules du sang placentaire après expansion et jusqu’à 5 jours pour les cellules d’un produit de cytaphérèse non manipulé. Cette solution fait l’objet l’un brevet.

Face à la pandémie, il a fallu réagir de façon rapide et coordonnée ; mettre en place des régulations ; optimiser les liens public-privé. Le « contact-tracing » (CT), nous a amener à utiliser l’application SI-DEP (système d’information national de dépistage populationnel). SIDEP permet une collecte en temps réel, exhaustive et immédiate des résultats virologiques émanant des laboratoires publics et privés (LBM), hospitaliers et de ville. SIDEP a été porté par le Ministère des Solidarités et de la Santé, l’APHP (hébergeur), et accompagné par des éditeurs nationaux. Les LBM ont accès au portail (serveur de résultats/patients et professionnels) qui permet une réutilisation des données, un suivi épidémiologique national, un accès aux résultats de tests en temps réel aux équipes du CT. En amont, les flux de données partent des LBM, via les systèmes de gestion / d’information des LBM, puis sont concentrés au niveau du « Cyberlab national SI-DEP » (technologie H’, HL7*). En aval, SI-DEP est utilisé pour des enquêtes sanitaires de niveau 1,2 et 3 et donc par médecins traitants (MT), assurance maladie, ARS et Santé Publique France. Le patient a accès au résultat par le portail web Cyberlab, le compte-rendu est envoyé au MT par messagerie sécurisée. La sécurité et la protection des données sont garanties par RGPD. Développé en quelques semaines, cela démontre que, grâce à l’implication forte de tous les acteurs, rien n’est impossible. Le déploiement d’un tel outil (erigeant une base nationale indépendante de données IH accessible en temps réel à tous les professionnels de santé) optimiserait la sécurité transfusionnelle des patients et le suivi immuno-hématologique des parturientes

Quand le malheur ne serait bon Qu’à mettre un sot à la raison, Toujours serait-ce à juste cause Qu’on le dit bon à quelque chose. Jean de La Fontaine, Le Mulet se vantant de sa généalogie, Fables

L’hémolyse est une caractéristique essentielle de la drépanocytose (SCD) et reste peu étudiée dans la bêta-thalassémie. En excès vis-à-vis des systèmes de défense, l’hémolyse induit un stress oxydatif et des processus d’inflammation causant un dérèglement de la fonction endothéliale et une perte d’intégrité de nombreux organes. La mesure précise de biomarqueurs de l’hémolyse est nécessaire pour assurer un suivi de l’état stationnaire des patients, durant une crise hémolytique ou pour évaluer l’efficacité d’une transfusion sanguine. Nous avons développé une méthode analytique basée sur les propriétés d’absorption de la lumière par le plasma afin de mesurer les biomarqueurs de l’hémolyse à savoir l’hémoglobine (HbO2, HbCO et oxydée), l’hème lié à l’albumine et à l’hémopexine (Hx), ainsi que la bilirubine totale.
 
Les niveaux d’Hb libre plasmatique sont statistiquement (p=0.001) plus élevés chez les patients hétérozygotes SCD (médiane 6.3 µM [3.4-11]) comparés aux bêta-thals (2.6 µM [1-5.4]) et les volontaires sains (1.7 µM [0.5-3]). Les niveaux d’hème plasmatique sont plus élevés chez les patients bêta-thal que chez les SCD (p=0.0001) 10.5 µM [3.5-24] vs 1 µM [0.05-3] (≤ 0.2 µM HV). Une corrélation négative est mesurée entre les niveaux d’hème et d’Hx pour les deux cohortes (p<0.0001; r=0.85). L’hémolyse intra-vasculaire est plus prononcée chez les SCD par rapport aux bêta-thals. A l’inverse l’hème mesuré dans les bêta-thals pourrait refléter l’inefficacité de l’érythropoïèse combinée à une voie d'exportation de l’hème cellulaire ou après phagocytose par les macrophages impliquant la clairance de l’hème via l’Hx. Enfin le DHTR associe une forte présence d’Hb et d’hème.
 

Des transfusions sanguines récurrentes sont indiquées dans de nombreuses pathologies du globule rouge. Dans ce contexte, la nécessité de réaliser des analyses sur les hématies se heurte à la présence de globules rouges (GR) de donneurs dans la circulation. En l’absence de tests à l’échelle unicellulaire, les résultats sont alors sous-estimés car ils reflètent une moyenne de la population totale. Nous avons mis au point une méthode de tri cellulaire permettant d’isoler les GR d’un patient transfusé afin de pouvoir les analyser en s’affranchissant des GR de donneurs.
Le protocole transfusionnel d’un patient atteint de drépanocytose été adapté afin d’obtenir une différence antigénique entre les propres GR du patient (RhD+) et les GR des donneurs (RhD-). Ce protocole est déjà appliqué dans 40% des cas de manière aléatoire, en fonction des ressources disponibles. Cette différence phénotypique permet le tri magnétique positif des GR du patient avec une pureté supérieure à 95% (vérifiée par cytométrie en flux). Les propriétés biologiques des GR triés ont ensuite été analysées et comparées aux résultats obtenus sur les GR totaux. La population de GR triés montre des niveaux de stress oxydatif plus élevés que ceux observés sur GR totaux. La courbe d’association de l’oxygène montre un profil similaire à celui observé pour des patients non transfusés atteints de drépanocytose.
Nos résultats montrent qu’une adaptation du phénotype des poches transfusées permet un tri et une analyse des propriétés biologiques des GR d’un patient transfusé. Ce tri représente un outil important en médecine personnalisée dans le but d’évaluer l’efficacité d’un traitement ou de préciser un diagnostic.
 

La drépanocytose est une maladie héréditaire dans laquelle les globules rouges (GR) ont un variant de l'hémoglobine (Hb), appelé HbS, ayant la capacité de polymériser sous l'effet de la désoxygénation. La seule option curative est la greffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) allogéniques. Cependant, celle-ci est confrontée à des défis tels que le manque relatif de donneurs compatibles et les risques de maladie du greffon contre l'hôte. C'est pourquoi la thérapie génique est une alternative prometteuse. Elle consiste en une modification génétique des CSH autologues pour exprimer dans les GR une Hb anti-polymérisante, comme l'Hb fœtale (HbF), pour inhiber la polymérisation de l'HbS. Pour cela, l'HbF doit être exprimée en quantité suffisante par GR.
Nous avons développé une nouvelle méthode permettant la quantification précise de l'HbF dans des GR individualisés (HbF/GR). Comme preuve de concept nous avons analysé la distribution en HbF dans des GR de patients avant et après 6 mois de traitement par hydroxyurée, un inducteur de la synthèse d'HbF. L'analyse de l'HbF/GR a révélé une diminution entre J0 et ≥M6 de 16% des GR contenant moins de 2 pg et une augmentation de 71% des GR contenant entre 2 et 4 pg d’HbF. Nous avons aussi observé une association entre l'incidence des crises occlusives sur 3 ans et le pourcentage de GR contenant au moins 4 pg d'HbF.
Nos résultats indiquent que le pourcentage de GR au-dessus d'un seuil protecteur d'HbF est le paramètre important à mesurer dans la drépanocytose. Nous montrons également que cette méthode est un outil pertinent pour évaluer l'efficacité des stratégies de thérapie génique visant à induire l'expression de l'HbF.

L'infection par le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) est une maladie chronique qui peut être traitée par des traitements antirétroviraux (ARV). Cependant, le succès de ces traitements a été compromis par l'émergence croissante d'infections au VIH résistantes aux ARV notamment dans les pays à ressources limitées. La détection de ces mutations avant traitement aux ARV permettrait d’améliorer la prise en charge des patients.
Nous présentons une étude de preuve de concept d'un test moléculaire rapide et simple pour détecter deux mutations majeures (K103N, Y181C) conférant une résistance aux traitements antirétroviraux de première ligne comportant un inhibiteur non nucléosidique de la transcriptase inverse (INNTI). Notre test de diagnostic combine une amplification moléculaire des génomes viraux, une étape d’extension d'amorce spécifique des mutations et une migration sur bandelette permettant de détecter visuellement des mutations de résistance aux traitements du VIH (DRM).  Le test, réalisé en 4h30, a une limite de détection de 100 copies d’ADN plasmidique par réaction et une sensibilité supérieure au séquençage standard de type Sanger. La performance analytique a été évaluée à l'aide de 16 échantillons de plasma provenant d'individus vivant avec le VIH-1 et les résultats ont démontré la pertinence de cette approche pour la détection multiplexée des deux DRM en un seul test.
Ce test évitant le recours au séquençage pourrait être facilement adapté pour la détection de nouvelles DRMs en vue d’un dépistage pré-thérapeutique. Cette approche diagnostique originale ouvre de nouvelles possibilités d’applications en infectiologie.

Analyses des différentes méthodes de biotinylation après 2 et 7 jours post-don (n=3).

Les globules rouges (GR) peuvent servir de transporteurs d’agents thérapeutiques afin d’améliorer leur pharmacocinétique et leur pharmacodynamique. Afin d'évaluer l'impact de la plateforme ERYCAPS® (encapsulation par dialyse hypotonique) sur la physiologie des GR, plusieurs paramètres ont été comparés entre eryaspase (asparaginase encapsulée dans les GR), des GR traités sans ajout de médicament et des GR non traités.
Le processus d'encapsulation n'affecte pas le profil protéomique global des GR ainsi que leur morphologie de manière irréversible.  L’encapsulation entraine une réduction des métabolites dans les GR mais la voie de la glycolyse reste active tandis que la voie des pentoses phosphates est activée. Bien que restant dans des valeurs physiologiques, l’exposition de phosphatidylsérine à la surface des GR augmente alors qu'aucune différence du taux de CD47 n’est observée. D'autres changements sont observés tels que:  une diminution du volume globulaire moyen et du contenu en protéines, une légère augmentation de l'hémolyse et une diminution de la fragilité osmotique. La déformabilité maximale des GR est atteinte à une osmolalité plus faible et est légèrement inférieure aux GR non traités. Cependant, aucune rétention mécanique n'est observée pour tous les échantillons et la demi-vie des GR est similaire dans un modèle de souris.
Le processus d'encapsulation entraîne des changements modérés qui ne semblent pas avoir d'impact sur l'utilisation des GR comme vecteurs de médicaments. Il est intéressant de noter que dans l'étude clinique de phase 1 d’eryaspase, la demi-vie terminale de l'asparaginase était d'environ 21 jours, près de 15 fois plus que les formes libres.

Les vésicules extracellulaires (EV) sont des composants actifs présents dans les concentrés de globules rouges (CGR) qui peuvent être associées aux effets bénéfiques ou indésirables de la transfusion. Elles comprennent les microvésicules, qui proviennent du bourgeonnement de la membrane plasmique et les exosomes, qui proviennent du système endosomal. Les EV constituent un système communication et d'échange intercellulaire impliqué dans de nombreux processus biologiques par le transfert d’Acides nucléiques (ADN, ARN, microARN…), de protéines intracytoplasmiques ou membranaires, de lipides ou de métabolites. Elles font partie des composants des CGR et sont donc transfusées.
Les EV mesurent de 190nm au début du stockage de CGR à 180nm après 3 semaines. Elles sont davantage présentes au cours du stockage, avec une variabilité très élevée selon le donneur. L’analyse des microARN transférés par les EV montre que ces régulateurs de l’expression des gènes pourraient interférer avec l’érythropoïèse, la myélopoïèse, le cycle cellulaire et la différenciation. Certains sont identifiés pour jouer un rôle dans la leucémogénèse et le renouvellement cellulaire. In vivo dans les souris humanisées reconstituant l’hématopoïèse de patient atteint de syndrome myélodysplasique (SMD), les EV atteignent très rapidement les organes hématopoïétiques dont la moelle osseuse, une partie se concentre dans la vessie, le foie, la rate et les poumons, mais plus étonnant certaines EV atteignent le cerveau. In vitro les cellules souches hématopoïétiques normales placées en condition de différenciation Erythroïde subissent un décalage de leur maturation et sont moins vite différenciées.

Le groupe sanguin Lutheran (LU), aux antigènes principaux Lua et Lub, est codé par BCAM (molécule d'adhésion basale cellulaire). Les protéines Lu/BCAM ont des propriétés d'adhésion et de médiation de la signalisation intracellulaire. Les hématies des drépanocytaires ont des niveaux élevés de Lua et Lub ce qui pourrait participer à la vaso-occlusion via l’adhérence des hématies falciformes à la chaîne α-5 de la laminine. 
Lu/BCAM est composé d’un peptide signal, clivé, de 5 domaines de types immunoglobuline (D1 à D5) extracellulaires, d’un unique segment transmembranaire (TM) qui sert à sa dimérisation, et d’un domaine intracellulaire court, fortement désordonné. Dans un précédent travail, nous avions caractérisé la dimérisation et l’orientation du segment transmembranaire (El Nemer et al, J Biol Chem, 2019). Ici, nous proposons un modèle 3D entier du Lu/BCAM.
D1 et D2 sont disponibles, cristallisées (Protein DataBank 2PET). La modélisation de D4 et D5 s’est basée sur la structure de CD146 (pdb 6LYN) et celle de D3 sur la neurotrimine (pdb 6DLF). Le segment TM a été construit à l’aide d’un segment TM compatible. La partie intracellulaire a été générée par le logiciel RaptorX. 
Chaque région a été réalignée avec son support et comparée aux prédictions de structures secondaires. Des contraintes ont été ajoutées pour les ponts disulfures et la topologie des boucles connectantes, la plupart ne disposant pas de support structural. La multiplication des étapes de raffinage et d’analyse permet de proposer un modèle final de qualité (voir Figure 1). Celui-ci permet d’observer les différents antigènes du groupe sanguin Lu, révélant que les résidus impliqués sont exposés.

Figure 1. Visualisation du modèle structural du LUBCAM.

Le stockage des concentrés érythrocytaires déleucocytés (CED) est limité à 42 jours suite à l’apparition de lésions dont la perte de membrane par libération de vésicules extracellulaires (VEs). Ces VEs affectent la survie et la fonction des érythrocytes et augmentent le risque d’effets secondaires posttransfusionnels. Comprendre la mécanistique sous-jacente à la vésiculation est donc indispensable afin d’améliorer la conservation des CED. De plus, l’utilisation des VEs comme contrôle de qualité est actuellement impossible dû au manque de standardisation et d’optimisation des protocoles dédiés à leur isolement et analyse. Sur des CED stockés de 2 à 63 jours, nous avons montré que, quel que soit le protocole d’isolation (centrifugation à des vitesses et durées différentes), la taille des VEs est identique mais le nombre de VEs libérées par érythrocyte varie. De plus, pour chaque protocole, le taux de vésiculation au même temps de stockage diffère fortement entre les CED. Etonnamment, nous n’avons pas détecté d’augmentation du stress oxydatif sous forme d’espèces réactives de l’oxygène ou de méthémoglobine. Par contre, le nombre de domaines membranaires enrichis en cholestérol a tendance à diminuer, ceux enrichis en sphingomyéline à augmenter et le réseau de spectrine à devenir moins dense, trois altérations qui varient en fonction du taux de vésiculation et du CED. Prochainement, nous étudierons (i) les facteurs à la base de la variabilité inter-protocoles (caractérisation approfondie du matériel isolé), (ii) ceux à la base de la variabilité inter-CED (influence des caractéristiques des donneurs) ainsi que (iii) le mécanisme derrière l’altération des domaines lipidiques.

La détermination de certains antigènes érythrocytaires reste dans certain cas problématique. En effet, malgré les efforts pour obtenir une couverture complète du phénotypage élargi en réactifs performants, plusieurs spécificités sont restreintes à des classes d’anticorps incompatibles avec une sécurité transfusionnelle totale. Par exemple, l'antigène Duffy A (FY1) est un antigène majeur qui induit des anticorps provoquant une réaction hémolytique post-transfusionnelle. Pour le phénotypage erythrocytaire, en particulier dans les cas d'urgence avec un examen direct à l’antiglobuline positif, l'isotype IgM est particulièrement utile dans la formulation d'un test rapide de groupage sanguin en technique saline. Malheureusement, aucun mAb IgM anti-FY1 humain n'est disponible pour développer un tel réactif.
Pour apporter une solution à ce problème, les séquences codantes pour les régions variables des chaînes légère et lourde d'un hétéro-hybridome humain anti-FY1 ont été clonées, puis insérées dans un vecteur bi-cistronique d'expression. Les surnageants de culture de cellules transfectées avec cette construction ont été testés en cytométrie pour mettre en évidence la présence d'anticorps fonctionnels. Une lignée stable a été par la suite établie afin de produire en masse cet anticorps monoclonal recombinant humain anti-FY1, et permettre sa caractérisation.
L'anticorps généré permet une agglutination des hématies homozygotes et hétérozygotes FY1 avec des performances moyenne de 3+ /8 / 32 en technique tube. Une formulation est actuellement en cours pour mettre à disposition des laboratoires un réactif permettant d'identifier rapidement le phénotype des hématies.

L’utilisation des anticorps monoclonaux a révolutionné la fabrication de réactifs d’hématologie. Des anticorps sont disponibles pour la plupart des antigènes sanguins, cependant l’isotype de la chaîne lourde des immunoglobulines restreint leur application en tant que réactif. Pour lever cette limitation et valoriser un patrimoine existant, la modification d’hybridomes établis sécréteurs d’IgG humaines a été réalisée à l’aide des outils CRISPR Cas9 pour l’obtention d’anticorps de type IgM.

Trois hétéro-hybridomes humains sécréteur d’anticorps anti-FY1, -KEL1 et MNS3 ont été co-transfectés avec un complexe gRNA-Cas9 et un ADN donneur double brin contenant le gène codant pour la chaîne mu des immunoglobulines. Après sélection des clones modifiés par clonage, les surnageants de culture ont été analysés par cytométrie afin d’isoler les clones ayant intégrés la cassette d’intérêt.La stabilité des clones obtenus, ainsi que leurs utilisations pour la fabrication de réactifs d’immuno-hématologie est actuellement en cours. Cependant, l’utilisation d’outils CRISPR pour la modification d’hybridome, en particulier le « rétro-switch », a été validé dans cette étude. D’autres modifications permettant d’améliorer des clones existants sont à l’étude et devrait permettre d’enrichir la source de matières premières disponible pour les industriels du domaine du diagnostic.

Le renforcement de la sécurité transfusionnelle ne peut se concevoir sans une amélioration de la formation des tous les intervenants dans la chaine transfusionnelle. Cette formation se doit d’être active, plus interactive et plus diversifiée. Dans une perspective d’approche par compétence, nous avons intégré de nouveaux outils pédagogiques visant à mettre les apprenants en situation de résolution de problèmes et destinés pour la formation pré- et post-graduée et multi-professionnelle. Il s’agit de :
1- Un jeu sérieux: jeu de cartes original pour l’apprentissage des règles de compatibilité transfusionnelle ABO et RH1. Ce jeu, peu coûteux, a été expérimenté auprès des étudiants de médecine et du personnel paramédical et a été fortement apprécié.
2- La chambre des erreurs transfusionnelles modifiée: conçue sous forme d’un scénario hybride combinant une chambre des erreurs et un jeu de rôle entre un médecin et une infirmière. Outre les bonnes pratiques de transfusion sanguine, les objectifs incluent la prise de conscience de la notion de responsabilité médicale en matière de transfusion sanguine.
3- Des jeux de rôles faisant intervenir les médecins des banques du sang et les médecins prescripteurs et ayant pour objectif de maîtriser les pratiques de gestion du stock des PSL et une meilleure communication interprofessionnelle.

Ces formations ont été assurées par des formateurs en simulation et ont été suivies par un débriefing favorisant la pratique réflexive. L’évaluation de ces formations a fait ressortir un impact positif sur l’apprentissage et qui contribuera certainement à une meilleure organisation de l’activité transfusionnelle et une plus grande sécurité transfusionnelle.

Nous avons montré que la concentration physiologique en oxygène (O2) (<5%) augmente l’amplification des progéniteurs érythrocytaires. Récemment, il a été montré que la basse concentration en O2 via la stabilisation de facteurs de transcription induits par l’hypoxie (HIFs) intervient avec la signalisation de Notch dans la régulation de la différenciation cellulaire.  De même, l’activation de Notch a un rôle important dans la régulation de la prolifération des progéniteurs érythrocytaires. Ainsi, nous testons ici l’hypothèse selon laquelle les effets favorables de la concentration en O2 (3%) sur l’amplification des progéniteurs érythrocytaires implique une coopération entre HIFs et les composants de la voie Notch. Pour cela, des cellules CD34+ de sang placentaire transduites par des shHIF1 et shHIF2 sont mises en érythropoïèse précoce ex vivo à 3%O2, et 20%O2 en présence ou absence de l’inhibiteur de la voie Notch. Les résultats obtenus révèlent une augmentation significative de l’expression de gène HES à 3%O2 qui est dépendante de l’expression des facteurs HIF. De plus, une inhibition de l’expression HIF/HES (notamment HIF2) mène à une diminution de l’expansion des progéniteurs et de la différenciation (expression de marqueurs CD71/GlycophorineA). En revanche l’inhibition de la signalisation Notch au niveau de la gamme sécrétase ne produit pas d’effets significatifs dans l’érythropoïèse précoce. En conclusion, cette étude montre que la coopération entre les facteurs HIFs et la voie Notch au niveau de la transcription de gène HES mais pas au niveau de l’activation de la signalisation a un rôle critique pour l’expansion et maturation des progéniteurs érythrocytaires.
 
 
 

 
 
 

Favoriser l’apprentissage des étapes de l’acte transfusionnel par le personnel soignant est un enjeu majeur pour la sécurité transfusionnelle. La transfusion reste un acte complexe nécessitant une collaboration inter professionnelle et une bonne appropriation des procédures institutionnelles en vigueur.
Le Centre de Transfusion de Monaco a mis en place une formation pour les établissements de soins sous forme d’ateliers pratiques. Cette formation a également vocation à favoriser les échanges entre les professionnels. Les documents théoriques sont envoyés 15 j avant la formation aux personnes inscrites pour une prise de connaissance.  La séance de formation débute par un temps de questions/réponses puis les participants sont répartis pour la réalisation de 3 ateliers pratiques : le premier basé sur la simulation d’une transfusion de plasma, le deuxième correspond à la recherche d’erreurs sur une scène d’incident transfusionnel et enfin un troisième atelier de laboratoire IH permet la réalisation d’une carte de contrôle ultime ainsi qu’un phénotypage ABO-D en technique manuelle. Une évaluation des connaissances clôture la cession de formation avec le recueil simultané de la satisfaction des participants.
Cette formation a pu être proposée entre septembre et décembre 2020 pour 99 infirmières des services de soins, par groupe de 12 personnes environ. La séance a une durée globale de 2h afin de pouvoir libérer facilement les agents en poste. Le retour des participants est très positif avec confirmation de l’aspect très ludique de ce format pédagogique.

Introduction Le site de Clermont Ferrand accueille jusqu’à 40 donneurs de plasma par jour. En 2019, le taux de pertes in process plasma (PIPP) était de 4,9%, plus élevé que la moyenne régionale (3,7%). L’objectif de cette étude consistait à identifier et comprendre les causes d’interruption de procédure.
Déroulement de l’étude L’étude s’est déroulée du 13 mai 2019 au 13 mai 2020. Les 15 infirmiers de l’équipe étaient impliqués.
Résultats 6512 prélèvements ont été relevés. L’hématome est la première cause d’échec de procédure. Nous n’avons pas observé de lien évident entre les PIPP, l’état de fatigue du préleveur et le poste occupé. Une baisse des PIPP est observée le mois suivant l’annonce de l’étude.
Conclusion  Aucun lien n’a été révélé entre les causes de PIPP et les conditions de prélèvement. On constate cependant une baisse des pertes le mois suivant l’annonce du projet. Cela montre que l’intérêt porté à l’équipe a eu un impact positif : c’est l’effet Hawthorne. Lorsque le préleveur est associé à l’objectif de l’étude, son implication est bien supérieure aux seuls effets des conditions matérielles du travail.
Le préleveur reproduit les mêmes gestes avec la même rigueur jusqu’à 20 fois par jour. Cette exigence et la multiplication des étapes de procédure ne laissent que peu de place à l’interprétation et aux initiatives pouvant aboutir à la baisse de l’engagement et de la performance au travail.
Conscient de ces risques, l’EFS propose à l’infirmier la possibilité de diversifier ses activités. Cette étude a mis en lumière l’infirmier, éveillant notre curiosité sur l’importance du facteur humain au sein de l’établissement.

Conclusion Cette vision transversale est complémentaire des suivis d’activité réalisés par les responsables de processus. Le déploiement de la RQP doit être simple pour faciliter l’adhésion de tous. Au-delà de l’analyse des données médicotechniques s’ouvrent des réflexions plus stratégiques sur la multiplicité des filières, l’harmonisation nationale des pratiques et la maitrise de la qualité dont la RQP constitue un élément clé.
 

Bilan RQP 2020

A l’ANTS, la gestion et le traitement des poches de sang contaminé restent et demeurent un problème de santé publique.L’objectif est de contribuer à une meilleure connaissance  technique de traitement et de gestion des poches de sang contaminé dans les structures transfusionnelles du Bénin.La méthodologie est basée sur une enquête de terrain réalisée auprès de 183 agentsdans les six antennes et les analyses microbiologiques de l’eau de fosse et prélèvements des deux faces des poches ciblées.L’analyse des résultats est faite par modèle PEIR et Matrice adaptée de Léopold1971.Les germes isolés sont:Candida spp+Staphylococcus spp 4,3%Staphylococcus spp + Enterococcus spp 3,9%Staphylococcus spp+Bacillus spp5,5%Staphylococcus aureus+Enterococcus spp17,5%, Enterococcus spp+Bacillus spp 0,5%Staphylococcus spp 16,5%Bacillus spp 4,8%Candida spp 2,8%Escherichia coli 0,9%Klebsiella spp+Staphylococcus spp 8,7% et les agents des salmonelloses pour l’eau de la fosse réceptacle.la plupart de ces germes constituent les causes des infections nosocomiales graves.Le niveau de connaissance technique du personnel et l’environnement de travail sont les facteurs de problématique de gestion et de traitement des poches de sang contaminé.Les activités de gestion et de traitement des poches contaminées engendrent des impacts négatifs sur les milieux biologiques et humains.Ces impacts négatifs exposent le personnel  et le voisinage à un fort risque de dégradation sanitaire.Il urge donc que tous les acteurs à divers niveaux soient impliqués dans la mise en œuvre des stratégies proposées afin de protéger la santé humaine et l’environnement. Mots clés: Bénin;ANTS;mode de gestion;sang contaminé;Impact
 

Cette méthode réalisée sur le site de St Antoine (distribution/délivrance) a pour but de réduire la quantité de protéines extracellulaires en dessous de 0,5 g par produit.
 
Il y a un risque de perte de rendement post-transfusionnel et une diminution  la durée de conservation à 6 heures (réalisation en système ouvert).
L’indication est validée par le service de délivrance dont dépend  le patient.
 
Le produit transformé doit répondre  à la liste des caractéristiques des PSL (décision du 1er avril 2019).
 
Le choix du produit initial prend en  compte de la perte de QPA possible, de la QPA souhaitée, de la fraicheur et du volume du produit.
 
Cinq étapes  techniques sont nécessaires, à température ambiante: un lavage, une centrifugation, une extraction du surnageant, une remise en suspension en solution de conservation avec connexion stérile puis une phase de repos.
 
Un contrôle final de conformité du produit (QPA finale) est effectué par  numération sur échantillon.
Un Contrôle Qualité (CQ) est réalisé suivant un plan d’échantillonnage annuel établi en fonction de la production N-1.
Un suivi d’indicateurs qualités est mis en place : suivi des réclamations clients, des produits non conformes, des produits détruits, perte de QPA supérieure à 25%.
 
Le but de cette validation est de s’assurer de la conformité des CP déplasmatisés, des étapes de réalisation, des CQ.
 
La méthode a été validée en 2019, suivie en 2020.
Elle permet une délivrance du produit en situation non urgente.
Les résultats obtenus des CQ sont conformes aux résultats attendus.
On note un taux de 44% de floculats en 2020, uniquement 2 CP détruits (QPA non conforme). Aucune réclamation client n’a été enregistrée.
 

Depuis 2016, le laboratoire de contrôle qualité de l’EFS Nouvelle Aquitaine organise des campagnes d’évaluation externe de la qualité portant sur le contrôle microbiologique des produits de thérapie cellulaire et des milieux cornéens. Ces campagnes s’adressent à l’ensemble du réseau Contrôle qualité des Unités d’ingénierie tissulaire et cellulaire de l’EFS et permettent de compléter l’évaluation des performances analytiques de chaque méthode en utilisant des germes préconisés par la Pharmacopée et des germes détectés comme contaminants des produits contrôlés
Afin d’être représentatifs des produits contrôlés, les échantillons sont constitués d’un milieu d’organoculture pour les greffons cornéens et d’une matrice cellulaire préparée à partir de cellules nucléées pour les produits cellulaires.
A raison d’une campagne annuelle de 3 échantillons, ce sont 12 échantillons qui ont été traités pour chaque programme avec des taux de conformité des résultats rendus par échantillon variant de 76 à 100 %. Les résultats obtenus mettent en évidence l’impact des techniques et des conditions analytiques sur la détection des différents germes; la préparation d’échantillons contenant plusieurs contaminants démontre aussi la possibilité sous certaines conditions de détecter ces différents germes.
L’exploitation des résultats issus de ces évaluations permet de s’assurer de la fiabilité du contrôle microbiologique des produits tissulaires et cellulaires des laboratoires internes ou sous-traitants des Unités de d’ingénierie tissulaire et cellulaire de l’EFS et ce malgré l’hétérogénéité des techniques de détection autorisées et utilisées par les laboratoires de contrôle qualité.

Introduction. La transfusion, traitement clé de la drépanocytose (SCD), peut conduire à des réactions d’hémolyse retardée (HTR) graves et imprévisibles. Or, la production de cytokines inflammatoires est impliquée dans les phases aiguës de la SCD (crises occlusives douloureuses, épisodes hémolytiques, etc…), mais l’évolution des cytokines lors de ces complications reste peu connue.
Patients et méthodes. Nous avons recherché un lien possible existant entre niveaux de cytokines et survenue des réactions d’HTR, afin d’en faire des facteurs prédictifs de ces événements (taux de cytokines comparés avant transfusion /pendant les HTR). Nous avons exploité des plasmas de patients SCD, en état basal (n=31) ou avec des symptômes aigus (n=36), l’un comme l’autre pouvant conduire à une réaction d’HTR (n=18). La technologie Luminex© est utilisée pour doser 23 cytokines.
Résultats. Quel que soit le contexte clinique, les niveaux en interleukin-6 (IL-6), IL-10, IP-10, et MIP-1β sont plus élevées dans les plasmas de drépanocytaires que de donneurs sains. Les taux en IL-6 et IL-10 sont plus élevés dans les plasmas de patients en phase aigüe. De plus, les taux en IL-27 et TNFα sont augmentés et ceux en IL-6 et RANTES diminués, chez les patients SCD au moment du déclenchement d’une réaction d’HTR (par comparaison aux patients en "simple" crise vaso-occlusive).
Conclusion. En plus de décrire les profils de cytokines chez les patients drépanocytaires dans différentes phases de la maladie, nous montrons pour la première fois, une association significative entre (i) une baisse de TNFα et (ii) une augmentation d’IP-10 et de RANTES, avec la survenue des réactions d’HTR dans la drépanocytose

Contexte : Le contexte plus contraint en matière de prélèvement a conduit à nous interroger sur le dimensionnement de l’équipe, de l’organisation afin de définir la meilleure adéquation entre les capacités de collectes et les ressources disponibles. Nous proposons donc un outil paramétrable permettant d’automatiser cette démarche, de la standardiser au regard des attentes des gestionnaires et des contraintes imposées.
Méthode : Un modèle de prélèvement a été imaginé sur le principe d’une charge infinie lissée (flot de donneurs ininterrompu). Le modèle trouve son origine dans des diagrammes de Gantt afin de prendre en considération les contraintes de type juste à temps par le chevauchement et le jalonnement des étapes. Cela a permis de modéliser une matrice de calcul seule accessible à l’opérateur, paramétrable permettant d’intégrer le parc matériel (séparateur, agitateur limiteur), le personnel (médecin, infirmier(e)…), les temps d’ouverture par journée. L’horizon d’investigation se compose en journées types qui peuvent être groupées sur une période (semaine, mois, année). Les calculs sont possibles pour un à trois types de prélèvement réalisés à l’EFS.
Résultats / Conclusion : Nous disposons donc en BFC d’un outil d’optimisation des MDD. L’ajustement des paramètres nous permet de planifier et programmer avec le maximum d’efficacité l’activité de prélèvement en fonction des attendus en nombre de dons, de personnel et des plages d’ouverture. La prévision et le dimensionnement au plus juste des ressources du prélèvement et/ou d’accueil d’un nombre de donneurs programmé par rendez-vous est donc possible. La duplication de cet outil pour les collectes mobiles est en cours.

Introduction:  La réalisation du génotypage RHD fœtal permet d’évaluer le risque de maladie hémolytique fœtale  et donc d’optimiser la prise en charge obstétricale des femmes RH:-1 allo-immunisées, par une méthode simple, fiable et peu invasive. En l’absence d’allo-immunisation, cet examen permet également d’éviter dans 30% des cas une injection d’immunoglobulines anti-RH1.
Matériel et méthodes: Le kit commercial JBoy® DUPLEX est mis en place au laboratoire EFS site de Lyon GHE à la place du kit SIMPLEX utilisé depuis 2015 : les mêmes exons 5, 7 et 10 sont amplifiés par PCR en temps réel utilisant la technologie TAQMan. Un ADN de maïs est toujours utilisé en contrôle positif de chaque échantillon.
Lors de la mise au point du test au laboratoire, les résultats de génotypage ont été comparés au phénotype RH1 à la naissance et à la méthode SIMPLEX.
Une adaptation de la méthode est apportée consistant à effectuer les analyses en double.
Résultats: La validation de méthode effectuée en portée B a permis d’évaluer plusieurs paramètres dont la sensibilité, la spécificité de la méthode ainsi que la valeur prédictive négative et la détection des formes variantes fréquentes.
L’analyse de risques résiduels a permis de mettre en évidence les limites réelles de la méthode, principalement liés à la faible concentration d’ADN fœtal ainsi qu’à l’adaptation des quantités de réactifs. Deplus, nos travaux et analyses ont permis d’affiner les critères d’interprétation biologique.
Le laboratoire a été accrédité ISO15189 la première fois en 2013 pour cet examen.
Conclusions: Ce kit reste simple d'utilisation à l’instar du kit SIMPLEX et doit permettre d’optimiser les "runs" de PCR.

 

Sous titre L’exemple de la mise en place de la méthode de production des MCPS DS.
 
Calcul d’impact Détemination des impacts dans le cadre du process budgétaire sur l’année de mise en place.
Suivi de la mise en place Participation au comité de suivi mensuel de mise en place par la fourniture d’indicateurs de suivi (suivi de la montée en charge de la production en MCPS DS, suivi des indicateurs liés (prépa, délivrance), en lien avec la DCP (collecte, prépa) et délivrance.
Aide à la prise de décision Suivi de la montée en puissance des MCPS DS non divisés, mise en place de divisions asymétriques.

Les enjeux et défis de la chaine de la dépense à l’EFS – HFNO
 
Afin de répondre à la feuille de route nationale et régionale notifiée par le Président de l’Etablissement auprès des régions de l’EFS, l’EFS-HFNO a souhaité optimiser son organisation transversale par un travail collectif sur la chaîne de la dépense, et assurer ainsi  
Une maximalisation financière
Une optimisation des moyens
Une fluidification et simplification de nos procédures internespar la mise en place d’une équipe projet pluridisciplinaire.
L’enjeux principal est la satisfaction de l’ensemble des acteurs des différents départements constituant la chaine transfusionnelle dans  la réalisation des acquisitions nécessaires, en adéquation avec leur expression du besoin.
Le projet d’optimisation de la chaine de la dépense en est un exemple

Le test de génération de thrombine est un test fonctionnel d’évaluation du potentiel hémostatique plasmatique, qui trouve toute sa place dans les dossiers d’évaluation des procédés de fabrication des plasmas produits par l’EFS, soumis à l’ANSM.
Le laboratoire de Contrôle Qualité de l’EFS de Bordeaux s’est équipé de l’instrument automatisé ST Genesia® Stago. Cet automate mesure sur chaque échantillon une cinétique de fluorescence résultant de l’action de la thrombine plasmatique sur un substrat fluorogénique générant un thrombogramme calibré, dont les paramètres sont normalisés grâce à la mesure en parallèle d’un plasma de référence.
 Le réactif STG ®Bleedscreen, dont le réactif déclenchant contient une faible concentration de facteur tissulaire permettant d’explorer les états d’hypocoagulabilité, a été évalué au laboratoire sur cet automate.
Des études de fidélité (répétabilité et fidélité intermédiaire), de sensibilité aux déficits en facteurs VIII et VII, ont été réalisées pour les paramètres suivants du thrombogramme: temps de latence, concentration maximale en thrombine, potentiel de thrombine endogène. Le test de génération de thrombine a également été effectué sur trente-six échantillons de plasmas frais congelés, afin d’initier l’établissement de valeurs de référence.
Les résultats de fidélité sont en adéquation avec les performances annoncées par le fournisseur. L’association de ce couple automate –réactif montre une sensibilité importante aux déficits majeurs en facteurs VIII et VII et une récupération de la capacité hémostatique plasmatique pour des déficits mineurs.

Dans le Syndrome de Guillain Barré (SGB) dû à la COVID-19, peu de cas traités par échanges plasmatiques (EP) ont été rapportés. Nous décrivons les particularités cliniques, thérapeutiques et évolutives d’un patient atteint de SGB traité par EP.
Homme de 55 ans aux antécédents de RCH sous anti-inflammatoires. A J15 post COVID-19 paucisymptomatique (sérologie et TDM thoracique positives, PCR négative), il a été admis pour une paralysie ascendante des membres suivie de troubles à la déglutition. L’EMG a montré une polyradiculonévrite aiguë axonale et le LCR une dissociation albuminocytologique. Douze jours après, il a bénéficié de 4 échanges de 1,5 masse plasmatique par technique de filtration (Prismaflex) tous les 2 jours via un cathéter central (Volume moyen substitué : 3 875 mL ; extrêmes : 3 500-4 000 mL ; 1/3 sérum phy et 2/3 albumine ; anticoagulation par héparine et substitution par Ca++). Un arrêt de l’évolution de la maladie avec gain de la force musculaire des membres supérieurs puis des membres inférieurs et enfin régression des troubles de la déglutition ont été respectivement observés après le 2, 3 et 4ème EP. Une hypokaliémie au 2ème EP a été résolutive sous KCL. A 6 semaines, la marche sans assistance extérieure était possible.
La littérature a rapporté une prédominance du SGB en post-COVID (possible en para-COVID et dans les formes paucisymptomatiques), chez le sexe masculin après 50 ans et dans sa forme démyélinisante.  Les IGIV ont été préférées devant le risque contagieux. En post-COVID-19, l’EP reste une alternative plus accessible par son coût et possiblement efficace même dans les formes axonales dans le traitement du SGB dans notre pays. 

Les immunoglobulines intraveineuses (IVIG) sont le premier traitement du syndrome de Guillain Barré (SGB) de l’enfant. Nous rapportons le cas d’un enfant admis en USI pour SGB répondant aux échanges plasmatiques (EP) après échec du traitement par les IGIV.
Dix jours après une gastroentérite aiguë, l’enfant âgé de 4 ans est admis en USI pédiatrique pour une paralyse flasque, fausses routes et détresse respiratoire nécessitant son intubation. L’électromyogramme a montré une polyradiculonévrite axonale motrice, l’IRM une radiculite de la queue de cheval sans dissociation albuminocytorachique et des anti-gangliosides faiblement positifs. Une dose de 2g/kg d’IVIG a été administrée sur 3 jours dès l’admission sans amélioration. A J28, l’enfant a subi 6 EP : soit 1,5 masse plasmatique via un cathéter central sur MCS+. L’échec de la ventilation après le 3ème EP a justifié une trachéotomie avec extubation après le 4ème EP. Aucun effet indésirable grave n’a été noté. Six semaines après, la force musculaire au début cotée à 0/5 était passée à 2 et 3/5 respectivement aux membres inférieurs et supérieurs.
Dans le SGB de l’enfant, les IGIV sont préconisées en première intention. Le recours aux EP -thérapeutique invasive et non dénuée de risques- est préconisé après échec des IVIG avec des résultats variables et dans les formes graves d’emblée. Un délai de 7 jours est recommandé entre le début du SBG et des EP. Ce cas illustre le raccourcissement de l’évolution d’une forme grave de SGB sous EP au bout d’un mois de l’échec des IVIG.   

Le diagnostic d’une maladie hémolytique néonatale repose sur un faisceau d’arguments cliniques et biologiques. La recherche de la nature immuno-hématologique se base sur les tests de Coombs direct et indirect. D’autres tests tel que le test de Kleihauer malgré leur manque de sensibilité peuvent poser le diagnostic. Nous rapportons une observation particulière ou le test de Kleihauer a permis de poser le diagnostic et guider la prise en charge néonatale.
Il s’agit d’un nouveau-né, née à terme par voie haute pour altération du rythme cardiaque fœtal. A la naissance, le score d’Apgar était à 6 à 1 minute et 10 à 10minutes. Les explorations ont montré une anémie sévère : Hb = 4 g/dl, normochrome normocytaire régénérative.  Un premier test de Coombs direct était négatif. Devant l’urgence, une transfusion sanguine avec du sang phénotypé a été réalisé. Les explorations biologiques (prélèvement avant transfusion) ont montré : un test de Coombs direct positif de type IgG (1+ faible), ne cadrant pas à priori avec la sévérité de l’anémie.  La recherche des anticorps par un panel d’hématies en technique Liss et enzymatique, était négative. La réalisation du test de Kleihauer a montré une positivité franche de 6 %: 600 hématies fœtales pour 100000 hématies maternelles. L’hémolyse immunologique se confirmait. Le sérum de l’enfant et de la mère ont été testé alors contre les hématies du père et le résultat était positif confirmant une anémie hémolytique néonatale dirigé contre un antigène privé hérité par le père. Le Test de Kleihauer , bien que délaissé, peut aider au diagnostic de certaines formes de maladies hémolytiques néonatales.

Introduction Un effet protecteur des groupes sanguins O et B (non-A) contre les formes sévères chez les patients atteints de la COVID-19 a été rapporté par plusieurs études et serait dû à l’effet neutralisateur des anticorps naturels anti-A chez ces sujets.
Objectif   Etudier la corrélation entre le groupe sanguin ABO et la gravité du tableau clinique dans une cohorte tunisienne hospitalisée pour infection au SARS-CoV-2.
Matériel et méthode Il s’agit d’une étude rétrospective incluant de façon consécutive les patients hospitalisés pour COVID 19. Le recueil des données cliniques et paracliniques a été obtenu à partir des dossiers médicaux.
 Résultats Durant la période d’étude, 133 patients  ont été inclus. 53 (39.8 %) étaient du groupe A ou AB (Groupe A), 80 (60.2 %) étaient du groupe O ou B (Groupe non-A). En fonction des facteurs de comorbidités, les patients étaient subdivisés en deux groupes.  Dans le 1er groupe (avec moins de deux facteurs de risques), le taux de mortalité était de 19.2 % pour le Groupe A versus 13.9 % pour le Groupe non-A (p =0.5). Par ailleurs, une différence statistiquement significative a été relevé quant au taux de recours à la réanimation (34.6 % pour le Groupe A versus 11.1 % dans le Groupe non-A ; p = 0.02). Pour le 2ème groupe (avec au moins deux facteurs de risques), pas de différence notifiée (taux de recours à la réanimation de 33.3 % pour les sujets du Groupe A versus 31.8 % pour le Groupe non-A ; p = 0.8).
 Conclusion Chez les patients ayant au plus un seul facteur de comorbidité, l’effet protecteur des anticorps anti-A a été retrouvé dans notre cohorte. avec un taux de recours à la réanimation significativement plus bas dans le groupe non-A

Introduction Depuis l’apparition de la pandémie du COVID 19 et sa propagation, plusieurs études ont été menées afin d’identifier les facteurs de risque d’infection par le SARS Cov-2. Le groupe sanguin fait partie des facteurs étudiés, néanmoins les résultats trouvés différaient d’une série à une autre.
But le but de notre étude était de rechercher l’existence ou non d’une relation entre le groupe sanguin et l’infection au SARS Cov-2.
Méthodes Il s’agit d’une étude rétrospective comparative d’une durée de 6 mois ; de novembre 2020 à avril 2021, conduite sur des malades covid positifs, admis à l’hôpital La Rabta, Tunis Tunisie. On a utilisé comme groupe de contrôle une base de données de 4 ans de patients hospitalisés covid négatifs (N=2900).  L’identification du groupe sanguin ainsi que l’analyse PCR du SARS Cov-2 ont été faits de façon systématique aux laboratoires référents. Les informations ont été collectées à l’aide d’un canevas et reproduit sur un logiciel d’analyse SPSS version 25.0.
Résultats Un total de 133 patients covid positifs ont été inclus, avec un sexe ratio égal à 1,25 (M = 74, F = 59). Dans cette cohorte, le groupe sanguin O été le plus fréquent (41,3 % ; N = 55) suivi de près par le groupe sanguin A (33,8 % ; N = 45). Ces résultats étaient semblables à ceux trouvés dans la cohorte de contrôle (N = 2801) avec un groupe sanguin O à 45,9 % et un groupe sanguin A à 30,3 %.  L’étude statistique par le test Khi-carré n’a pas retrouvé une relation significative entre le groupe sanguin et l’infection au SARS Cov-2 (p = 0,64).
Conclusion Selon notre étude, le groupe sanguin ne semble pas avoir une influence sur le risque d’infection au covid 19.
 

Introduction  La transfusion est un acte médical nécessitant l’intervention de plusieurs acteurs. Du fait de son haut risque, une multitude de recommandations ont été élaborées par les sociétés savantes  visant à encadrer chaque maillon de la chaine transfusionnelle. L’objectif de cette étude était d’évaluer les connaissances théoriques et les conduites pratiques en matière de transfusion sanguine chez le personnel paramédical.
Méthodes  Il s’agit d’une étude descriptive transversale portant sur les connaissances  transfusionnelles chez  le personnel paramédical (N=41) travaillant dans les blocs opératoires et dans les services de réanimation de sept établissements de santé publique. Cette étude s’est déroulée sur sept mois. Un auto-questionnaire anonyme a été administré sous format papier aux différents personnels visés par cette étude et l’évaluation des pratiques a été faite au moyen d’une Grille d’observation.
Résultats  La moitié des participants (n=21 ;51%) avait déclaré avoir bénéficié auparavant d’une formation sur la transfusion sanguine. La majorité des participants (93% et 90%) identifient correctement les tests pré transfusionnels obligatoires selon la législation tunisienne.
L’évaluation des pratiques a montré une confusion pour 40 % des participants entre le cross match au laboratoire et le contrôle ultime au lit du patient. Le contrôle ultime a été réalisé correctement et dans l’ordre par 95% des participants. L’absence de médecin a signalée dans 4 % des transfusions.
Conclusion  Cette évaluation a permis de cibler les lacunes incitant à poursuivre les efforts d’actualisation et d’amélioration des pratiques transfusionnelles.  

Le test de Kleihauer est utilisé pour évaluer le passage sanguin fœto-placentaire pour les  femmes enceintes avec incompatibilité materno-fœtale D (pour ajuster la dose prophylactique d’immunoglobulines anti-D après la naissance) ou pour estimer l’importance d’une hémorragie fœtale avant la naissance. La présence des hémoglobines (Hb) pathologiques ou d’autres hémoglobinopathies chez la mère est la principale cause d’interférence pouvant donner un résultat faux-positif. Nous avons adapté la méthodologie de ce test de Kleihauer afin d’essayer de diminuer ces interférences coloration potentielles. Pour cela, nous avons modifié le protocole, réalisant des étapes distinctes de coloration et d’élution (sur lame). Pour valider cette nouvelle méthodologie, 30 échantillons dont 13 comportant des électrophorèses de l’hémoglobine anormales (HbF>3%, HbS, C, HbA2>3,2%) ont été mélangés avec sang néonatal (de même groupe sanguin ABO). Le nombre d’hématies fœtales HF/10000 hématies adultes HA ont été calculés pour chaque préparation, en prenant en compte les hématocrites du sang adulte et du sang néonatal. Des tests de Kleihauer pour les 30 échantillons ont été réalisés comparativement avec la méthode classique et la nouvelle méthode. La moyenne des différences entre les valeurs comptées au microscope et la valeur calculée passe de 83% avec la coloration classique à 31% avec la nouvelle coloration, montrant que la justesse de la nouvelle coloration dépasse celle de la coloration classique. Pour 8 échantillons, l’écart entre les deux colorations était supérieur à 30%. La nouvelle coloration facilite le comptage juste des HF dans les échantillons maternels porteurs d’anomalies de l’Hb.

Introduction La multiplicité des dangers dans le domaine transfusionnel peut rendre l'actualisation des analyses de risques (AR) extrêmement fastidieuse. L’outil en question vise à rendre la tâche beaucoup plus facile et rapide.

Méthode L’actualisation des AR est issue du retour d’expérience fondé sur les déclarations de non-conformités (NC). Chaque NC est affectée d’un mot-clé lors de sa déclaration dans le logiciel de traitement. Ces mots-clés sont concordants avec les scenarii des risques identifiés dans les AR. L’outil utilisé est un tableur Excel qui, à l’aide de macros, rapproche en deux clics les NC du scenario correspondant dans l’AR et permet la mise à jour quasi-automatique de la vraisemblance et de la gravité de chaque risque.

Résultats Les NC sont pré-réparties au regard d’un scénario d’AR (cf Image). La criticité de chaque risque est automatiquement traduite selon la vraisemblance des NC sur la période étudiée et leur gravité. Lorsque la NC ne correspond à aucun scenario de l’AR, l’outil la porte à l’attention de l’utilisateur pour évaluer son devenir et décider s’il s’agit d’un nouveau risque à prendre en compte.

Conclusion L’outil créé permet un gain de temps considérable et d’aider l’utilisateur dans l’actualisation de son analyse de risques. Il contribue à se focaliser sur la fonction essentielle d’une analyse de risques : prioriser les actions d’amélioration.

Transposition des non conformités dans l'analyse de risques

La Mission des Affaires Internationales (MAI) a pour objectif de promouvoir le modèle « éthique » de l’Etablissement Français du Sang (EFS) à travers le monde. Pour répondre au mieux aux besoins exprimés par les pays partenaires et contribuer à l’amélioration des systèmes transfusionnels, la MAI soutient le renforcement des capacités des ressources humaines à travers des actions d’appui à la formation et à l’enseignement en matière de Transfusion Sanguine.
La coopération de l’EFS avec son homologue tunisien est ancienne et a pris un tournant plus important depuis quelques années avec l’appui important de l’ambassade de France pour l’accueil de nombreux stagiaires en France à l’EFS. Par ailleurs, elle s’appuie sur un accord-cadre de coopération avec la faculté de pharmacie de Monastir pour la réalisation d’un mastère professionnel d’hémobiologie, transfusion et thérapie cellulaire. Ce mastère est le premier, au monde, qui bénéficiera de la labellisation Campus EFS.
Campus EFS est l’organisme de formation continue de l’EFS. Afin d’harmoniser et de promouvoir les formations en transfusion au niveau national et de valoriser les actions internationales de l’EFS, Campus EFS a décidé d’attribuer son label à toute action de formation respectant des critères scientifiques et pédagogiques de labélisation définis. Ces critères portent notamment sur les objectifs pédagogiques de la formation, l’établissement d’accueil, le public visé, le suivi, les modalités d’évaluation, le financement…etc.
Le label est attribué pour une durée de 3 ans. Au terme de cette période, la formation qui a obtenu le label peut solliciter la prolongation de son usage pour une nouvelle période de 3 ans.

Il est actuellement bien documenté que l’infection par le coronavirus SARS-CoV-2 induit une dysrégulation immunologique pouvant se manifester par un large spectre de complications dont les complications hématologiques auto-immunes.  Nous rapportons le cas d’une anémie hémolytique auto-immune (AHAI) sévère révélatrice d’une infection par le SARS-CoV-2 chez un nourrisson.
Patiente âgée de 3 mois, née à terme, hospitalisée dans un tableau de pâleur aiguë constatée depuis 24h, vomissements et méléna avec refus de téter. Sa mère rapporte la notion d’introduction d’un nouveau régime alimentaire à base d’encens (gomme arabique), d’huile d’olive et d’épices 4 jours avant l’hospitalisation. L’examen a objectivé une pâleur, un ictère diffus, une dyspnée, une tachycardie et une sensibilité abdominale diffuse. L’exploration biologique a révélé une anémie profonde (Hb: 2,9 g/dL), hémolytique avec un test direct à l’antiglobuline positif (4+) de type IgG et un test de Donath Lansdteiner négatif. Une thrombopénie transitoire a été constatée. La radiographie thoracique a montré un syndrome alvéolaire bilatéral. L’enquête étiologique était négative à part une sérologie COVID-19 positive de type IgM chez la patiente et sa mère. La PCR était négative. Devant la sévérité du tableau clinique, la patiente a été transfusée et mise sous corticothérapie intraveineuse avec une évolution favorable.
L’AHAI est très rarement rapportée comme présentation inaugurale de la COVID-19. La relation de cause à effet est difficile à démontrer mais l’association temporelle de cette présentation suggère que la COVID-19 est le facteur causal de l’AHAI.

Contexte La drépanocytose, première maladie génétique, touche les individus d’origine Afro-Antillaise chez lesquels les variants du système RH sont fréquents. Une analyse de biologie moléculaire (BM) à la recherche des variants RH les plus courants est recommandée en France pour les drépanocytaires. Certains variants peuvent être révélés par un affaiblissement d’expression antigénique lors du groupage sanguin érythrocytaire. Suite à l’observation récurrente d’images d’affaiblissement (IA) en technique microplaque (Qwalys 3, Diagast) sans variant RH identifié par BM, l’étude suivante a été menée.
Matériel et méthodes Réalisation du groupage sanguin par microplaque pour tout patient drépanocytaire sans transfusion récente. Contrôle du phénotype en gel-filtration avec les mêmes anticorps de groupage. Réalisation de la BM du système RH selon les recommandations. Comparaison des trois techniques.
Résultats Sur 350 prélèvements inclus, 88 présentaient une IA en microplaque (57 patients différents). L’affaiblissement n’était confirmé en microfiltration que pour 22 échantillons (25%). L’analyse statistique montrait une différence entre la microplaque et la BM (p<0,05), avec une meilleure corrélation entre la microfiltration et la BM pour les antigènes D (RH1) et e (RH5). Les antigènes (C) RH2 variants étaient très mal détectés par la sérologie.
Conclusion Ces résultats soulignent à nouveau l’importance de la BM systématique du RH pour les drépanocytaires. L’observation d’une IA sur microplaque Qwalys chez un patient drépanocytaire pourrait être liée à une fragilité des hématies, et doit donc faire repenser la mise en place immédiate d’un protocole transfusionnel antigène négatif.

Le titrage des anticorps anti-érythrocytaires en test indirect à l’antiglobuline permet de quantifier les taux d’anticorps maternels et d’évaluer le risque hémolytique fœtal et néonatal. La diversification des techniques de titrage rendue possible par l’arrêté IH de mai 2018 et l’obligation pour tous les examens de laboratoire de disposer d’un contrôle externe de qualité a amené le CNRHP, conformément à ses missions (circulaire ministérielle DGOS 2004), à collaborer avec ASQUALAB pour mettre en place une évaluation externe de la qualité. Ce programme propose 2 fois par an un échantillon de plasma associé à un cas clinique.
Depuis 2019, 3 échanges ont été proposés. Pour les campagnes de titrage d’anti-D (RH1) et d’anti-c (RH4)), 7 laboratoires/7 ont rendu un résultat dans les bornes attendues avec des conseils pour le suivi clinico-biologique adaptés. Pour la campagne de titrage d’anti-M (MNS1), les valeurs des titres trouvés oscillaient entre <1 et 16 en technique tube et 64 en gel. Les conseils clinico-biologiques associés aux résultats étaient variables, non seulement en fonction du titre trouvé, mais aussi du fait d’une considération globale différente du risque obstétrical lié à l’anti-M.
Ces résultats soulignent la bonne standardisation inter-laboratoire des techniques de titrage des anticorps dans le système RH, et l’homogénéité dans l’interprétation de leurs résultats. Ils montrent en revanche que des différences importantes sont possibles pour d’autres spécificités d’anticorps, comme l’anti-M, dont l’expression antigénique peut varier selon les pools d’hématies tests utilisés, et dont la dangerosité obstétricale peut être difficile à évaluer.

Après transfusion, les patients peuvent présenter une immuno-modulation, et notamment développer des allo-immunisations dirigés contre antigènes apportés par les produits sanguins labiles. Nous faisons l’hypothèse que les vésicules extracellulaires (EV) sont impliquées dans cette immuno-modulation. Les EVs sont libérées dans le sang après une activation cellulaire. Quelques études ont déjà montré les effets des EVs sur le système immunitaire, mais sans en considérer les EVs lymphocytaires (LEV). 

Nous avons évalué la capacité des LEVs et des EVs totales présentes dans les produits transfusionnels à moduler le système immunitaire en fonction de leur concentration, de leur origine cellulaire et de leur phénotype. Nous avons analysé par cytométrie en flux la co-expression des marqueurs d’immuno-modulation sur les LEVs. Les EVs totales et les LEVs ont également été purifiées par cytométrie en flux afin d’étudier leur fonctionnalité sur le système immunitaire. Ainsi, nous avons pu étudier le contenu en cytokines des LEVs et leur fonctionnalité in vitro sur les Treg et Tfh, ainsi qu’in vivo dans un modèle murin. Les marqueurs d’immuno-modulation sont présents sur les LEVs. L'expression de certains marqueurs sur les LEVs est associée à un plus grand contenu en cytokines et à une lymphoprolifération plus élevée que les EVs totales. Les EVs facilitent également les réponses humorales in vitro et in vivo. Cette immunomodulation est également dépendante de la quantité d'EVs. L'origine cellulaire des EVs, leurs marqueurs d'activation, leurs contenus et leurs concentrations pourraient être pris en compte pour réduire l'impact de la transfusion sur l'immunité des patients.

La technique de Kleihauer (KH) permet de détecter et de quantifier une hémorragie foeto-maternelle (HFM). Le test de référence, test cytochimique sur frottis sanguin, a ses limites notamment en présence d’une pathologie de l’hémoglobine chez la mère. Dans ce contexte, seule une technique complémentaire de cytométrie en flux (CMF) associant marquage de l’hémoglobine fœtale (HbF, marqueur des cellules fœtales et des cellules adultes contenant de l’HbF ou F-cells) et de l’anhydrase carbonique (AC, marqueur des cellules adultes) permet de conclure sur la présence ou non d’une HFM comme l’illustre le cas de Mme SAI. Un KH est prescrit à 25SA pour une diminution des mouvements actifs fœtaux. Elle est connue pour une bêta thalassémie homozygote avec 6.1%d’HbF. Le KH sur lame est très évocateur d’hématies fœtales (HF) avec uniquement des hématies roses foncées sans dégradé de couleur. En général, en présence d’une pathologie de l’hémoglobine, les F-cells ont une coloration hétérogène rose pâle au rose foncé. Un premier comptage montre un passage à 632HF/10000 Hématies Adultes soit 316ml de sang fœtal, en total discordance avec la clinique et le terme de la grossesse. Le marquage HbF/AC en CMF a également un aspect atypique avec 2 populations distinctes : une HbF-AC+ correspondant au hématies adultes sans HbF et une 2ème population HbF+ mais AC+, signe la nature adulte de cette population. L’absence de population HbF+AC- permet de conclure à l’absence d’une HFM. La technique de KH par CMF, bien que peu adaptée à l’urgence, est une technique complémentaire indispensable à la détection d’une HFM en présence d’une pathologie de l’hémoglobine chez la mère.

Le microtitrage des anti-RH1, technique d’hémagglutination en support gel, permet de quantifier les faibles taux d’anti-RH1. Elle est adaptée au dosage des anti-RH1 passifs consécutifs à l’injection d’IgRh dans le cadre de la prophylaxie rhésus. La perspective d’une plus large utilisation de cette technique grâce à l’automatisation et l’obligation pour tous les examens de laboratoire de disposer d’un contrôle externe de qualité a amené le CNRHP qui intègre dans ses missions (circulaire ministérielle DGOS 2004) la préparation de standard et de contrôle de qualité, a collaboré avec ASQUALAB pour mettre en place une évaluation externe de la qualité. Ce programme propose 2 fois par an un échantillon de plasma associé à un cas clinique. Depuis 2019, 3 échanges ont été proposés avec une quinzaine de participants. La majorité des laboratoires utilise une technique manuelle sur hématies papaïnées. Plus de 90% des laboratoires ont rendu un résultat correct. Les 2 résultats erronés sur l’ensemble des 3 campagnes correspondent à un non rendu de résultat et à un résultat rendu négatif, terme inapproprié puisqu’il s’agissait d’une concentration inférieure au seuil de détection pour la méthode utilisée par ce laboratoire. L’interprétation sur la nature des anti-RH1 passif ou immun était correcte pour tous les laboratoires. En revanche des différences de pratique peuvent être observées pour la partie conseil sur l’immunoprophylaxie rhésus qui n’est pas réalisée par tous. La technique de microtitrage est une technique simple globalement bien maitrisée par l’ensemble des laboratoires participant et d’une aide précieuse dans le suivi et la prise en charge de la femme enceinte RH1 négatif.

Contexte Pour l’Etablissement Français du Sang, responsable de l’approvisionnement des Etablissements de Santé, l’implantation de nouvelles maisons du don en milieu urbain est un enjeu stratégique. L’EFS Ile-de-France a depuis 30 ans une Maison du don installée dans le 15ème arrondissement, la dernière implantation se situant rue Alexandre Cabanel. Toutefois, le bailleur souhaite récupérer l’usage de ses locaux fin 2021. Le site de prélèvement actuel est un des plus importants de la région. La réimplantation de la Maison du don dans ce secteur géographique doit répondre à plusieurs critères qui sont : assurer la fidélité des donneurs actuels, l’implantation et la visibilité dans un quartier avec un flux de population important, l’accessibilité et la proximité des transports en commun. La géomatique intègre à la fois une visualisation cartographique, mais également toutes les analyses spatiales et les traitements sur les données en amont. Cette approche globale répond aux besoins de sélection de zones d’intérêt. Méthode L’équipe projet de la cellule géomatique présente sa méthode. Cette étude est basée sur les données EFS, IGN et INSEE. Résultats un rapport présentant les différentes possibilités d’implantation cible des zones au niveau de l’avenue Emile Zola, de la station Convention et de la gare Montparnasse en raison de leur fréquentation, de leur attractivité notamment commerciale et de la proximité de transports en commun. Conclusion La maîtrise d’outils de géolocalisation permet de cibler dans des délais courts des zones à fort potentiel de dons. Ce type d’étude permet de garantir un recrutement performant en tenant compte d’un contexte urbain dense.
 

La prise en charge des patients sous Xabans pour hémorragie ou geste invasif urgent repose sur l’utilisation de CPP ou FEIBA (GIHP 2016). L’antidote n’est pas disponible et les Xabans ne sont pas dialysables. L’effet des échanges plasmatiques thérapeutiques (EPT) indiqués pour polyradiculonévrite démyélinisante contre de l’albumine 4% a été évalué chez 4 patients (poids médian 95kg) traités préventivement pour FA : 2 sous rivaroxaban, 8 procédures ; 2 sous Apixaban, 6 procédures. La prise médicamenteuse a lieu 2H15 en moyenne avant l’EPT. 1,1 masse plasmatique est traitée sur séparateurs Optia° et ComTec° en 2H20. Le dosage des facteurs de la coagulation et la mesure de l’activité antiXa des Xabans est effectué avant et après EPT Le taux résiduel (TR) est défini par le rapport (%) entre la valeur après et avant EPT.
Les valeurs initiales (m+SD) étaient pour Apixaban: 236+76 ng/mL vs 195+43 pour le Rivaroxaban, et respectivement 136+26 vs 125+42 après EPT. Le FV,  peu impacté par les Xabans, montre des TR similaires pour les 2 médicaments: 37%. Le TR d’Apixaban est très reproductible: 58,4+3,1%, et supérieur à celui du FV, indiquant que le pool plasmatique est alimenté pendant l’EPT par l’absorption du médicament récemment administré; l’extraction réelle est donc supérieure à celle déduite du TR. Le TR du Rivaroxaban est plus élevé et plus irrégulier: 71,5+15,1%, peut-être en lien avec son absorption très dépendante  des repas.
Les EPT diminuent significativement la concentration des xabans avec une procédure courte, non prothrombotique et ne requérant ni voie centrale ni héparinisation. L’EPT pourrait être prolongé et substitué par du PFC pour optimiser l’hémostase.

Introduction La possibilité de prescrire des PSL avec une validité de RAI allant jusqu’à 21j existe de longue date sous dérogation. En 2018 les Bonnes Pratiques Transfusionnelles ont autorisé une utilisation plus large de cette pratique, plus adaptée au fonctionnement de la chirurgie ambulatoire. La difficulté réside dans l’information portée au prescripteur des contre-indications (allo-immunisation, transfusion récente, et parfois notion de greffe).
L’EFS PACC propose depuis 2 ans, un bilan biologique assorti d’un conseil, permettant au médecin avant la prescription de PSL, de s’assurer qu’il pourra, ou pas, bénéficier le jour du bloc opératoire d’une durée étendue de validité de la RAI.
Méthode  Retour d’expérience de 18 mois d’un ES chirurgical privé. Lors de la consultation d’anesthésie est prescrit un bilan biologique réalisé à l’EFS combinant : un résultat de RAI, une vérification des pathologies, de l’historique transfusionnel des 6 derniers mois, une interprétation claire et un conseil.
Résultats 2757 bilans « RAI 21 jours » demandés (44% des RAI de l’ES) : 98 bilans (3,8%) montrant que la validité ne pouvait pas être étendue au-delà de 72h. Analyse des causes (cf tableau)

Ventilation des causes de non validité de la RAI jusqu’à 21j